小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法
小鼠胚胎干细胞培养可以：（1）细胞保种；（2）用于干细胞研究；（3）用于细胞生理学、形态学等研究；（4）动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃，5％CO2，100％湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化，也可以采用低浓度的RA进行诱导。实验材料小鼠试剂、试剂盒明胶PBSDMEM马血清L-谷氨酰胺HEPESβ-巯基乙醇PESTLIF仪器、耗材培养板离心管水浴锅离心机6孔板24孔板实验步骤一、ES培养基 在LIF存在的条件下维持细胞培养。 二、EB培养基 使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。 1. 分散纯化细胞（参见上面的细胞传代部分）。 2. 纯化2小时后将细胞转入......阅读全文
小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法
小鼠胚胎干细胞培养可以：（1）细胞保种；（2）用于干细胞研究；（3）用于细胞生理学、形态学等研究；（4）动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存
小鼠胚胎干细胞培养实验
实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃，5％CO2，100％湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化，也可以采用低浓度的RA进
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
实验材料 母鼠试剂、试剂盒 PBS胰蛋白酶溶液DNase 溶液仪器、耗材 无菌解剖器械不锈钢滤网烧瓶培养箱实验步骤 1. 准备下列试剂和材料：确定怀孕期的母鼠（孕期14至6天）无菌解剖器械（镊子、剪刀、手术刀片）Cellector 带收集装置的不锈钢滤网，1 mm 直径筛网内有搅拌棒的 125 ml
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
原代MEF的分离和冻存 MEF滋养板的制备 实验材料 母鼠 试剂
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
原代MEF的分离和冻存 MEF滋养板的制备 实验材料 母鼠 试剂
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基 细胞复苏 冻存细胞 明胶包被 细胞传代 体外分化 培养基 包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片） 体外分化方法 注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基：包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片） 体外分化方法 注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的pr
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（一）
一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol，需要用专用
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（三）
ITSFn and N3（分化培养基）：配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分装在15ml 离心管中，（稀释为1×，ITSFn 7.05ml，N3 12.55ml），0.2μm滤膜过滤，贮存在-20℃。将该溶液加入DMEM/F12中制备培养基，贮存于4℃。 贮存液 DMEM(高
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（四）
第3步--ITSFn培养基在最少量培养基中选择神经前体细胞1．在胚状体接种在组织培养皿一天后将培养基换成ITSFn培养基2．并非所有胚状体在这一时期都已经发生粘附，因此在移除培养基时要小心谨慎以使大部分胚状体留在培养皿内。3．保持细胞在ITSFn中培养大约10天，根据需要更换培养基--大约每隔一天。
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（二）
Geltin（明胶）包被准备500ml 0.1％geltin溶液1．将0.5 g明胶溶解在500ml无钙镁的PBS中（50－65℃水浴15～30分钟）。2．最好在溶液没有冷却的情况下通过0.22 μm滤膜过滤，贮存在4℃。包被培养板或培养皿1．加入足量的明胶溶液覆盖培养平面（15 cm培养皿加2ml
小鼠胚胎干细胞的培养
实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺（200mM） MEM NEAA（10mM） HEPES（1M） β-巯基乙醇（55Mm） 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮（20μM） 腐
小鼠胚胎干细胞的培养
完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化_MEF滋养板的制备
实验材料丝裂霉素 C试剂、试剂盒胰酶溶液PBS明胶溶液仪器、耗材MEF 生长培养基组织培养皿实验步骤1. 准备下列材料MEF 生长培养基胰酶溶液无 Ca2+ 和 Mg2+ PBS丝裂霉素 C明胶溶液（0.1%）150 mm 组织培养皿滋养细胞组织培养皿2. 准备一支 15 ml 离心管，加 5 ml
人类胚胎干细胞研究意义
早在1970年Martin Evans首次从小鼠胚囊中分离出小鼠胚胎干细胞，小鼠胚胎干细胞就可以成功地在体外进行培养。人的胚胎干细胞的体外培养在1998年由美国科学家培养成功。 研究证实：分离的小鼠胚胎干细胞在体外可以分化成各种细胞，包括神经细胞，造血干细胞（血细胞的前体）和心肌细胞。令人惊奇
protocol：小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤1
1、一般培养：保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代2 、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol，
protocol：小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤3
体外分化方法第1步：ES培养基在LIF存在的条件下维持细胞培养第2步：EB培养基使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。1、分散纯化细胞（参见上面的细胞传代部分）2、纯化 2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中，计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。3、用2ml
protocol：小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤2
体外向心肌细胞方向分化胚胎干细胞在体外去除LIF情况下会自然向心肌细胞方向分化，小鼠的R1系一般在第7-8天自然出现搏动的心肌细胞，与胚胎发育时间线是完全一致的。培养基：EB 配制一20×不含DMEM，FBS，LIF的溶液（该溶液也能用于ES培养基--见前述）。分装在50ml 离心管中，（稀释为
小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化
实验概要小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化主要试剂无菌水、0.1%明胶、DPBS、0.05%Tripsin、fibronection、Laminin、细胞基础培养液、N2B27培养液、mES培养液C、小鼠EB培养基、神经干细胞培养液（NSC培养液）主要设备35 mm、100 mm培养皿、12孔
BMP信号通路分阶段调控胚胎干细胞分化的分子机制
近日，国际知名发育生物学期刊Development发表了中科院上海生命科学研究院生化与细胞所景乃禾研究组的最新研究成果，该研究揭示了BMP信号通路在小鼠胚胎干细胞神经分化不同阶段的功能。 小鼠胚胎干细胞（Embryonic Stem Cells，ESCs）是用于研究哺乳动物早
ES细胞分化培养实验
悬滴培养 培养皿ES细胞集落 附着ES细胞分化培养 实验材料 未分化 ES 细胞
ES细胞分化培养实验
实验材料 未分化 ES 细胞试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 ES 分化培养基移液器实验步骤 1. 准备下列试剂和材料：未分化 ES 细胞无 Ca2+ 和 Mg2+ PBSES 分化培养基8 道微量移液器无菌多道移液器容器2. 收获未分化 ES 细胞。3. 在 100 mm 组织培养皿中加 10 ml
ES细胞分化培养实验
实验材料单一胚胎样体仪器、耗材组织培养板巴斯德吸管玻璃盖玻片无菌镊子ES 分化培养基实验步骤1. 准备下列试剂和材料：培养悬液中的单一胚胎样体6 孔组织培养板带棉塞巴斯德吸管明胶包被的玻璃盖玻片无菌镊子ES 分化培养基2. 准备明胶包被的玻璃盖玻片3. 用无菌镊子在 6 孔组织培养板的每孔中放一块明
Nature－|－胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵，受精卵通过分裂，经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚（Morula）再到囊胚（Blastocyst）阶段，称之为着床前胚胎（pre-implantation）。随后胚胎植入子宫壁，诱导子宫内膜蜕膜化（decidualization）预示着成功着床（i
Nature－|－胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵，受精卵通过分裂，经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚（Morula）再到囊胚（Blastocyst）阶段，称之为着床前胚胎（pre-implantation）。随后胚胎植入子宫壁，诱导子宫内膜蜕膜化（decidualization）预示着成功着床（i
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哺乳动物的发育起源于受精卵，受精卵通过分裂，经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚（Morula）再到囊胚（Blastocyst）阶段，称之为着床前胚胎（pre-implantation）。随后胚胎植入子宫壁，诱导子宫内膜蜕膜化（decidualization）预示着成功着床（i
ES细胞分化培养实验——悬滴培养
实验材料未分化 ES 细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材ES 分化培养基移液器实验步骤1. 准备下列试剂和材料：未分化 ES 细胞无 Ca2+ 和 Mg2+ PBSES 分化培养基8 道微量移液器无菌多道移液器容器2. 收获未分化 ES 细胞。3. 在 100 mm 组织培养皿中加 10 ml PBS
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验——腹腔取材法
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养可应用于：（1）细胞保种；（2）分子生物学研究；（3）基因治疗研究。实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2－3周，多用做原代培养，难以长