人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不成功,培养基换为 DMEM/F12,但后来我又换成 DMEM,也培养出来了。2. 把脐动脉剪开很麻烦,因为它老是打弯,可以找个软木塞,用大头针固定,可用块木板,因为有磨擦力,所以动脉可以固定在板上。3. 对于新手来讲,最麻烦的就是把组织快剪成1 mm3 大小小块,可以找块磨砂玻璃,切完再剪就 好多了。4. 把剪碎的组织快移到培养瓶里,可采用类似牙科的刮匙,直接放进瓶里。加入2 mL 培养液, 一定不能放多,防止漂浮。然后用玻璃分针轻轻将小块分离开。5. 其......阅读全文
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法
大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。 实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实验材料 SD
人脐动脉平滑肌细胞培养实验
消化法 贴块法 实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
人脐动脉平滑肌细胞培养实验
消化法 贴块法 实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
细胞技术专题:人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
大鼠主动脉内皮细胞培养实验——贴块法
大鼠血管内皮细胞培养可用于:(1)血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。实验材料雄性Wistar大鼠试剂、试剂盒DMEM胎牛血清内皮细胞生长因子肝素钠青
家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法
家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台
平滑肌细胞培养方法3
2 结果2.1 体外培养的胎儿脐动脉血管平滑肌细胞的形态观察 实验中观察到脐动脉组织块贴壁后5~7d可见有细胞以垂直方向从组织块周围游走出来(见图1),但并不是所有的组织块周围都有细胞游出,离组织块较远的区域也可以看到细胞,此为平滑肌细胞的漂移性生长特性(见图2),细胞形态多样,大小不一,多为长梭形
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
初代细胞培养实验——组织块培养法
实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1. 剪切把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止;2. 摆布用弯头吸管吸取若干小块,置入培养
脐带和脐血来源干细胞培养实验_种植法
种植法从Wharton胶中分离干细胞实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶仪器、耗材6孔板实验步骤(a)正常分娩后获得脐带,保存在PBSA中,1〜24 h内处理标本。(b)去除血管,将Wharton胶切成小块。(c)将种植块转移到加有DMEM/FBS的6孔板中。(d)将培养板静置5〜7天,使细胞从
大鼠主动脉平滑肌细胞培养
实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料 SD大鼠试剂、试剂盒 PBSFBSDMEM仪器、耗材 手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿实验步骤 一、实验步骤1. SD 大鼠(150
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍
兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长
平滑肌细胞培养方法2
1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠,雌雄不限,购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基,D-Hanks粉,标准胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均购自Hy-Clone公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂;鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体,购自Zymed
如何巧妙利用血清培养细胞
在细胞培养实验室中,血清是常见的科研试剂之一,常见的血清种属有人的和动物两种,而动物的又分为牛、猪、鸡、羊等,根据客户对产品种属与来源的选择,价格也是不同的。对于实验新手来说,稍有不慎就会影响到实验结果,甚至让花费几千元买来的血清失去效果。那么我们要如何正确的使用与操作呢?今天上海文韧与您探讨“如何
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
大鼠血管内皮细胞培养可以:(1)用于血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)用于选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法贴块法实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。但缺点使易混有成纤维细胞和平滑肌细胞,前者的贴壁时间和内皮接
人脐血间充质干细胞培养流程
1. 准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
人脐血间充质干细胞培养流程
准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 专用基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需最多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
Hyclone标准胎牛血清FBS SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血
正常大兔主动脉平滑肌细胞培养
实验材料:1. 正常大兔主动脉2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.23. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ4. 细胞培养瓶(T25)5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 网筛(100目)7. 离心管(15m
正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养
一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。
大鼠主动脉内皮细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。