分离核仁实验——分离核仁
实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,0.05 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖2. (可选)用冰冷的 NKM 溶液灌注肝脏。3. 称组织重量,用剃刀或剪刀切成非常小的碎块,或者用组织压挤器进行压挤。4. 每克组织加 10 倍体积的含 0.34 mol/L 蔗糖和 3 mmol/L MgCl2 的溶液进行匀浆破碎细胞。5. 匀浆通过 4 层粗孔滤纸以去除结缔組织。6. 4℃,500 g 离心 10 分钟。7. 用紧密结合的 Teflon-玻璃匀浆器匀浆使细胞核粗品重悬浮于 10 倍体枳(每克起始组织)的含 2.3 ......阅读全文
核仁组织者的结构特征
在真核细胞中,核仁是产生核糖体的场所,它通过核仁组织者区(NOR)与染色体相连。真核细胞18S+28S核糖体rRNA基因集中分布在NOR,而这些rRNA基因的转录活性及其在染色体上的位置对每个物种来说是恒定的,即具有物种的特征。 当细胞进入有丝分裂时,核仁首先变形和变小;其后染色质凝集和停止核糖核酸
核仁组织者的形成过程
生物发育成熟后,在正常情况下随着年龄的增加,机能减退,内环境稳定性下降,结构中心组分退行性变化,趋向死亡的不可逆的现象。衰老和死亡是生命的基本现象,衰老过程发生在生物界的整体水平、种群水平、个体水平、细胞水平以及分子水平等不同的层次。生命要不断的更新,种族要不断的繁衍。而这种过程就是在生与死的矛盾中
核仁小RNA的基本信息
核仁小RNA与其它RNA的处理和修饰有关,如核糖体和剪接体核小RNA、gRNA等。核仁小RNA是一个与特性化的非编码RNA相关的大家族。核仁小分子RNA调节细胞死亡,即便是血糖得到合适地调控,糖尿病病人经常会遭受并发症带来的痛苦,如心力衰竭(heart failure)、肾功能不全和免疫系统中B细胞
核仁染色体的发展历程
1879年德国生物学家弗莱明(F1eming·w )把细胞核中的丝状和粒状的物质,用染料染红,观察发现这些物质平时散漫地分布在细胞核中,当细胞分裂时,散漫的染色物体便浓缩,形成一定数目和一定形状的条状物,到分裂完成时,条状物又疏松为散漫状 。 1883年美国学者提出了遗传基因在染色体上的学说。
核仁组织区的概念及作用
核仁组织区(nucleolar organizing region,NOR)参与形成核仁时的染色质区,核仁从核仁组织区部位产生,同时与该区紧密相连。具有核仁组织区的染色体称核仁染色体。核仁组织区位于染色体的次缢痕部位,但并非所有的次缢痕都是NOR。染色体NOR是rRNA基因所在部位(5S rRNA基
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活性。实验材料 HL-60细胞HeLa细胞试剂、试剂盒 Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白胶硫代硫酸钠戊二醛乙醇丙酮醋酸铀柠檬酸铅染液仪器、耗材
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位,称核仁形成区,但银染的物质不是rDNA和rRNA,而是与活性的rDNA转录有关的一类酸性蛋白质,容易将Ag离子还原为Ag的颗粒,从而在核仁形成区镀上银、呈棕黑色,称为银染核仁形成区。实验方法原理生化和免疫化学研
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
我所发展RNA“缓冲荧光探针”用于细胞核核仁成像和核仁应激试剂筛选
原文地址:http://www.dicp.cas.cn/xwdt/kyjz/202403/t20240320_7046923.html近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)乔庆龙副研究员和徐兆超研究员团队发展了能够与RNA特异性可逆结合,在活细胞内对细胞核核仁稳定成像的“缓冲
抗核仁核糖核酸(rna)抗体简介
细胞核内含有3种负责不同RNA转录的RNA多聚酶蛋白聚合体(RNA多聚酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)。每种复合体由几种亚单位组成,有些含相同RNA多聚酶成分。三种抗RNA多聚酶均存在自身抗体。这些抗体常在同一病人血清中一起呈现。 抗RNA抗体只能在部分有条件的实验室检则,检测上的困难导致阳性率,临床灵敏度和特异
核仁小分子RNA的定义和分布
核仁小RNA与其它RNA的处理和修饰有关,如核糖体和剪接体核小RNA、gRNA等。核仁小RNA是一个与特性化的非编码RNA相关的大家族。核仁小分子RNA调节细胞死亡,即便是血糖得到合适地调控,糖尿病病人经常会遭受并发症带来的痛苦,如心力衰竭(heart failure)、肾功能不全和免疫系统中B细胞
关于核仁小分子RNA的基本介绍
核仁小RNA(small nucleolar RNA),是近来生物学研究的热点,由内含子编码,分布于真核生物细胞核仁的小分子非编码RNA,具有保守的结构元件。已证明有多种功能,主要参与rRNA的加工;反义snoRNA指导rRNA核糖甲基化。 核仁小RNA与其它RNA的处理和修饰有关,如核糖
免疫学实验乙抗核仁核糖核酸(RNA)抗体介绍
抗核仁核糖核酸(RNA)抗体介绍: 细胞核内含有3种负责不同RNA转录的RNA多聚酶蛋白聚合体(RNA多聚酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)。每种复合体由几种亚单位组成,有些含相同RNA多聚酶成分。三种抗RNA多聚酶均存在自身抗体。这些抗体常在同一病人血清中一起呈现。抗核仁核糖核酸(RNA)抗体正常值: 阴性。抗核
免疫学实验乙抗核仁核糖核酸(RNA)抗体介绍
抗核仁核糖核酸(RNA)抗体介绍: 细胞核内含有3种负责不同RNA转录的RNA多聚酶蛋白聚合体(RNA多聚酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)。每种复合体由几种亚单位组成,有些含相同RNA多聚酶成分。三种抗RNA多聚酶均存在自身抗体。这些抗体常在同一病人血清中一起呈现。抗核仁核糖核酸(RNA)抗体正常值: 阴性。抗核
研究揭示核仁腔的组成和调控机制
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/506442.shtm
临床化学检查方法介绍抗核仁抗体介绍
抗核仁抗体介绍: 核仁呈现荧光染色阳性,提示存在抗核仁核糖核酸抗体。SSc或与SSc重叠的其他风湿病可呈阳性。抗核仁抗体正常值: 阴性。抗核仁抗体临床意义: 阳性:硬皮病、干燥综合征及其他风湿病可呈阳性。抗核仁抗体注意事项: 正常人可有5%的阳性率,异随年龄增加而有上
RNA分离与分析实验_分离RNA
实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60
核仁组织者区的AgNO3染色
一、原理 1976年Goodpasture等应用银染色技术,使9种哺乳动物的核仁组织者区(NORs)特异性的染为黑色,该技术被称为Ag-As的银染技术,银染色阳性的NORs被称为Ag-NORs,与Hsu等人用原位分子杂交得到的结果比较,表明Ag-NORs就是18S+28S核糖体基因(rDNA)
线粒体分离实验
从组织培养细胞中分离线粒体 从组织中分离线粒体 用蔗糖密度梯度法纯化线粒体 实验材料 细胞
线粒体分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 RSBMS 缓冲液仪器、耗材 Dounce 匀浆器实验步骤 1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210
从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离
实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
抗核仁核糖核酸(rna)抗体的检查过程
将蛋白质视为抗体,并利用抗体与之进行特异性结合的特性,来进行研究。这项技术可用来将含有上千种不同蛋白质的样品中,分离和浓缩出特定蛋白质。进行免疫沉淀法时,抗体需要和一个受质结合。
抗核仁抗体的临床意义及注意事项
临床意义 阳性:硬皮病、干燥综合征及其他风湿病可呈阳性。 注意事项 正常人可有5%的阳性率,异随年龄增加而有上升趋势,70-80岁时的阳性率可达20%,但滴度较低。
抗核仁抗体检查项目的一般步骤
免疫荧光法检测血清总ANA最常用的方法是荧光免疫组化法。多用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质,结果比较稳定可靠,在荧光显微镜下见到的细胞核有荧光着色为阳性反应。如将患者血清先进行不同比例的稀释,可以做大致的定量试验,在1:80稀释仍然虽阳性时,对SLE的诊断有较大的参考价值。在油镜下观察结果,可以
昆明动物所等揭示核仁应激导致脂肪积累机理
脂滴(lipid droplets)是重要的细胞器,对维持细胞正常的能量代谢和生理功能至关重要。脂滴与其它细胞器相互作用,响应细胞内外环境变化,动态调节细胞的脂类代谢和能量平衡。当细胞器功能改变时,不仅会引起细胞器应激反应(如内质网非折叠蛋白反应、线粒体非折叠蛋白反应),还将导致能量代谢变化(肥
昆明动物所等揭示核仁应激导致脂肪积累机理
脂滴(lipid droplets)是重要的细胞器,对维持细胞正常的能量代谢和生理功能至关重要。脂滴与其它细胞器相互作用,响应细胞内外环境变化,动态调节细胞的脂类代谢和能量平衡。当细胞器功能改变时,不仅会引起细胞器应激反应(如内质网非折叠蛋白反应、线粒体非折叠蛋白反应),还将导致能量代谢变化(肥
Science发文揭示细胞核中核仁的新功能!
核仁是细胞核中一个众所周知的结构,在光镜下很容易看到。这种核结构被认为是核糖体产生的地方。一项新的研究表明,核仁也是蛋白质质量控制的一个部位。 当细胞受到压力时,蛋白质容易发生错误折叠和聚集。为了防止蛋白质聚集,一些蛋白质被暂时储存在核内。慕尼黑大学实验物理学教授、马克斯·普朗克生物(MPI)
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
液泡的分离实验
仪器、耗材 紫洋葱紫萝卜叶蔗糖溶液小镊子实验步骤 一、材料与设备紫洋葱、紫萝卜叶、0.5 M 蔗糖溶液、小镊子二、实验步骤撕取紫色洋葱或萝卜叶片表皮,置于载玻片上,稍滴加清水后盖上盖玻片,于显微镜下观察制片中的细胞,若细胞其中有一个完整无缺的、含花青素的玫瑰紫色液泡,则用滤纸条吸引液体的方法连续滴加