从组织培养细胞中制备粗微体实验

实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺(溶于蒸馏水,贮存液浓度 0.1 mol/L,-20℃ 保存。如果不溶,试着加热到 40℃ 以帮助溶解)(终浓度 10 μmol/L),37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室,立即去掉培养基,用含有与培养基同样环己酰亚胺浓度的冰冷 PBS 洗涤细胞 3 次,将培养皿口朝下倒立于纸巾上数分钟,偶尔拍打。用 Kimwipe 纸巾擦掉侧壁上残留的 PBS。3. 加入 0.7 ml 含有 2~4 单位/ml RNase-IN (Boehringer Mannheim, Indianapolis, Indiana) 的 HM,轻轻混旋培养皿以使 HM,能够覆盖培养皿的底面。匀浆缓冲液(HM):10 mmol/L HEPES-KOH 缓冲液,pH 7.510 mmol/L KCl1 mmol/L MgCl21 mmol/......阅读全文

从组织培养细胞中制备粗微体实验

实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺(溶于蒸馏水,贮存液浓度 0.1 mol/L,-20℃ 保存。如果不溶,试着加热到 40℃ 以帮助溶解)(终浓度 10 μmol/L),37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室,立

从组织培养细胞中制备粗微体实验

实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒环己酰亚胺                                                                  匀浆缓冲液    

从组织培养细胞中制备粗微体实验

            实验材料 细胞 试剂、试剂盒 环己酰亚胺 匀浆缓冲液

从实体组织中制备粗微体实验_从狗的胰脏中制备粗微体

实验材料胰脏试剂、试剂盒HM 缓冲液蔗糖-缓冲液三乙基氨基乙酸缓冲液实验步骤1. 从动物身体切下胰脏,立即用大约 50 ml 冷 HM 缓冲液冲洗,放置于干净的纸巾上,去除结缔组织:匀浆介质(HM)0.25 mol/L 蔗糖-缓冲液A缓冲液A:50 mmol/L 三乙基氨基乙酸缓冲液(TEA),pH

从实体组织中制备粗微体实验_从大鼠肝脏制备微体

实验材料雄大鼠试剂、试剂盒蔗糖蔗糖HM仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠,大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝(6 g)大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体,所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后,打开

从实体组织中制备粗微体实验

从大鼠肝脏制备微体从狗的胰脏中制备粗微体实验材料雄大鼠                                                          试剂、试剂盒蔗糖                                                        

从实体组织中制备粗微体实验

从大鼠肝脏制备微体 从狗的胰脏中制备粗微体             实验材料 雄大鼠 试

从实体组织中制备粗微体实验

实验材料 雄大鼠试剂、试剂盒 蔗糖蔗糖HM仪器、耗材 玻璃板实验步骤 1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠,大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝(6 g)大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体,所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液

细胞膜的制备方法实验——从悬浮细胞中制备细胞膜

实验材料胶原酶试剂、试剂盒EDTAHBSS胶原酶溶液阳离子硅胶贮存液仪器、耗材离心机实验步骤一、用胶原酶/EDTA 释放细胞1. 用预保温溶液洗涤单层细胞并用胶原酶处理(1) 预保温溶液洗涤细胞。预保温溶液:5 mmol/L EDTA 钠盐溶于 HBSS,不含二价阳离子。(2) 在单层细胞上加 1%

从肝脏组织中制备细胞核实验

实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7

从肝脏组织中制备细胞核实验

            实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液

细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核

实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织,放入置于冰上的平皿中,用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液,用剪刀或剃须刀片将组织切碎,转入一个干净试管中,加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用

线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体

实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol

包被组织培养板制备实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A

包被组织培养板制备实验

实验材料刀豆蛋白A试剂、试剂盒磷酸缓冲液(PBS)仪器、耗材6 孔 35 mm 组织培养板无菌塑料袋(用于保存包被板)实验步骤1. 将 12 mg 刀豆蛋白 A 加入 120 ml 无菌的 PBS 中,至终浓度为 100 μg/ml。2. 在组织培养板的每孔中加入 1 ml PBS/刀豆蛋白 A 混

包被组织培养板制备实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

下述方案是经修改过的 Trizol 方案,用于从植物组织中分离 RNA,其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤,以选择性地沉淀 RNA,而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇

杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备

实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备

实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验

            实验材料 石蜡包埋的组织样品 试剂、试剂盒 甲酰胺 消化缓冲液 乙醇 肝糖

从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验

实验材料 石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒 甲酰胺消化缓冲液乙醇肝糖异丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯仪器、耗材 微量离心管恒温箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去离子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水消化缓冲液(lmol/L 异硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巯基乙醇

从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验

该方案是由 Godfrey 等改进 Fisher 的方案发表的。此前已有从固定组织中纯化 RNA 的方案发表。Ambion 和 Roche 发明了从石蜡包埋的组织中纯化 RNA 的商品化试剂盒。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒甲酰胺

从组织和培养细胞中制备轻线粒体组分

试剂和器材: 1. 匀浆介质:0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH,pH7.4;2. 按要求向溶液加入蛋白酶抑制剂;3. 磷酸盐缓冲液;4. 低速冷冻离心机,配有30—40ml离心管的吊桶式离心转子;5. 高速离心机,配有30—40ml离心管

组织培养细胞染色体制备方法

组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株,多为恶性肿瘤细胞株,且呈贴壁生长,仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态,只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相,所以积水仙素处理的时机及量是染

从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构

实验材料细胞试剂、试剂盒Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材电子显微镜实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消化步骤,每 107 个细胞最少要用 1 ml 缓冲液,以后减半

细胞膜的制备方法_从生长于微载体上细胞中分离细胞膜

实验材料细胞试剂、试剂盒CB仪器、耗材微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头离心管振荡器尼龙单丝网探头超声仪实验步骤1. 准备下列仪器:微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头和合适的离心管振荡器尼龙单丝网,孔径约 50 μm探头超声仪2. 将微载体培养物转移到 50 ml 的锥形离心管中。3

从熔体中结晶宝石

适宜组分的熔化和结晶是这类合成方法的特点,它主要有四种方法:1.焰熔法焰熔法也称维尔纳叶法。它是维尔纳叶在1908年创造完成的,也是合成宝石的第一种商业生产方法。它主要用来生长合成红宝石、蓝宝石、金红石、尖晶石和钛酸锶等。图10-1-1 维尔纳叶炉焰熔法的基本原理是:适宜组分的细粉末落入烈焰之中熔化

体外培养细胞的染色体标本制备实验

实验材料细胞实验步骤1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,离心