人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 冰冷无菌D-Hanks'液中漂洗,用眼科剪仔细清除脂肪、包膜、血管等组织,转入青霉素小瓶中,加入少量无菌D-Hanks'液,用眼科剪剪成0.1-1.0 mm3 大小的碎片。 2. 用滴管轻轻吸出上层细小脂肪碎块和油滴,再用无菌D-Hanks'液反复清洗8~10 次。 3. 加入 10 倍体积无菌胶原酶消化液(1 mg/mL),......阅读全文
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原
人脐动脉平滑肌细胞培养实验
消化法 贴块法 实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
人脐动脉平滑肌细胞培养实验
消化法 贴块法 实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不
细胞技术专题:人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法
大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDME
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神
初代细胞培养实验——消化培养法
初代培养或原代培养,可以用于:(1)从供体获取组织后的首次培养;(2)组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细胞团或单个细胞,便于细
脐带和脐血来源干细胞培养实验_种植法
种植法从Wharton胶中分离干细胞实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶仪器、耗材6孔板实验步骤(a)正常分娩后获得脐带,保存在PBSA中,1〜24 h内处理标本。(b)去除血管,将Wharton胶切成小块。(c)将种植块转移到加有DMEM/FBS的6孔板中。(d)将培养板静置5〜7天,使细胞从
平滑肌细胞培养方法3
2 结果2.1 体外培养的胎儿脐动脉血管平滑肌细胞的形态观察 实验中观察到脐动脉组织块贴壁后5~7d可见有细胞以垂直方向从组织块周围游走出来(见图1),但并不是所有的组织块周围都有细胞游出,离组织块较远的区域也可以看到细胞,此为平滑肌细胞的漂移性生长特性(见图2),细胞形态多样,大小不一,多为长梭形
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法
实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后,可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管,将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管,用无血清DMEM洗,室温250g离心5min。(d)倒掉上清液,将离
大鼠主动脉平滑肌细胞培养
实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料 SD大鼠试剂、试剂盒 PBSFBSDMEM仪器、耗材 手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿实验步骤 一、实验步骤1. SD 大鼠(150
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍
兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长
大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法
大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺
人脐血间充质干细胞培养流程
准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 专用基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需最多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
人脐血间充质干细胞培养流程
1. 准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
正常大兔主动脉平滑肌细胞培养
实验材料:1. 正常大兔主动脉2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.23. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ4. 细胞培养瓶(T25)5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 网筛(100目)7. 离心管(15m
正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养
一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法
实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,
神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法
实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1. 选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2. 解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3. 将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法
大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养
内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法的简介
1、产后新鲜脐带,无菌剪取 10—15 厘米长一段,如不能立即培养,可于 12 小 时内保存于 4℃。 2、用三通注射器吸取温 PBS 液注入脐静脉中洗去残血,在入口处用线绳扎紧, 以防液体返流。 3、用血管钳夹紧脐带一端,从另一端向脐静脉中徐徐注入浓度为 0.1%的粗制胶原酶,充满血管,消
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离
人滑膜细胞原代培养实验_酶消化法
人滑膜细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于相应细胞生理、形态学研究;(3)用于相关疾病研究。实验方法原理将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料滑膜组织试剂、试剂盒Ⅰ型胶原酶胎牛血清生理盐水