家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法
家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台盼蓝细胞排斥试验计算椎间盘细胞的活细胞率。实验材料家兔试剂、试剂盒培养液DMEMHanks’缓冲液胎牛血清胰岛素转铁蛋白亚硒酸盐青霉素链霉素仪器、耗材培养皿培养瓶烧瓶试管眼科剪、眼科镊CO2 培养箱pH 计恒温水浴实验步骤一、实验步骤 1. 组织块贴块法 (1)取材:空气栓塞法处死家兔后,在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM 培养基(含双抗)。迅速带回到无菌超净台上。(2)剪切:在超净台上,进一步将周围组织分离,用Hanks'液冲洗数遍,直到冲洗液透明为止。眼 科剪刀将组织修剪为......阅读全文
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验可用于:(1)研究肿瘤的发生机理;(2)研究生物学行为;(3)研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰
羊水细胞培养实验
实验方法原理 羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以检验胎儿核型。试剂、试剂盒 碘酒酒精营养液血清秋水仙素醋酸甲醇仪器、耗材 棉签棉球镊子穿针培养瓶实验步骤 1. 抽取羊水无菌抽取羊水10~20 ml,立即注入无菌离心管中;2. 离心分离1000 转/分,离心10 分钟,去上清,留0.5
传代细胞培养实验
实验方法原理 当初代培养成功,细胞生长增殖形成单层细胞后,进而扩展汇合,占满一切空间,此时需要进行分离培养。这一操作称传代或再培养。如拖延传代,细胞会因增殖过度,培养基营养枯竭和代谢产物积累而发生中毒。80%汇合或刚汇合细胞是理想传代阶段。实验材料 细胞试剂、试剂盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培养液
传代细胞培养实验
实验方法原理当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一方面细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面培养基内的营养物不足和代谢物积累不利于细胞生长甚至发生中毒,如果不及时的减少细胞密度,细胞将逐渐衰老死亡。因此需要将培养物按照比例重新接种到新的培养器皿(瓶)内进行
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
体液改变在家兔急性失血中的代偿作用实验
实验方法原理在生理情况下,人和其它哺乳动物的血压相对稳定,这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射起着重要作用。此反射既可在血压升高时降压,又可在血压降低时升压,反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经,又称减压神经,易于分离和
体液改变在家兔急性失血中的代偿作用实验
实验方法原理 在生理情况下,人和其它哺乳动物的血压相对稳定,这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射起着重要作用。此反射既可在血压升高时降压,又可在血压降低时升压,反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经,又称减压神经,易于分离
病理生理学动物实验中常见的家兔手术介绍
病理生理学动物实验中常用的手术有以下几种:1.皮肤切开:动物麻*醉固定后,在切口沿线的中点两侧,分别用血管钳向两侧夹起皮肤,用手术剪在两血管钳之间的皮肤上剪一小口,将剪刀伸进切口,贴紧并挑起皮肤撑开剪刀以钝性分离皮下组织,然后小心剪开皮肤。分离下面的组织避免使用剪刀,以免发生出血,尽可能作钝性分离。
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验
贴块法 实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
大鼠星型胶质细胞培养实验——胰蛋白酶消化法
实验材料大鼠胚胎试剂、试剂盒L-15培养基胶原酶DnaseD-MEM-BSFCS-DMEM阿糖胞苷仪器、耗材离心机水浴锅培养瓶培养箱实验步骤一、分离大鼠胚胎(16-18周)新皮层,置于L-15(或Hank's平衡盐/DMEM溶液,无Hepes)培养基中,除去脑膜和血管、海马、尾核和其他非皮层
大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——酶消化法
实验材料小鼠试剂、试剂盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培养液仪器、耗材培养箱实验步骤一、小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤1. 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1 min,解剖出完整鼠脑。2. 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块。3.
大鼠视神经少突胶质细胞培养实验——牛血清培养法
大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料Wistar大鼠试剂、试剂盒亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺
特殊细胞培养实验_多孔塑料培养板单细胞克隆法
实验方法原理多孔塑料培养板克隆细胞的主要过程是1. 制备出1~2 细胞/毫升低密度的细胞悬悬液;2. 向多孔塑料培养板各孔中分别接种细胞悬液0.5~1 ml,则每孔平均含1 个细胞。3. 镜下检测每孔所含细胞数,标记下含单细胞的孔,置温箱培养,数日后凡在已标记的孔中有生长增殖的细胞群即为克隆细
肌组织细胞培养实验——心肌细胞培养实验
实验方法原理心肌组织是最早利用的培养材料,Carrel曾长期培养过鸡胚心肌组织,至今心肌仍不失为好的培养物。最常用的是鸡胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎儿心肌等都可应用。心肌是比较容易培养和生长的组织,可应用多种方法进行培养,如悬滴培养、组织块培养和消化培养法等,主要取心室肌培养,均能获得良好的生长效果。
肌组织细胞培养实验——骨骼肌细胞培养实验
实验材料肌组织试剂、试剂盒Hanks胰蛋白酶血清胎汁仪器、耗材纱布实验步骤动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠(Wistar 大鼠更好)。1. 杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块;2. 用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消
肌组织细胞培养实验——神经组织细胞培养实验
实验方法原理神经组织主要由两种神经细胞(神经元)和神经胶质细胞组成。神经元为高度分化的细胞,在组织发生晚期已失掉增殖能力,对生存条件要求高,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或在加入神经生长因子(NGF)和胶质细胞因子时,才能生存,并可能出现一定程度的分化现象,如长出突起等,但却难使之增殖;即使
皮肤斑贴实验准确率为多少
斑贴实验是测定机体变态反应的1种辅助诊断方法。根据受试物性质配制适当浓度的浸液、溶液、软膏或直接用原物作试剂,将试液浸湿4层1cm2大小的纱布,或将受试物置于纱布上,置前臂屈侧,其上用稍大透明玻璃纸覆盖,4周用橡皮膏固定,经48小时取下,可引发局部皮肤出现反应,于72小时根据局部皮肤表现判读结果
混合淋巴细胞培养法
混合淋巴细胞培养法 混合淋巴细胞培养法是通过淋巴细胞的有效反应常用于器官移植前的组织配型,以测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容的程度的方法。由于MLC中淋巴细胞接受同种异型抗原的刺激而发生活化、增殖,产生种类众多的细胞因子,促进NK、LAK和CTL等杀伤细胞的分化,因此又是免疫调节研
常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与...
常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与传代培养法 1)初代消化培养法: 1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液
猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术
实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织,所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法,用单一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的,它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
Hyclone标准胎牛血清FBS SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血
结缔组织类细胞培养实验——成纤维细胞培养实验
实验方法原理包括人在内的各种成纤维细胞都很容易培养,也是其它组织培养时的副产物,极易获得。人的成纤维细胞不仅容易培养,而且生物性状稳定,很难发生转化,成为二倍体细胞培养的主要对象,人的二倍体细胞系,主要为成纤维细胞。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材剪刀实验步骤为获取大量成纤维细胞培养,以便
传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法
一、初代消化培养法 1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的
泮库溴铵和琥珀胆碱对家兔作用的比较实验
实验方法原理 骨骼肌松弛药分为去极化肌松药和非去极化肌松药两大类,去极化肌松药是N2 受体激动药,非去极化肌松药是N2 受体阻断药,两类药均可产生神经肌肉接头阻滞作用,但阻滞方式不同,作用特点也不相同。实验材料 家兔试剂、试剂盒 硫酸阿托品溶液;泮库溴铵溶液;氯化琥珀胆碱溶液;甲基硫酸新斯的明溶液仪
基底动脉平滑肌细胞原代培养方法
原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。传代:(1)吸除培养瓶内旧培养液。(2)D-Hanks液冲洗2遍。(3)加入消化液少许,以能覆盖瓶底为限。(4)倒
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞可用于:(1)实验室胰岛细胞功能深入研究的实验材料;(2)糖尿病新药的细胞筛选模型。实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。 实验材料一周龄Wistar 大鼠试剂、试剂盒D-Hanks’液
小鼠肝细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基