上皮细胞类培养实验_乳腺组织培养实验

实验方法原理乳腺主要由腺上皮组成,培养成功时可获纯上皮细胞培养物。乳腺材料易于获得,既可培养正常乳腺,也可利用乳腺癌组织。乳腺组织不难培养,是很好的培养和研究对象。实验材料乳腺试剂、试剂盒Hanks培养液仪器、耗材吸管纱布实验步骤一、取材培养正常乳腺可从乳腺切除组织或乳腺成形术组织取材。预先把无菌容器送交手术室(最好含有培养液),委托术者选脂肪少、腺组织多的部位,切取少许,送培养室立即进行培养。获取组织后,应先剥除脂肪组织;培养正常乳腺组织宜用胶原酶消化法。培养乳腺癌组织可采用两种方法。二、培养程序1. 直接培养法适于培养含纤维少的软组织,其主要过程是(1)在含有少量培养液或Hanks液的容器中,用锋利刀片将组织反复切割成碎块(或用剪刀剪切)。(2)把组织碎块连同液体注入离心管中,再补加少许培养液,用吸管吹打片刻,置试管架中3~5 分钟。(3)此时乳腺细胞团或单个细胞大多沉降至管底,而脂肪或其它含纤维多的碎块悬于液体......阅读全文

结缔组织类细胞培养实验——巨噬细胞培养实验

实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群,难以长期生存,好的条件下仅能生活2~3 周,因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限细胞系;大多来自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW

从组织培养细胞中制备粗微体实验

实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒环己酰亚胺                                                                  匀浆缓冲液    

从组织培养细胞中制备粗微体实验

            实验材料 细胞 试剂、试剂盒 环己酰亚胺 匀浆缓冲液

从组织培养细胞中制备粗微体实验

实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺(溶于蒸馏水,贮存液浓度 0.1 mol/L,-20℃ 保存。如果不溶,试着加热到 40℃ 以帮助溶解)(终浓度 10 μmol/L),37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室,立

实验室新手指南之植物组织培养

MS 大量元素母液的配制一般将大量元素配制成 10 倍的母液,使用时再稀释 10 倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大 10 倍的:NH4NO3、 KNO3 ,KH2PO4、MgSO4.7H2O、CaCl2.2H2O 的量,所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解,待全部溶解后,zui后定容至 1000m

植物组织培养实验室仪器配置有哪些?

植物组织培养实验室分为准备室、接种室、培养室和细胞学实验室,其仪器配置清单如下: 实验室区域 实验室任务 仪器配置 准备室 1药品的

植物组织培养实验室仪器设备配置清单

一、设计规模和原则植物组织培养实验室设计的规模取决于工作的目的,比如以工厂化生产为目的或以科研为目的。设计原则如下:1)保证无菌操作: 植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件,需要一定的环境、设备、器材和用具。2)工作方便:按组织培养程序来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。

线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体

实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol

结缔组织类细胞培养实验

成纤维细胞培养实验 巨噬细胞培养实验             实验方法原理 包括人在内的各种成纤维细胞都很容易培养,也是其它组织培养时的副产物,极易获得。人的成纤维细胞不仅

结缔组织类细胞培养实验——成纤维细胞培养实验

实验方法原理包括人在内的各种成纤维细胞都很容易培养,也是其它组织培养时的副产物,极易获得。人的成纤维细胞不仅容易培养,而且生物性状稳定,很难发生转化,成为二倍体细胞培养的主要对象,人的二倍体细胞系,主要为成纤维细胞。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材剪刀实验步骤为获取大量成纤维细胞培养,以便

乳腺上皮细胞分离培养操作步骤和注意事项

乳腺主要由腺上皮组成,早期乳汁或断奶后的乳汁含有上皮细胞团块,可用离心法收集上皮细胞(混杂有巨噬细胞),培养时常用人胚小肠纤维细胞作饲养层,可抑制间质细胞生长。使用优化培养基可使用上皮细胞传代,并形成克隆,在胶原底物上要形成三维立体的复层结构。胰岛素,氢化可的松,霍乱肠毒素,EGF可促进上皮细胞生长

乳腺上皮细胞分离培养操作步骤和注意事项

乳腺主要由腺上皮组成,早期乳汁或断奶后的乳汁含有上皮细胞团块,可用离心法收集上皮细胞(混杂有巨噬细胞),培养时常用人胚小肠纤维细胞作饲养层,可抑制间质细胞生长。使用优化培养基可使用上皮细胞传代,并形成克隆,在胶原底物上要形成三维立体的复层结构。胰岛素,氢化可的松,霍乱肠毒素,EGF可促进上皮细胞生长

组织培养再生

步骤一:接种组织培养的接种是指将灭过菌的材料,在无菌的情况下,切成小块,放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作,多在无菌室或超净工作台上进行,中学可制作接种箱,在箱内进行接种。接种的方法步骤如下: ①在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、

葡萄组织培养

一、葡萄的形态特征和生物学特性葡萄(Vitis vinifera L.)属落叶木质藤本植物,葡萄地上部分的茎细长柔弱,髓部较大,组织较疏松。节上具有卷须,使新梢可以缠绕其它树木或支架上向上攀援。叶近圆形或卵形,35裂,基部心形。圆锥花序。葡萄是深根性作物,其根系在土壤中的分布状况,随气候、土壤型,地

配制组织培养培养基

①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。   ②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。   ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,

植物组织培养的培养条件

(一)温度: 对大多数植物组织20~28℃即可满足生长所需,其中26~27℃最适合。 (二)光: 组织培养通常在散射光线下进行。光的影响可导致不同的结果。有些植物组织在暗处生长较好,而另一些植物组织在光亮处生长较好,但由愈伤组织分化成器官时,则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和

植物组织培养的培养步骤

第一步,将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料,可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗,然后再用自来

组织培养常用培养基

组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点,适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时,应对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择使用。培养基中的激素种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料而有变化,因此各配方中均不列入。几种常用培养基如下:MS培养基  MS

组织培养培养基配制

①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,

植物组织培养的培养条件

植物组织培养即植物无菌培养技术,又称离体培养,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、

植物组织培养的培养方法

1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。2、试管组织培养试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培瓶等器皿中在无菌

植物组织培养简介

  植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论,近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其

花卉组织培养技术

一、实验原理 花卉组织培养,就是分离花卉植物体的一部分,如茎类、茎段、叶、花、幼胚等,在无菌试管,并配合一定的营养、激素、温度、光照等条件,使其产生完整植株。由于其条件可以严格控制,生长迅速,1-2个月即为一个周期,因此在花卉植物的生产上有重要应用价值。快速大量繁殖方面:对一些难繁殖的名贵品种花卉

花卉组织培养技术

实验概要掌握花卉组织培养的基本技术流程。实验原理花卉组织培养,就是分离花卉植物体的一部分,如茎类、茎段、叶、花、幼胚等,在无菌试管,并配合一定的营养、激素、温度、光照等条件,使其产生完整植株。由于其条件可以严格控制,生长迅速,1-2个月即为一个周期,因此在花卉植物的生产上有重要应用价值。快速大量繁殖

马铃薯的组织培养

1、繁殖瓶苗 将待繁脱毒苗在无菌条件下每叶节切一段,接种在仅含大量元素、微量元素和铁盐的无激素MS固体或液体(可用纸桥)培养基的组培瓶中,置培养室内培养。培养条件为:光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,培养温度(25±2)℃,空气相对湿度50%-60%,自然通风。叶节段接种30-50

常规组织培养法

一、初代消化培养法1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3、 处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分

兰花的组织培养

法国人莫瑞尔(G.M. Morel)首先将组织培养的技术应用在兰花上,采取茎顶组织进行培养,经由类原球体而获得植株。利用组织培养进行芽体增殖是另一个获取种苗的方法,例如,蝴蝶兰便利用花梗芽进行繁殖,这种方法的缺点是繁殖的效率较差,而且成本较高。由于芽体是经由多细胞发育而成,并不适合做为基因转殖的材料

植物组织培养过程

一、培养材料的采集组织培养所用的材料非常广泛,可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶,有时也利用花粉粒和花药,其中根尖不易灭菌,一般很少采用。对于木本花卉来说,阔叶树可在一、二年生的枝条上采集,针叶树种多采种子内的子叶或胚轴,草本植物多采集茎尖。在快速繁殖中,最常用的培养材料是茎尖,通常切块在0.5厘

色素类染色实验

实验方法原理 含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素,常规染色为棕黄色大小不等的颗粒,呈点状和团块状分布于细胞内或细胞外。有的存在于血管内。染色反应是由于三价铁离子从蛋白质中被盐酸分离出来,再与亚铁氡化钾反应,生成蓝色的亚铁氰化铁物质,通常用普鲁士(Perls)蓝反应。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒

上皮细胞培养

  1)表皮细胞培养  1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。  2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。  3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。  4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分