DPBSA的配制与灭菌
实验方法原理不断地搅拌将干粉溶解，调整至终体积，检测 pH 和传导率，按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉实验材料D-PBS 干粉超纯水试剂、试剂盒搅拌粒仪器、耗材容器抽吸器硼硅酸盐玻璃器皿传导率测量仪或渗透压计pH 计高压灭菌器高压灭菌胶带或无菌指示标签实验步骤1. 在容器中加入1L 超纯水。2. 将容器放到磁力搅拌器上，转速设定为20 r/min 左右。3 . 打开 D-PBS 干粉的包装或取 10 个药片，慢慢地加人容器中边加入边搅拌。4. 一直搅拌到干粉完全溶解。5. 检测样品的 pH 和传导率，并做记录。(a) pH 的变化不应超过 0.1 个单位（不同的配方 pH 可能不同）。(b)传导率的变化不应超过 15 μS/cm 的 5% 。也可选择测定渗透压（或都测），每批之间应该显示类似的传导率。(c)丢弃测量用样品，注意不要加回到原液中。6. 将容器中的液体分装到有刻度的瓶子中。7 . 盖好瓶盖，密封。用带......阅读全文
借电阻进行电子细胞计数
实验方法原理 将细胞样品稀释在电解质（生理盐水或D-PBSA ) 中，然后移入带孔管子的下部，让0.5ml的样品溶液流过计数器以计算其中的细胞数。 实验步骤
借电阻进行电子细胞计数
实验方法原理将细胞样品稀释在电解质（生理盐水或D-PBSA ) 中，然后移入带孔管子的下部，让0.5ml的样品溶液流过计数器以计算其中的细胞数。实验步骤材料无菌：细胞培养物、D-PBSA、0. 2 5 % 粗制胰蛋白酶、生长培养基非无菌：计数杯操作步骤1. 用胰酶消化单层培养的细胞，或从悬浮培养中收
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下，成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞，分
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下，成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞，分
Giemsa染色
实验方法原理培养物用甲醇固定，直接用未稀释的 Giemsa 液进行染色，然后1：10 稀释染液，清洗培养物，在潮湿状态下观察。实验材料D-PBSAD-PBSA:甲醇（1:1)试剂、试剂盒未稀释的Giemsa染液甲醇去离子水实验步骤本程序假设用单层细胞进行染色，而固定的悬浮细胞也可以使用，但从第6 步
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
实验方法原理 在添加 20%（fetal bovine serum， FBS) 的 Ham's F12 培养中，原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下，这些细胞增殖和分化，融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。试剂、试剂盒 Ham F12FBSD-PBSA仪器、耗材 手术
角膜上皮细胞培养
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒 D-PBSA无血清角质形成细胞培养液 胰蛋白酶 EDTA Biocoat6孔培养板实验步骤 一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液（keratinocyteserum-freemedium
方案－23.2－角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。 试剂、试剂盒 D-PBSA
角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒D-PBSA无血清角质形成细胞培养液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培养板实验步骤一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液（keratinocyteserum-freemedium，KGM;C
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞
实验方法原理 在添加 20 %（fetal bovine serum，FBS）的 Ham’s F12 培养中，原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下，这些细胞增殖和分化，融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验材料 D-PBSA试剂、试剂盒 转运培养液生长培养液链酶菌蛋白酶液仪
H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验
实验方法原理细胞培养至适当密度，用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min，清洗后固定细胞，除去未掺入的前体物，准备同位素放射自显术。实验步骤材料无菌培养细胞生长液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脱氧核苷，2.0MBq/ml (约 50uCi/ml)，75 GBq/mmol (约
3H胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验
实验方法原理细胞培养至适当密度，用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min，清洗后固定细胞，除去未掺入的前体物，准备同位素放射自显术。实验步骤材料无菌培养细胞生长液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脱氧核苷，2.0MBq/ml (约 50uCi/ml)，75 GBq/mmol (约
动物细胞培养7
无Ca2＋和Mg2＋的 Dulbecco 磷酸盐缓冲液（D-PBSA）的制备与灭菌实验方法原理目的在常压下使用的等渗盐溶液的制备。应用用于稀释浓缩液．如稀释2.5％腆蛋白酶；胰蛋自酶消化前的预漂洗，收集细胞或换试剂时的清洗溶液。因为它不含Can+和Mg汁，NaHCO3或葡萄糖，所以不适合长时间孵育。
贴壁效率的测定实验
实验方法原理以低密度接种细胞，温育直至集落形成，染色与计数集落实验步骤 材料 无菌 生长液 400 ml 0.25% 粗制胰蛋白酶 10 ml Petri 培养皿，6 cm 20 个 试管或通用玻璃容器，稀释用 20 个 非无菌 血球计数板或电子计数仪 固定液：无水甲醇 100 m
淋巴细胞的分离
实验方法原理 通过右旋糖酐促沉降作用去除红血细胞后，将枸橼酸或肝素抗凝的全血或血浆层加在致密的 Ficoll-Hypaque 层上面。离心后，大部分淋巴细胞位于 Ficoll-Hypaque 和血浆之间的界面。
神经聚集物
实验方法原理从妊娠 17 d 或 18 d 的胎鼠取出脑（与地方动物伦理委员会联系），将脑制成单细胞悬液。通过在用琼脂预涂的多孔培养板中培养，使脑细胞形成聚集物。在 20 d 的培养过程中，聚集物中的细胞形成成熟的器官样脑结构。实验材料PBSAⅡ型胰蛋白酶试剂、试剂盒Dulbecco改良的Eagle
神经聚集物
实验方法原理 从妊娠 17 d 或 18 d 的胎鼠取出脑（与地方动物伦理委员会联系），将脑制成单细胞悬液。通过在用琼脂预涂的多孔培养板中培养，使脑细胞形成聚集物。在 20 d 的培养过程中，聚集物中的细胞形成成熟的器官样脑结构。
方案21.10－贴壁效率的测定实验
方案21.10 贴壁效率的测定实验 实验方法原理 以低密度接种细胞，温育直至集落形成，染色与计数集落
神经聚集物
方案25.5 神经聚集物 实验方法原理 从妊娠 17 d 或 18 d 的胎鼠取出脑（与地方动物伦理委员会联系），将脑制成单细胞悬液。通过在用琼脂预涂的多孔培
方案27.1－淋巴细胞的分离
实验方法原理 通过右旋糖酐促沉降作用去除红血细胞后，将枸橼酸或肝素抗凝的全血或血浆层加在致密的 Ficoll-Hypaque 层上面。离心后，大部分淋巴细胞位于 Ficoll-Hypaque 和血浆之间的界面。
口腔角质形成细胞
实验材料D-PBSA0.17%胰蛋白酶PET试剂、试剂盒转运培养液生长培养液含抗菌素的生长培养液手术刀和11号刀片眼科剪眼科镊2把50mm或100mm培养级Petri培养皿35mm和100mm非培养级Petri培养皿15ml锥形离心管微量加液器涂有FN C BSA的50mm培养皿实验步骤一、原代培养
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞
在添加 20 %（fetal bovine serum，FBS）的 Ham’s F12 培养中，原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下，这些细胞增殖和分化，融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验方法原理在添加 20 %（fetal bovine serum，FBS）的 Ham
旋转瓶培养
实验方法原理 将细胞悬液加入到圆形培养瓶中，然后将培养瓶放在旋转架上缓慢转动。实验材料 D-PBSA0.25%天然胰蛋白酶单层细胞二氧化碳仪器、耗材 培养液和培养液容器旋转培养瓶血细胞计数板或电子细胞计数器和计数用液体旋转架实验步骤 1. 用胰蛋白酶消化细胞，以通常密度种植。旋转瓶中的气相较大，
旋转瓶培养
实验方法原理将细胞悬液加入到圆形培养瓶中，然后将培养瓶放在旋转架上缓慢转动。实验材料D-PBSA0.25%天然胰蛋白酶单层细胞二氧化碳仪器、耗材培养液和培养液容器旋转培养瓶血细胞计数板或电子细胞计数器和计数用液体旋转架实验步骤1. 用胰蛋白酶消化细胞，以通常密度种植。旋转瓶中的气相较大， 故用基于
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验——分离培养细胞
骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞，可用于（1）肌细胞的结构研究（2）肌细胞功能研究（3）对肌细胞的相关课题研究（4）临床细胞移植。实验方法原理骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下，成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞，分
PCR－测定支原体
实验材料 Taq DNA多聚酶引物阳性对照DNA脱氧核苷三磷酸混合物三磷酸琼脂糖1.3%TAE胶试剂、试剂盒 磷酸缓冲盐溶液液Tris醋酸EDTA6×加样缓冲液引物储备液仪器、耗材 DNA抽提和纯化系统基质的DNA抽提试剂盒热循环仪实验步骤 一、DNA 标本的收集和制备1. 需要检测支原体污染的细胞
PCR－测定支原体
实验材料Taq DNA多聚酶引物阳性对照DNA脱氧核苷三磷酸混合物三磷酸琼脂糖1.3%TAE胶试剂、试剂盒磷酸缓冲盐溶液液Tris醋酸EDTA6×加样缓冲液引物储备液仪器、耗材DNA抽提和纯化系统基质的DNA抽提试剂盒热循环仪实验步骤一、DNA 标本的收集和制备1. 需要检测支原体污染的细胞系，在收
单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法进行荧光原位杂交
实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂
利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘进行荧光原位杂交
实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂
利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法荧光原位杂交
实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂