细胞增殖检测：3H同位素渗入法实例
树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源的、具有迁移能力的免疫细胞，是目前发现的功能最强大的抗原递呈细胞(APC)。 DC 是机体适应性 T 细胞免疫应答的始动者，主要在（1）肿瘤免疫反应（2）在疫苗生产过程中分别起着至关重要的作用。实验方法原理树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源的、具有迁移能力的免疫细胞。体外培养的细胞分化能力并为完全丧失，只是环境的改变。实验材料血细胞淋巴细胞试剂、试剂盒RPMI-1640 细胞培养液2-巯基乙醇青霉素链霉素刀豆蛋白AHank's液PBS缓冲液3H-TdR仪器、耗材筛网96孔培养板手术器械二氧化碳培养箱超净工作台液体闪烁仪多头细胞取集器49型玻璃纤维滤纸实验步骤1. 外周血单个核细胞的采集（1） 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞 80 - 100ml；（2） 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞（PBMC）。（3） 无血清培养液洗涤 2 次......阅读全文
细胞增殖检测：3H同位素渗入法实例
树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源的、具有迁移能力的免疫细胞，是目前发现的功能最强大的抗原递呈细胞(APC)。 DC 是机体适应性 T 细胞免疫应答的始动者，主要在（1）肿瘤免疫反应（2）在疫苗生产过程中分别起着至关重要的作用。实验方法原理树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来
细胞增殖检测：3H同位素渗入实例
一、原理 淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下，产生增殖反应，DNA和RNA合成明显增加，如在培养液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。 二、仪器和材料 RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯
细胞增殖检测：3HTdR渗入法原理和操作步骤
一、原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体，在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA），抗CD2、抗CD3McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖；而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体（SAC）、脂多糖（LPS，对小鼠有
细胞增殖检测：H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)渗入法材料
一、材料及试剂 1、培养基：RPMI-1640或TC199培养液 2、PHA；同形态学方法 3、小牛血清 4、3H-TdR；选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品，将1Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100uci/ml，于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10uci/ml溶液。 5、3%
细胞增殖检测：MTT法
细胞增殖检测：MTT法 实验方法原理 MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-（4，5）-dimethylthiahiazo（-z-y1）-3，5-di-
细胞增殖检测：MTT法
MTT法，又称MTT比色法，可以用于：检测细胞存活和生长。实验方法原理MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-（4，5）-dimethylthiahiazo（-z-y1）-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT 噻唑蓝为基础。MTT 为黄色化合物，是一种接受氢离子的染
细胞增殖检测：MTT法心得
MTT实验是检测细胞活力的实验方法，由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此也常常用来检测细胞的增殖情况。一、MTT的原理活细胞有琥珀酸脱氢酶，将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多，笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。二、MTT法检测细胞增殖实验的注意事项1、培养好细胞点板养细胞没
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理 各种液体对植物叶片的湿润力不同，湿润力愈强的液体，就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料 植物叶片试剂、试剂盒 搪瓷盘秒表试剂瓶仪器、耗材 液体石蜡无水乙醇苯二甲苯实验步骤 1. 在室外取自然生长的叶片，于叶背中脉任意一侧依次滴上一滴液体
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理各种液体对植物叶片的湿润力不同，湿润力愈强的液体，就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料植物叶片 试剂、试剂盒搪瓷盘
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理各种液体对植物叶片的湿润力不同，湿润力愈强的液体，就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料植物叶片试剂、试剂盒搪瓷盘秒表试剂瓶仪器、耗材液体石蜡无水乙醇苯二甲苯实验步骤1. 在室外取自然生长的叶片，于叶背中脉任意一侧依次滴上一滴液体石醋、无水
细胞介导细胞毒作用检测法2：[3H]脱氧胸苷释放法
[3H]脱氧胸苷释放法1）标记靶细胞1．用含5％小牛血清的RPMI-1640培养液将靶细胞配成2×106/ml，取10μCi（370kBq）[3H]TdR加到1ml靶细胞中，37℃水浴标记4～6小时，每30分钟摇晃一次。2．用RPMI-1640培养液洗涤细胞3次，每次400×g 10分钟。用含5％小
细胞周期测定实验——BrdU渗入法
实验方法原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期。 BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后，可做为细胞DNA复制的原料，经
细胞增殖检测
细胞增殖检测：3H同位素渗入法实例 实验方法原理 树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源的、具有迁移能力的免疫细胞。体外培养的细胞分化能力并为完全丧
细胞增殖检测
细胞增殖检测：3H同位素渗入法实例 实验方法原理 树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源的、具有迁移能力的免疫细胞。体外培养的细胞分化能力并为完全丧
细胞增殖检测方法
一、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）渗入法 胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的碱基，也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程，通过测定细胞的放射性强度，可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。 二、MTT检测法 MTT检
细胞增殖检测：BrdU
5-brdu 的分子量为307.1，将100mg分为三份30.7mg（0.1mmol），溶于1ml三蒸水，分装-20度保存。用的时候再稀释100倍，如在1ml 溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量，如100ul，避免反复冻融使其活性降低。 1、BudR贮存液的配制 BudR 5mg（先用0.5m
大鼠增殖细胞核抗原(PCNA)ELISA检测法
大鼠增殖细胞核抗原(PCNA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 PCNA 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 PCNA与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠PCNA，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记
用增殖的细胞核抗原（PCNA）检测细胞增殖活性
实验步骤展开
细胞增殖生长方面实验_细胞计数法
实验方法原理细胞计数法：细胞计数法是测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。一般过程为接种21 孔/24 孔板细胞（如用培养瓶时则21 瓶）。分7 组，每组3 孔（或瓶），培养一周，期间逐日检测一组，计数。把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材培养瓶恒温
常见细胞增殖检测方法总结
细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老或死亡的细胞；同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出，通过细胞分裂，可以将复制的遗
细胞活性检测代谢增殖测定
MTT检测法活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶，能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan），并沉积在细胞中，死细胞则无此现象。接着用二甲基亚砜（DMSO）溶解沉积在细胞中的甲瓒后，可利用酶标仪490nm波长测光吸收值，依据吸光值（OD值）计算出活细胞数量。在一定细胞数范围内，吸
常见细胞增殖检测方法总结
细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老或死亡的细胞；同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出，通过细胞分裂
BrdU检测丁细胞和B细胞增殖
基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D N A
细胞生长检测1：[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数
[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数1．用RPMI-1640培养液洗涤对数生长期（培养3天）的CTLL-2细胞两次，每次250×g离心10分钟，洗去培养液中残存的IL-2。2．用台盼蓝（1％ Trypan blue）染色法计数细胞并决定细胞的活力，用10％小牛血清的RPMI-1640培养液悬浮细胞至1×
细胞增殖检测：适合才是最好的
细胞增殖检测的应用相当广泛，不论是测试药物试剂还是生长因子的效果，不论是评估细胞毒性还是分析细胞活性状态，您都可能会用到它。细胞增殖检测一般是检测分裂中的细胞数量或者细胞群体发生的变化。细胞增殖检测主要分为四类：DNA合成检测、代谢活性检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP浓度检测。在这些方法中作何
Cytometry：EdU检测细胞增殖效果最佳
北京协和医院研究者利用EdU检测试剂结合流式细胞分析来检测T-淋巴细胞在体外的增殖情况，并优化出最佳的测定条件。研究者这一系统的研究为今后的细胞增殖的检测提供了重要的实验依据，相关研究发表在Cytometry杂志。 EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在D
BrdU标记法检测原代细胞增殖
BrdU标记法检测原代细胞增殖1．细胞以1.5×105/ml细胞接于直径35ml培养皿中（内放置盖玻片），培养1天，用含0.4％ FCS培养液同步化3天，使绝数细胞处于G0期2．终止细胞培养，加入BrdU（终浓度30μg/L），37℃，孵育40min。3．弃培养液，玻片用PBS洗涤3次。4．甲醇/醋
轻松解决细胞增殖的检测方法
无论单细胞还是多细胞都是以细胞分裂的方式产生新的细胞，进行增殖,用来补充体内衰老或死亡的细胞。 细胞增殖的研究方法有很多，主要包括：BrdU，EdU，CCK8等方法。其中EdU检测方法是最新的细胞增殖检测方法。 ①试剂盒检测细胞代谢活性（基于mtt、cck-8等） mtt（噻唑蓝）：通过添加四咪唑盐
细胞活性检测DNA合成增殖实验
BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷（Thymine）的衍生物，可用于标记活细胞中新合成的DNA（细胞活性周期S期），BrdU可随着DNA复制进入子细胞，因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记，可通过抗BrdU单克隆抗体检测，借此检测细胞的增殖能力，但BrdU单克隆抗体检测过程
细胞动力学参数检测——细胞增殖活性的检测
实验步骤展开