细胞表面抗原检测实验_免疫荧光抗体法
细胞表面有糖蛋白,这种蛋白质上有多糖,起到识别作用,当无法识别的糖蛋白进入血液就会引起身体的免疫反应引来严重后果,直接输血才会引起,如果喝就不会,因为胃都将其降解成氨基酸了,进入身体合成自身蛋白质就不会有事故。实验方法原理用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆抗体 IgG(第一抗体),二者可以发生特异性的抗原抗体反应,形成抗原抗体复合物,再加入市售(也可自制)的荧光标记的羊抗鼠IgG抗体(第二抗体),可以与复合物进一步发生抗原抗体反应(二次抗体反应),这样就可以在光显微镜下观察到这种抗原在结肠癌细胞表面的存在。实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒1640培养液小牛血清甲醛固定液PBS液体石蜡仪器、耗材盖片载片培养瓶培养皿滤纸镊子吸管倒置显微镜荧光显微镜微量加样器实验步骤1. 将培养瓶中的结肠癌细胞接种到装有盖片的培养皿中,培养2~3天。2. 在倒置镜下观察到盖片上的细胞......阅读全文
酶标抗体法—转基因检测的介绍
检测转基因物质的双抗体夹心ELISA具备多克隆抗体费用较低。单克隆抗体亲和力高的特点,使得后续研究开发的试剂盒检测成本低廉,灵敏可靠,而且可以稳定、方便地提供标准化试剂,便于实现工业化生产。双抗体夹心ELISA检测方法的研究和建立,为制备免疫胶体金试纸条提供了便利,为建立转基因动物的现场、快速查
酶标抗体法检测农药残留的介绍
农药残留常用的快速检测方法有酶抑制法和ELISA。酶试剂易失活导致反应不稳定,检测结果误差较大,重复性差。ELISA法操作步骤简便,适用于样品量较大的分析筛选,但是ELISA受限于抗体和抗原的制备和提取。已建立检测毒死蜱残留的ELISA方法,检测DDT及其相关化合物的ELISA方法,测定套种氰戊
酶标抗体法—兽药残留检测的方法
兽药残留常用的方法有微生物法、仪器分析法、微生物法适用于对畜禽组织中的抗菌药物进行筛选检验,该方法虽然能检测高浓度的残留,但是检测限高于样品所规定的的最高残留限量。因此ELISA成为广泛应用的快速检测兽药残留的方法。已建立检测动物组织中的呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法,检测呋喃唑酮代谢
酶标抗体法—生物毒素检测的介绍
酶标抗体法—生物毒素检测:以免疫学为基础的检测方法如ELISA具有实验周期短、设备简单、操作简便等特定而被广泛应用。已建立检测黄曲霉毒素B1直接竞争ELISA法,检测猪肉和鸡肉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的直接竞争ELISA法,基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析检测赭曲霉毒素A的方法等。
免疫荧光组织(细胞)化学技术基本原理
免疫荧光组织化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素,荧光素受激发光的照射,由低能态进入高能态,而高能态的电子是不稳定的,以辐射光量子的形式释放能量后,
elisa试剂盒对免疫荧光实验的具体方法步骤
现代的经济在发展、科研技术也在发展,我们的生活水平质量在提高,我们对实验技术的视野也是同样的在不断开拓。elisa试剂盒为您细说免疫荧光实验的具体方法步骤,上海劲马精益求精,力求销售的高质量试剂产品能够为科研事业做出贡献。今天,我们要给朋友们讲说的也是相关实验方法,免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和
细胞爬片免疫荧光实验具体操作步骤
单位实验室做过,小编顺便推荐一下细胞爬片是从上海晶安生物公司买的,实验效果不错.细胞爬片免疫荧光步骤:1.晶安生物细胞爬片;首先是玻片的处理,普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块,先用洗衣粉洗干净,用水冲静烤干,然后泡酸过夜,捞酸后流水洗净,烤干,置于器皿中高压灭菌,然后再烤箱中大约8小时烤干
细胞爬片免疫荧光实验具体操作步骤
1.晶安生物细胞爬片;首先是玻片的处理,普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块,先用洗衣粉洗干净,用水冲静烤干,然后泡酸过夜,捞酸后流水洗净,烤干,置于器皿中高压灭菌,然后再烤箱中大约8小时烤干备用。爬片可以在培养皿 六孔板或24孔板中都可,我选择在培养皿中爬。一为节约经费(培养皿可以重复利用)
细胞爬片免疫荧光实验具体操作步骤
细胞爬片免疫荧光步骤:1.晶安生物细胞爬片;首先是玻片的处理,普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块,先用洗衣粉洗干净,用水冲静烤干,然后泡酸过夜,捞酸后流水洗净,烤干,置于器皿中高压灭菌,然后再烤箱中大约8小时烤干备用。爬片可以在培养皿 六孔板或24孔板中都可,我选择在培养皿中爬。一为节约经费
免疫组织化学染色法的检查过程
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法,称荧光抗体法。用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法,称荧光抗原法。免疫荧光组织化学分直接法、间接法和补体法。 一、直接法 (1) 检查抗原方法 这是最简便、快速的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成特异性荧光抗体,直接用于细胞或组织抗原的检
免疫组织化学染色法的检查过程
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法,称荧光抗体法。用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法,称荧光抗原法。免疫荧光组织化学分直接法、间接法和补体法。 一、直接法 (1) 检查抗原方法 这是最简便、快速的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成特异性荧光抗体,直接用于细胞或组织抗原的检查。
流式细胞仪检测的免疫荧光样品标记
用于流式细胞仪检测的常用荧光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5,PE和PI,在以上各种荧光染料中,PE荧光最强,适用于弱表达抗原;FITC最便宜,适用于强表达抗原,适用范围广。 1.直接免疫荧光标记法 取一定量的细胞悬液(浓度约l×l06个/m1),直接加入荧光素标记抗体进行免疫反应(
免疫荧光实验TIRF成像
Kindlin-2和talin共同作用于桩蛋白激活整合素的表达 整合素是一种跨膜蛋白,在介导细胞黏附到细胞外基质(ECM)过程中发挥重要的作用。整合素在和配位体结合并发挥作用之前需要被激活。Kindlin和talin如何在非造血细胞中介入激活整合素这一过程的原理并不十分清晰。美国的科研人员发现
免疫荧光实验方法
免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技
免疫细胞化学技术的某些新进展
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中,新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外,80年代,新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述,本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【
免疫细胞化学技术的新进展半抗原交联抗体法
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中,新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外,80年代,新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章叙述,本节仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。【半抗原交
免疫细胞化学技术的某些新进展
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中,新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外,80年代,新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述,本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【
免疫荧光和细胞分离
实验步骤基 本 方 案 1 单细胞表面抗原的免疫荧光标记材 料基 本 方 案 2 固定和渗透单细胞的细胞内抗原的免疫荧光标记材 料辅 助 方 案 1 用 异 硫 氰 酸 荧 光 黄(FITC) 偶联抗体材 料6 . 计算荧光素/蛋 白 质 比(F/P ):F/P = F I T C 摩尔数/蛋白质摩
细胞免疫荧光操作步骤
1.细胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗5min;4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理);5.PBS漂洗2次,每次5min;6.1%BSA封闭30min;7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h;8.
酶标抗体法—重金属检测的简介
重金属检测方法有原子吸收光谱法、原子荧光法、阳极溶出伏安法、催化极谱法和电感耦合等离子体质谱法,这些方法均不能满足快速检测的要求。而酶标抗体法可提高检测速度。建立了检测重金属镉的间接竞争ELISA法,Pb和Cr的间接竞争ELISA,一步竞争ELISA对环境水样中的Cd检测等。
免疫荧光定量检测原理
将特异的荧光抗体先固体于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端滴加样品后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该荧光体发生特异性结合,随着进一步的层析作用,用此抗原的另一个抗体对此复合物进行捕捉,多余的荧光抗体用其二抗进行捕捉,两次捕
间接法检测抗人球蛋白实验
实验方法原理间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。先用Rh(D)阳性O型(或与被检查ABO同型)的正常人红细胞吸附血清中存在的游离不完全抗体(即称致敏)致敏红细胞经盐水洗涤后加入抗人球蛋白血清,如出现凝集即为抗人球蛋白间接试验阳性.试剂、试剂盒生理盐水实验步骤方法一:1. 取受检血青0.5
间接法检测抗人球蛋白实验
实验方法原理间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。先用Rh(D)阳性O型(或与被检查ABO同型)的正常人红细胞吸附血清中存在的游离不完全抗体(即称致敏)致敏红细胞经盐水洗涤后加入抗人球蛋白血清,如出现凝集即为抗人球蛋白间接试验阳性.试剂、试剂盒生理盐水实验步骤方法一:1. 取受检血青0.5
免疫荧光技术的技术方法介绍
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗
抗胰岛细胞抗体(ICA)检测的介绍
抗胰岛细胞抗体(ICA):抗胰岛细胞抗体属器官特异型抗体,抗原为胰岛细胞浆成分或微粒体组分,主要为lgG类,是胰岛细胞中β细胞损伤的标志。抗胰岛细胞抗体常用间接免疫荧光法测定,荧光图形的特点是胰岛细胞胞质呈斑点状着染。
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞凋亡检测实验
实验方法原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关,自身免疫性疾病和
简述儿童呼吸道感染常见病毒检测的原理
间接免疫荧光抗体法(IFA)检测基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生特异性结合,而未与抗原结合的其他非特异抗体在洗涤步骤中被去除,随后抗原-抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白发生反应,并可通过荧光显微镜进行观察。
免疫荧光技术简介
免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的