乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验
实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶I (NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑蓝(INT)或硝基氯化四氮唑蓝(NBT)形成有色的甲簪类化合物,在490nm或570nm波长处有一高吸收峰,利用读取的OD值,经过计算即可得NK细胞活性 实验步骤 1.靶细胞制备 取培养24~48h的靶细胞,洗涤3次,最后用完全RPMI-1640培养液调整细胞浓度至1×105/ml,备用。 2.效应细胞的制备 常规方法分离PBMC或小鼠脾细胞,洗涤3次,最后用完全RPMI-1640培养液调整细胞浓度至1×l07/ml。 3.效-靶细胞作用 将效应细胞和靶细胞各0.1......阅读全文
乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验
实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶I (NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸
乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验
实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成
乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验
实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成
乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验
实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶I (NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪
NK细胞活性测定实验——乳酸脱氢酶释放法
实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)存在于细胞内,正常情况下,不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时,由于细胞膜通透性改变,LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH再催化乳酸的过程中,使氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)变成还原型辅酶(NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑
NK细胞活性测定:LDH法
实验方法原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上
NK细胞活性测定:LDH法
实验概要活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上
NK细胞活性测定:LDH法原理和实验步骤
一、原理 活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶
LDH法测定NK细胞活性
一、原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上用4
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA检测法
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 LDH 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 LDH与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠LDH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strep
NK细胞活性检测实验步骤
细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp
血清乳酸脱氢酶(LDH)活性测定方法和意义
乳酸脱氢酶是体内能量代谢过程中的一个重要的酶。此酶几乎存在于所有组织中,以肝、肾、心肌、骨骼肌、胰腺和肺中为最多。这些组织中的LDH的活力比血清中高得多。所以当少量组织坏死时,该酶即释放血而使其他血液中的活力升高。测定此酶常用于对心梗、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。 1.正常参考值速率法(LD
细胞介导细胞毒作用检测法3:LDH释放法
LDH释放法1)测定方法1.用含5%小牛血清的RPMI-1640培养液将靶细胞调整到5×104~2×105/ml,此浓度需根据情况预先标定。2.在96孔圆底细胞培养板中加入靶细胞,每孔加100μl。3个效应细胞自然释放对照孔不加靶细胞,只加100μl培养液。3.向各孔加100μl效应细胞,效应细胞与
NK细胞活性测定实验——放射性核素释放
实验方法原理用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料靶细胞试剂、试剂盒
血清乳酸脱氢酶(LDH)活性测定的临床意义是什么
1.正常参考值 速率法(LDH-L法):100~240 U/L 比色法:190~310 U/L 2.临床意义: ①心肌梗塞:心肌梗塞后9~20h开始上升,36~60h达到高峰,持续6~10天恢复正常(比AST、CK持续时间长),因此可作为急性心肌梗塞后期的辅助诊断指标。 ②肝脏疾病:急
NK细胞活性测定实验
实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试
比色法测定血清乳酸脱氢酶(LDH)实验
实验方法原理 乳酸脱氢酶催化L-乳酸脱氢,生成丙酮酸,丙酮酸和2,4-二硝基苯肼反应,生成丙酮酸、二硝基苯腙,在磁性溶液中呈棕红色,其颜色深浅与丙酮酸浓度成正比,由此计算酶的活力单位。实验步骤 一、 实验试剂:1. 底物缓冲液(含0.3mol/L乳酸,PH8.8):称取二乙醇胺2.1g,加蒸馏水约8
比色法测定血清乳酸脱氢酶(LDH)实验
实验方法原理乳酸脱氢酶催化L-乳酸脱氢,生成丙酮酸,丙酮酸和2,4-二硝基苯肼反应,生成丙酮酸、二硝基苯腙,在磁性溶液中呈棕红色,其颜色深浅与丙酮酸浓度成正比,由此计算酶的活力单位。实验步骤一、 实验试剂:1. 底物缓冲液(含0.3mol/L乳酸,PH8.8):称取二乙醇胺2.1g,加蒸馏水约80m
乳酸脱氢酶(LDH)的医学决定水平
参考值100~240U/L(L→P)170U/L此值在参考范围以内,等于或低于此值可排除许多与LDH升高有关的疾病,而考虑其他的诊断。此值还可作为病人自身的对照,用来与以前或将来的测定值作比较。300U/L高于此水平时,应考虑到可能引起LDH升高的各种疾病,如心肌梗塞、肝病变、传染性单核细胞增多症、
普通生化检验乳酸脱氢酶(LDH,LD)
乳酸脱氢酶(LDH,LD)介绍: 乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。乳酸脱氢酶(LDH,LD)正常值: 血清:100-300U/L; 尿:560-2050U/L; 脑脊液含量为血清的1/10。乳酸脱氢酶(LDH,LD)临床意义: 增高:见于肝
125IUdR释放试验测定NK细胞活性
自然杀伤(NK)细胞参与了机体免疫防御的第一道防线,主要用于(1)免疫监视系统中抗肿瘤抗病毒(2)免疫调控。实验方法原理25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外
125IUdR释放试验测定NK细胞活性
实验方法原理 25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,以外周血分离的单个
125IUdR释放试验测定NK细胞活性
实验方法原理25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,以外周血分离的单个核细胞或小鼠脾细胞作为效应细胞,进行体外NK细胞活性检测。被
肝功能化学检测项目介绍乳酸脱氢酶(LDH,LD)
乳酸脱氢酶(LDH,LD)介绍: 乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。乳酸脱氢酶(LDH,LD)正常值: 血清:100-300U/L; 尿:560-2050U/L; 脑脊液含量为血清的1/10。乳酸脱氢酶(LDH,LD)临床意义: 增高:
人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒
人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 LDH 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 LDH与单抗结合,加入生物素化的抗人LDH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptav
昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析
昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定昆虫血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的昆虫乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的大鼠乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相
肝功检查项目介绍乳酸脱氢酶(LDH,LD)
乳酸脱氢酶(LDH,LD)介绍: 乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。乳酸脱氢酶(LDH,LD)正常值: 血清:100-300U/L; 尿:560-2050U/L; 脑脊液含量为血清的1/10。乳酸脱氢酶(LDH,LD)临床意义: 增高:见于肝
靶细胞杀伤实验:LDH法
一、效应细胞的制备 激惹5天后,于无菌条件下取出受鼠引流的腹股沟淋巴结,100目钢网研磨,调整细胞浓度为2×107.ml-1。台盼蓝色要求存活率>95%。 二、靶细胞的制备 P815细胞株系DBA/2小鼠的肥大细胞瘤细胞株。连续传代培养,调整细胞浓度为2×105/ml或3.33×1
乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒使用说明
乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒产品编号产品名称包装C0017乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒500次产品简介:一基的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit),也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Relea