大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法
大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDMEM仪器、耗材手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿实验步骤一、实验步骤1. SD 大鼠(150-200 g),断头,浸入75%的酒精中15 min。2. 置入超净台中,将大鼠固定于杀鼠板上,在无菌条件下打开腹腔,分离出胸主动脉、腹主动脉, 摘出。3. PBS 清洗3 遍,剥去外膜,用手术刀片刮去内膜,留下中膜并将其移入1 mL 的培基中、剪成1x1 mm2 大小组织块。4. 再将PBS清洗组织块,移入25 mL 的培养瓶中,用尖嘴弯管均匀贴好组织块,放入37℃、5% CO2的培养箱倒置培养6 小时后,待组织块贴壁后,......阅读全文
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法
大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDME
大鼠主动脉内皮细胞培养实验——贴块法
大鼠血管内皮细胞培养可用于:(1)血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。实验材料雄性Wistar大鼠试剂、试剂盒DMEM胎牛血清内皮细胞生长因子肝素钠青
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法
家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台
大鼠主动脉平滑肌细胞培养
实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料 SD大鼠试剂、试剂盒 PBSFBSDMEM仪器、耗材 手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿实验步骤 一、实验步骤1. SD 大鼠(150
正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养
一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
大鼠血管内皮细胞培养可以:(1)用于血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)用于选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法贴块法实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。但缺点使易混有成纤维细胞和平滑肌细胞,前者的贴壁时间和内皮接
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。
平滑肌细胞培养方法4
动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源,由于细胞并非直接获得,而是从组织块边缘长出,其中有一“突破过程”,且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖,故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将
初代细胞培养实验——组织块培养法
实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1. 剪切把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止;2. 摆布用弯头吸管吸取若干小块,置入培养
正常大兔主动脉平滑肌细胞培养
实验材料:1. 正常大兔主动脉2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.23. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ4. 细胞培养瓶(T25)5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 网筛(100目)7. 离心管(15m
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原
原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍(二)
3、神经元细胞原代培养 步骤:1)出生 2 d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,碘酒、75%乙醇消毒腹部皮肤,依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜,无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2)在解剖显微镜下分离并取出胚胎大脑皮层,除去脑膜,剪碎组织成约1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入3
平滑肌细胞培养方法
贴壁法原代培养1.1 细胞培养1.1.1 培养液配制 DMEM(美国Gibco公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),链霉素(100mg/ml),优质胎牛血清(原代培养浓度20%,传代培养浓度10%,美国Hyclone)。1.1.2 培养器皿 25cm2塑料培养瓶(Cost
SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
Hyclone标准胎牛血清FBS SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血
如何巧妙利用血清培养细胞
在细胞培养实验室中,血清是常见的科研试剂之一,常见的血清种属有人的和动物两种,而动物的又分为牛、猪、鸡、羊等,根据客户对产品种属与来源的选择,价格也是不同的。对于实验新手来说,稍有不慎就会影响到实验结果,甚至让花费几千元买来的血清失去效果。那么我们要如何正确的使用与操作呢?今天上海文韧与您探讨“如何
兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长
大鼠平滑肌抗体(SMA)ELISA检测法
大鼠平滑肌抗体(SMA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 SMA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 SMA与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠SMA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strept
威斯腾原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍
威斯腾原代细胞培养和细胞药筛 威斯腾生物经过10多年的发展,获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验,并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库;细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件,万级净化细胞房,这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。 同时,威斯腾生物结合多
威斯腾原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍
威斯腾生物经过10多年的发展,获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验,并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库;细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件,万级净化细胞房,这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。 同时,威斯腾生物结合多年原代及传代细胞培养经验,结合平台已有的
大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法
大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞可用于:(1)实验室胰岛细胞功能深入研究的实验材料;(2)糖尿病新药的细胞筛选模型。实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。 实验材料一周龄Wistar 大鼠试剂、试剂盒D-Hanks’液
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞培养实验 实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞培养实验 实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单
大鼠胰岛细胞培养实验
实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。实验材料 一周龄Wistar 大鼠 试剂、试剂盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型胶原酶 葡萄糖 碘乙酸 仪器、耗材 手术剪 手术钳 眼科剪刀 眼科镊子
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离