细胞表面抗原检测实验_免疫荧光抗体法

细胞表面有糖蛋白,这种蛋白质上有多糖,起到识别作用,当无法识别的糖蛋白进入血液就会引起身体的免疫反应引来严重后果,直接输血才会引起,如果喝就不会,因为胃都将其降解成氨基酸了,进入身体合成自身蛋白质就不会有事故。实验方法原理用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆抗体 IgG(第一抗体),二者可以发生特异性的抗原抗体反应,形成抗原抗体复合物,再加入市售(也可自制)的荧光标记的羊抗鼠IgG抗体(第二抗体),可以与复合物进一步发生抗原抗体反应(二次抗体反应),这样就可以在光显微镜下观察到这种抗原在结肠癌细胞表面的存在。实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒1640培养液小牛血清甲醛固定液PBS液体石蜡仪器、耗材盖片载片培养瓶培养皿滤纸镊子吸管倒置显微镜荧光显微镜微量加样器实验步骤1. 将培养瓶中的结肠癌细胞接种到装有盖片的培养皿中,培养2~3天。2. 在倒置镜下观察到盖片上的细胞......阅读全文

荧光抗体技术的类型及技术特点

免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的

免疫荧光概述

  免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。  用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用

免疫荧光技术的起源和原理

免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧

检测treg细胞检测直接用荧光一抗好还是用荧光二抗好

一抗确实要依照你所用的抗体而言,建议是在1:100-1:500之间,在稀释的我就没用过了。其实我大部分抗体的浓度多是在1:100 左右浮动。二抗我都是用的1:50-1:100.再稀释的比率效果不是很好。

免疫荧光实验方法1

免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术

冰冻切片免疫荧光实验步骤

1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3

免疫荧光实验原理及操作

免 疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体 分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

冰冻切片免疫荧光实验步骤

1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3

免疫荧光实验方法2

(二)固定和通透   除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,一般均应固定。固定的目的有三:   ①防止细胞从玻片上脱落;   ②除去防碍抗原-抗体结合的类脂;   ③使标本易于保存。   标本的固定原则是:   ①不能损伤细胞内的抗原;  

江苏首家新生细胞抗衰实验室揭牌-新生细胞抗衰术全球首发

  今天上午,南京医科大学友谊整形外科医院新生细胞抗衰实验室揭牌暨新生细胞抗衰术全球首发仪式在该院举行。标志着中国的抗衰老领域有了第一家高规格的专业机构,结束了以往医学抗衰老领域无专业的学术研究机构的局面,同时也奠定了新生细胞抗衰实验室在医学抗衰老领域的领先地位。   新生细胞抗衰术全球首发   备

免疫学检测抗原、抗体检测方法介绍

1、免疫荧光技术免疫荧光技术(immunofluorescence technique)是在生物化学、显微镜技术和免疫学基础上发展起来的一项检测技术,是用荧光标记的抗体或抗原与被检样品中相应的抗原或抗体结合,在显微镜下检测荧光,并对样品进行分析的方法。它把显微镜技术的精确性和免疫学检测的特异性、敏感

免疫荧光细胞化学染色方法

一、标本制作  可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。  二、荧光抗体染色方法  (一)直接法  1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37℃染色30

免疫荧光细胞化学染色方法

免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光 抗体或兔抗人 IgG 或 IgA 荧光抗体

免疫荧光细胞化学技术3

 四、荧光图像的记录方法  荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察。作为一般定性观察,基本上可靠的。随着技术科学的发展,在不同程度上采用客观指标记录判断结果,如用细胞分光光度计,图像

免疫荧光细胞化学的原理

免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看

免疫荧光细胞化学的原理

免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体(或抗原),再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红

原代细胞免疫荧光鉴定步骤

为了更好的帮助客户提供真实的原代细胞,使用免疫荧光鉴定出提取的细胞类型,免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。 一下是赛百慷技术人员提供的免疫荧光细胞鉴定的步骤,仅做

免疫荧光细胞化学技术2

 四、荧光抗体的保存  以0~4℃或-20℃低温保存,防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1:5000~10000的硫柳汞或1:1000~5000的叠氮钠防腐,小量分装如0.1~1ml,真空干燥后更易长期保存。[NextPage] 第三节 免疫荧光细胞化学染色方法  一、标本制作  可制作涂片

白细胞抗人球蛋白消耗实验介绍

  【参考值】  正常人阴性  【临床意义】  如果白细胞被不完全抗体所致敏,加上抗人球蛋白血清后由于发生抗原抗体反应,因此抗人球蛋白血清的效价随反应的强度有不同程度的降低(消耗),从而间接证明白细胞不完全抗体的存在。  直接试验阳性表示被检白细胞上有抗体结合,间接试验阳性表示被检血清中含有白细胞抗

免疫学实验抗胃壁细胞抗体介绍

  抗胃壁细胞抗体介绍:  抗胃壁细胞抗体(PCA)由Taylor等首次于恶性贫血病人血清中发现,其靶抗原定位于壁细胞分泌小管微绒毛的膜内,是胞浆内的微粒体部分和胞质膜上的一种脂蛋白。PCA有器官特异性,不与胃以外的其他脏器反应,但无种属特异性,故可用大鼠或兔的胃壁细胞作抗原。PCA的Ig类别主要为

免疫学实验抗红细胞抗体介绍

抗红细胞抗体介绍:  抗红细胞抗体(RBC抗体)于1904年由Donatht和Landsteiner首次报道,是人体内第一个被阐明的自身抗体,现称为Donath—Landsteiner(DL)抗体。共分为温抗体(WAS)、冷凝集素抗体(CAs)、DL抗体三大类。该抗体能引起自身免疫性溶血性贫血(AH

免疫荧光技术的概述

  免疫荧光技术(immune fluorescence)  将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。  免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制

酶标抗体法—致病微生物检测的介绍

  不论是在发展中国家还是发达国家,对食品安全影响较大的是致病微生物引起的食源性疾病,而在人们食物链中,单增李斯特菌、空肠弯曲菌、沙门氏菌都是重要的食源性致病菌。已建立检测沙门氏菌的双抗夹心ELISA法,检测单增李斯特菌的ELISA法,耐热菌间接竞争ELISA快速检测方法等。

免疫学技术:悬浮细胞的免疫荧光标记实验

免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。实验方法基本方案实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

实验方法原理取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细

简介免疫荧光定量检测原理

  将特异的荧光抗体先固体于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端滴加样品后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该荧光体发生特异性结合,随着进一步的层析作用,用此抗原的另一个抗体对此复合物进行捕捉,多余的荧光抗体用其二抗进行捕捉,两次捕

自身免疫病实验室诊断

一、血清循环免疫复合物(CIC)测定 【参考值】<30m8/L(LA了法、SPA夹心EUSA法) 【临床意义】 1.增高见于血清病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎等免疫复合物病。动态观察CIC可监测病情进展和判断疗效。 2.高甘油三酯、高γ球蛋白血症可使结果假阳性,低免疫球蛋白血症可

抗胰岛细胞抗体检测及其临床价值

  参考值:正常人血清抗胰岛细胞抗体为阴性。  临床意义:  (1)诊断胰岛素依赖性糖尿病。胰岛素依赖性糖尿病患者,检出率达60%~70%。常在临床发病前期即可测出,数周后降低。起病后3年检出率约20%。  (2)作为糖尿病的分型指标。IDDM患者发病时的阳性率为65%~85%,而NIDDM患者发病