大鼠星型胶质细胞培养实验——胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠胚胎试剂、试剂盒L-15培养基胶原酶DnaseD-MEM-BSFCS-DMEM阿糖胞苷仪器、耗材离心机水浴锅培养瓶培养箱实验步骤一、分离大鼠胚胎(16-18周)新皮层,置于L-15(或Hank's平衡盐/DMEM溶液,无Hepes)培养基中,除去脑膜和血管、海马、尾核和其他非皮层组织。二、 用解剖刀将其切成1 mm3大小的组织块。三、用1ml枪头转移250 ul 胶原酶储存液(1.33%,溶于L-15中)到1 ml的L-15(或D-MEM)中。每2只鼠脑组织块使用1-1.5 ml稀释胶原酶液。四、37℃水浴中孵育30 min。五、1 000 rpm(大约230g)中离心5 min,或3 000 rpm(大约2 000 g)中离心1 min。六、去上清。七、在含EDTA-CMF的溶液中重悬细胞,并与胰蛋白酶以1:4~1:10比例混合。可以根据观察到的细胞消化的情况,适当调整两者的比例。八、加入胰蛋白酶......阅读全文

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠胚胎试剂、试剂盒L-15培养基胶原酶DnaseD-MEM-BSFCS-DMEM阿糖胞苷仪器、耗材离心机水浴锅培养瓶培养箱实验步骤一、分离大鼠胚胎(16-18周)新皮层,置于L-15(或Hank's平衡盐/DMEM溶液,无Hepes)培养基中,除去脑膜和血管、海马、尾核和其他非皮层

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法

实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,

大鼠星型胶质细胞培养实验

酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法             实验方法原理 大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺

大鼠星型胶质细胞培养实验

酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法             实验方法原理 大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺

神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1.  选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2.  解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3.  将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM

细胞技术专题:大鼠星型胶质细胞培养实验

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。  实验方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验材料大鼠胚胎 试剂、试剂盒L-15培养基 胶原酶 Dnase D-MEM-B

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验——牛血清培养法

大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料Wistar大鼠试剂、试剂盒亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——酶消化法

实验材料小鼠试剂、试剂盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培养液仪器、耗材培养箱实验步骤一、小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤1.  于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1 min,解剖出完整鼠脑。2.  预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块。3.

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验

牛血清培养法             实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验

牛血清培养法             实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。

组织的分离实验_胰蛋白酶消化消化分离法

实验方法原理胰蛋白酶适于消化细胞间质较小的软组织,如胚胎组织、羊膜、上皮组织、肝、肾等软组织,对传代细胞也非常好。用于消化纤维性组织或较硬的癌组织则较差。Ca2+和Mg2+对胰蛋白酶的活性有一定抑制作用,故需用不含这些离子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用,因此在做细胞传代时,用胰蛋白酶消

初代细胞培养实验——消化培养法

初代培养或原代培养,可以用于:(1)从供体获取组织后的首次培养;(2)组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细胞团或单个细胞,便于细

什么是星型胶质细胞?

  星形胶质细胞,是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞,也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术(银染色)显示此类胶质细胞呈星形,从胞体发出许多长而分支的突起,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间,起支持和分隔神经细胞的作用。细胞突起的末端常膨大形成脚板(footplate)或称终足(end

星型胶质细胞的分类

  根据胶质丝的含量以及胞突的形状可将星形胶质细胞分为两种:纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质,突起细长,分支较少,胞质中含大量胶质丝,又称蜘蛛细胞(spider cell);原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte),多分布在灰质,

星型胶质细胞的分类

  根据胶质丝的含量以及胞突的形状可将星形胶质细胞分为两种:纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质,突起细长,分支较少,胞质中含大量胶质丝,又称蜘蛛细胞(spider cell);原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte),多分布在灰质,

星型胶质细胞的分类

  根据胶质丝的含量以及胞突的形状可将星形胶质细胞分为两种:纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质,突起细长,分支较少,胞质中含大量胶质丝,又称蜘蛛细胞(spider cell);原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte),多分布在灰质,

大鼠视神经少突胶质细胞培养

实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料 Wistar大鼠试剂、试剂盒 亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺素黄体酮谷氨酰胺小牛血清兔抗鼠GC抗体仪器、耗材 眼科剪滴管离心机培养皿 CO2培养箱实验步骤 一、实验步骤1.  取新生2

星型胶质细胞的相关介绍

  星形胶质细胞,是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞,也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术(银染色)显示此类胶质细胞呈星形,从胞体发出许多长而分支的突起,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间,起支持和分隔神经细胞的作用。细胞突起的末端常膨大形成脚板(footplate)或称终足(end

星型胶质细胞的细胞成分

  在用尼氏法等一般染色组织切片中,星形胶质细胞的核比其他胶质细胞的核大,呈圆形或卵圆形,常染色质多,异染色质少而分散,故染色浅,核仁不明显。胞质中没有尼氏体,但具有一般的细胞器。胞质中含有大量交错排列的原纤维,伸入到胞突中并与胞突平行行走,是构成细胞骨架的主要成分。原纤维的超微结构是一种中间丝,称

星型胶质细胞的特殊类型

  除上述典型的星形胶质细胞外,还有几种特殊类型的星形胶质细胞。如小脑的伯格曼胶质细胞(Bergmanglial cell);视网膜的米勒细胞(Muller glial cell),又称放射状胶质细胞(radial neuroglia cell);脑垂体的垂体细胞和正中隆起等处的伸展细胞(tanyc

星型胶质细胞的分类简介

  根据胶质丝的含量以及胞突的形状可将星形胶质细胞分为两种:纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质,突起细长,分支较少,胞质中含大量胶质丝,又称蜘蛛细胞(spider cell);原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte),多分布在灰质,

细胞技术专题:大鼠视神经少突胶质细胞培养实验(一)

标签: 大鼠 视神经 少突 胶质 大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法牛血清培养法 实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。 实验材料W

细胞技术专题:大鼠视神经少突胶质细胞培养实验(二)

2. 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色 GC 蛋白阳性,未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富,互相形成蜘蛛网状(图 3)。苏木素复染,异质细胞较少,90%以上为阳性细胞(图 4)。  Figure 1 Cells migrated from opti

神经胶质细胞培养实验

酶消化法 胰蛋白酶消化法             实验方法原理 胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通

关于酶消化法的胰蛋白酶消化的基本介绍

  1、加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,在37℃培养箱消化2min。  2、显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若细胞质回缩,细胞间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。  3、加入培养液:更换吸管,加入新鲜的培养

大鼠肝星状细胞原代培养实验_胰酶消化法

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM酶消化液