平滑肌细胞的分离和培养
实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液 试剂、试剂盒平滑肌培养液 &......阅读全文
平滑肌细胞的分离和培养
实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液试剂、试剂盒平滑肌培养液仪器、耗材Petri培养皿手术刀和10号手术刀片解剖剪组织镊实验步骤1. 从小牛取胸主动脉。2. 将胸主动脉浸入 Hanks 液。3. 分离细胞之前将动脉放在冰上。4. 将动脉放入 150 mm × 25 mm Petri 培养皿。5
平滑肌细胞的分离和培养
实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液 试剂、试剂盒平滑肌培养液 仪
小鼠支气管平滑肌细胞的分离培养方法
平滑肌即无纹肌的通称，平滑肌是由长纺锤形的单核细胞构成。它不构成独立的器官，而只是成为构成体壁和内脏壁的因素（肌层）。平滑肌细胞互相连接，形成管状结构或中空器官；在功能上可以通过缩短和产生张力使器官发生运动和变形，也可产生连续收缩或紧张性收缩，使器官对抗所加负荷而保持原有的形状。小鼠支气管平滑肌细胞
平滑肌细胞培养方法
贴壁法原代培养1.1 细胞培养1.1.1 培养液配制 DMEM（美国Gibco公司），Hepes（15mmol/L），青霉素（100u/ml），链霉素（100mg/ml），优质胎牛血清（原代培养浓度20%，传代培养浓度10%，美国Hyclone）。1.1.2 培养器皿 25cm2塑料培养瓶（Cost
兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法
兔膀胱平滑肌细胞培养可以：（1）分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞；（2）进行细胞学鉴定研究；（3）用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长
兔膀胱平滑肌细胞培养
实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况，同时进行细胞爬片H-E染色和透射电镜等形态学观察分析，并应用免疫荧光染色平滑肌特有的α-肌动蛋白进行细胞学鉴
平滑肌细胞培养方法3
2 结果2.1 体外培养的胎儿脐动脉血管平滑肌细胞的形态观察 实验中观察到脐动脉组织块贴壁后5~7d可见有细胞以垂直方向从组织块周围游走出来（见图1），但并不是所有的组织块周围都有细胞游出，离组织块较远的区域也可以看到细胞，此为平滑肌细胞的漂移性生长特性（见图2），细胞形态多样，大小不一，多为长梭形
平滑肌细胞培养方法4
动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源，由于细胞并非直接获得，而是从组织块边缘长出，其中有一“突破过程”，且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖，故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将
平滑肌细胞培养方法2
1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠，雌雄不限，购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基，D-Hanks粉，标准胎牛血清，胰蛋白酶粉（1∶250）均购自Hy-Clone公司；青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂；鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体，购自Zymed
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离
兔膀胱平滑肌细胞培养实验
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离
原代培养结肠平滑肌细胞（HCSMC）
实验步骤：（一）、取SD 大鼠一只，实验时断椎处死。（二）、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右，生理盐水中反复灌肠冲洗。（三）、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡，肠段内外各15 min。（四）、将经抗生素浸泡过的肠段移入
基底动脉平滑肌细胞原代培养方法
原代细胞培养：取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头，于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中，用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。传代：（1）吸除培养瓶内旧培养液。（2）D-Hanks液冲洗2遍。（3）加入消化液少许，以能覆盖瓶底为限。（4）倒
大鼠主动脉平滑肌细胞培养
实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养，并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料 SD大鼠试剂、试剂盒 PBSFBSDMEM仪器、耗材 手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿实验步骤 一、实验步骤1. SD 大鼠(150
人脐动脉平滑肌细胞培养实验
消化法 贴块法 实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
人脐动脉平滑肌细胞培养实验
消化法 贴块法 实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养，并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
正常大兔主动脉平滑肌细胞培养
实验材料：1. 正常大兔主动脉2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.23. 消化液：0.125%胰蛋白酶，0.1%胶原酶Ⅰ4. 细胞培养瓶（T25）5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊6. 网筛（100目）7. 离心管（15m
正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养
一、实验试剂 1、培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S4、染色液
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法
人脐动脉平滑肌细胞培养可以：（1）获得人脐动脉平滑肌细胞；（2）作为重大动脉疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（一）
兔膀胱平滑肌细胞培养可以：（1）分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞；（2）进行细胞学鉴定研究；（3）用于细胞学其他研究。实验方法酶分离法 实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（三）
收起 注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层，是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间，见消化液混浊、组织块呈絮状，或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清，所以总是不
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（二）
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长，正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利，传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代，经第8
细胞技术专题：人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以：（1）获得人脐动脉平滑肌细胞；（2）作为重大动脉疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
大鼠平滑肌细胞的另一种培养方法
显微器械：眼科剪一把，直弯眼科镊各一把，细结镊一把，手术刀一把，针头诺干杀老鼠器械：手术剪一把，大镊子一把，弯眼科镊一把，组织钳一把，50ml烧杯一个（锡纸包好）另外：10ml离心管两个，培养皿两个，10ml的瓶子三个，小滤器两个，硅胶板一块，培养瓶盖子诺干贰。试剂D-HANKS液250ml，双抗2
关于平滑肌细胞的简介
平滑肌细胞是指构成平滑肌的组织。平滑肌即无纹肌的通称，是被视为较横纹肌原始的一种肌肉。平滑肌除作为无脊椎动物的躯体肌而有广泛分布外，在脊椎动物除心肌之外而大部分内脏肌也是由平滑肌组成的。
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法：动物经颈动脉放血后，在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层，然后纵行切开血
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法
大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于：（1）获得大鼠主动脉平滑肌细胞；（2）用于血管疾病研究；（3）用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养，并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDME
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验——分离培养细胞
骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞，可用于（1）肌细胞的结构研究（2）肌细胞功能研究（3）对肌细胞的相关课题研究（4）临床细胞移植。实验方法原理骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下，成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞，分