人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法

实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不成功,培养基换为 DMEM/F12,但后来我又换成 DMEM,也培养出来了。2. 把脐动脉剪开很麻烦,因为它老是打弯,可以找个软木塞,用大头针固定,可用块木板,因为有磨擦力,所以动脉可以固定在板上。3. 对于新手来讲,最麻烦的就是把组织快剪成1 mm3 大小小块,可以找块磨砂玻璃,切完再剪就 好多了。4. 把剪碎的组织快移到培养瓶里,可采用类似牙科的刮匙,直接放进瓶里。加入2 mL 培养液, 一定不能放多,防止漂浮。然后用玻璃分针轻轻将小块分离开。5. 其......阅读全文

小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法

小鼠胚胎干细胞培养可以:(1)细胞保种;(2)用于干细胞研究;(3)用于细胞生理学、形态学等研究;(4)动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

特殊细胞培养实验_加支持物培养法

实验方法原理加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物,进行培养的方法。待细胞贴附于支持物生长增殖后,可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从瓶中抽出,能做各种技术处理,是研究工作中常用的方法之一。各种对细胞无毒性的如玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等,均可做支持物

胶原酶消化法—培养脐带间充质干细胞

人脐带间充质干细胞具有高度分化潜能,基因稳定、不易突变,不会引起肿瘤;无需配型、无排异,广泛应用于疾病治疗及抗衰老研究。目前,在美容行业及针对亚健康群体的应用,也越来越引人注目。脐带间充质干细胞脐带是由包膜、华通氏胶、脐静脉、脐动脉脐构成。脐带间充质干细胞存在于华通氏胶中。由于存在数量少,用胶原酶消

细胞培养中有哪些要注意的问题

1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。4、培养液的选择。不

人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型的建立凝血酶法

人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型的建立可以:(1)为研究胃癌的发病机制提供理想的动物模型;(2)研究胃癌实验治疗提供理想的动物模型;(3)建立一种最能体现人体胃癌侵袭和转移的理想的动物模型。实验材料BALB C nu nu裸鼠人胃癌细胞株SGC-7901试剂、试剂盒人纤维蛋白原冻干粉人凝血酶冻干粉凝

全球首块半人半机械组织诞生

  《终结者》里施瓦辛格扮演的T800终结者让全世界第一次直观感受到了机械与人体组织结合的成果,而就在不久前,哈佛大学的研究者们才初步实现人体细胞与机械的融合,制造出了世界上首块半人半机械组织。  据报道,哈佛大学的生物工程学家们近日打破了生物和机械之间的隔阂,制造出了全球首块半机械版人体组织。这些

大鼠平滑肌抗体(SMA)ELISA检测法

大鼠平滑肌抗体(SMA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 SMA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 SMA与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠SMA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strept

内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法的简介

  1、产后新鲜脐带,无菌剪取 10—15 厘米长一段,如不能立即培养,可于 12 小 时内保存于 4℃。  2、用三通注射器吸取温 PBS 液注入脐静脉中洗去残血,在入口处用线绳扎紧, 以防液体返流。  3、用血管钳夹紧脐带一端,从另一端向脐静脉中徐徐注入浓度为 0.1%的粗制胶原酶,充满血管,消

免疫学实验皮肤斑贴实验介绍

  皮肤斑贴实验介绍:  皮肤斑贴实验是研究毒物对皮肤毒性的实验方法之一。把数层纱布折叠成一定大小(方形每边1cm,圆形直径1cm),将受试物原液或稀释液沾湿纱布后紧贴于皮肤上,外盖一层油纸或塑料薄膜,用绷带固定。一般12小时或24小后解开,观察局部反应。  皮肤斑贴实验正常值:  正常人为阴性(-

实验室经验实战总结贴

实验安全1.进入实验室要穿好工作服,不要存侥幸心里,如果,一不小心碰到酸,心爱的衣服烧个洞是小事,烧伤皮肤就麻烦了。不要嫌麻烦,一定要戴手套才做对身体有危害的实验,要对自己的身体负责。2.实验前后清洁洗手,如果,实验中途去休息喝水的时候,也要洗手,不要以为刚才的实验药品没什么毒性,生命很重要,小心为

人胃癌完整组织块裸鼠原位种植高转移模型的建立实验

实验方法原理 人胃腺癌SGC27901 细胞株,裸鼠皮下注射(2×106/L 细胞悬液) ,成瘤后反复传代形成实体瘤,以第6 代瘤源为组织材料,打开腹腔,通过“生物胶粘贴法”用OB 医用生物胶将瘤块粘贴在裸鼠胃壁胃大弯血管分布稠密处;待荷瘤鼠出现衰竭体征濒临死亡时处死解剖检查。实验材料 BA

人胃癌完整组织块裸鼠原位种植高转移模型的建立实验

人胃癌完整组织块裸鼠原位种植转移模型的建立可以:(1)研究肿瘤的浸润和转移机制;(2)探索阻断肿瘤转移的方法;(3)建立能反映临床人胃癌转移的模型。完整组织块原位种植法实验方法原理人胃腺癌SGC27901 细胞株,裸鼠皮下注射(2x106/L 细胞悬液) ,成瘤后反复传代形成实体瘤,以第6 代瘤源为

特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验

实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每

彩色多普勒超声产前诊断胎儿单脐动脉的临床意义

  单脐动脉是指脐带中只有一条脐动脉和一条脐静脉,是脐血管数目异常,因其常合并其它畸形、胎儿宫内发育迟缓、早产等情况,且病死率较高,已日益受到临床的重视。   1资料和方法   1.1资料 2008年1月-2012年1月产前经彩色多普勒超声发现单脐动脉108例,孕妇年龄19岁~42岁,孕周16周~4

平滑肌形态学观察实验

实验步骤1. 染色:HE2. 肉眼观察:标本呈圆形,中间不规则的腔隙是肠腔,周围的组织为肠壁外层染成红色的是平滑肌。3. 低倍镜观察:平滑肌组织染色较其附近的结缔组织红。平滑肌组织较厚,可分为两层且排列方向不同,内层的为纵切面,平滑肌纤维呈长梭形,外层为横切面,较薄,平滑肌纤维呈大小不一圆点形。4.

平滑肌形态学观察实验

实验步骤                                                         1. 染色:HE2. 肉眼观察:标本呈圆形,中间不规则的腔隙是肠腔,周围的组织为肠壁外层染成红色的是平滑肌。3. 低倍镜观察:平滑肌组织染色较其附近的结缔组织红。平滑肌

蜡块中样品的切片实验

实验材料 石蜡块试剂、试剂盒 明胶仪器、耗材 切片机载玻片细毛刷烘箱实验步骤 1.  用剃须刀片将含样品的蜡块切成梯形,小心切去多余石蜡,勿太接近包埋样品(否则样品可能遭损坏或致蜡块破碎)。2.  将梯形蜡块宽边面向刀片置于切片机固定夹上进行切片。切成8 μm 厚。3.  加1滴0.2×明胶浸泡液于

蜡块中样品的切片实验

实验材料石蜡块试剂、试剂盒明胶仪器、耗材切片机载玻片细毛刷烘箱实验步骤1.  用剃须刀片将含样品的蜡块切成梯形,小心切去多余石蜡,勿太接近包埋样品(否则样品可能遭损坏或致蜡块破碎)。2.  将梯形蜡块宽边面向刀片置于切片机固定夹上进行切片。切成8 μm 厚。  图一、石蜡切片在明胶浸泡过载玻片上的放

神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1.  选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2.  解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3.  将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法

实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,

细胞培养实验——悬浮细胞培养

实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安

人血清、血浆及相关液体样本中α平滑肌...

实验概要本实验采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶

细胞培养实验

实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起

细胞培养实验

贴壁细胞培养 悬浮细胞培养             实验方法原理 实验材料 冻存细胞

细胞培养实验

贴壁细胞培养 悬浮细胞培养             实验方法原理 实验材料 冻存细胞

平滑肌细胞的分离和培养

实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液试剂、试剂盒平滑肌培养液仪器、耗材Petri培养皿手术刀和10号手术刀片解剖剪组织镊实验步骤1. 从小牛取胸主动脉。2. 将胸主动脉浸入 Hanks 液。3. 分离细胞之前将动脉放在冰上。4. 将动脉放入 150 mm × 25 mm Petri 培养皿。5

平滑肌细胞的分离和培养

实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液                                                          试剂、试剂盒平滑肌培养液                                                          仪

人外周血淋巴细胞培养

在正常情况下,人外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素(PHA)是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂,在PHA作用下,原处于Go期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性,淋巴细胞经过含有HPA培养液培养,在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体