细胞膜完整性及膜转运功能检测实验——HoechstPI染色法
实验步骤1. 主要试剂的配制碘化丙锭贮存液：100 μg/ml，4℃ 避光保存。Hoechst 33258 贮存液：100 μg/ml，4℃ 避光保存。2. 操作流程2.1 常规制备单细胞悬液（方法同 PI 染色法），加入 Hoechst 33258 溶液，使其终浓度为 1 μg/ml，37℃ 孵育 7 min，离心后弃染液，用PBS重悬。2.2 加入 PI 染液，使其终浓度为 5 μg/ml，置冰块上片刻，离心弃染液，用 PBS 洗 1 次后，即可上机检测，紫外激光记录 400～500 nm 处蓝色荧光和 >630 nm 处红色荧光。3. 结果观察正常对照细胞呈弱蓝色及弱红色荧光，凋亡细胞呈蓝色及弱红色荧光，死亡细胞呈强红色及弱蓝色荧光。展开 ......阅读全文
细胞膜完整性及膜转运功能检测实验——HoechstPI－染色法
实验步骤1. 主要试剂的配制碘化丙锭贮存液：100 μg/ml，4℃ 避光保存。Hoechst 33258 贮存液：100 μg/ml，4℃ 避光保存。2. 操作流程2.1 常规制备单细胞悬液（方法同 PI 染色法），加入 Hoechst 33258 溶液，使其终浓度为 1 μg/ml，37℃ 孵育
细胞膜完整性及膜转运功能检测实验—乙酰乙酸染色法
实验方法原理FDA是一种无荧光的酯酶底物，能被活细胞摄取并在细胞内被酯酶水解形成荧光素。常用方法是将FDA与PI 同时孵育细胞，测定活细胞与死亡细胞比例。实验步骤1. 主要试剂的配制FDA（Molecularprobes，In.OR，USA）保存液 1 mg/ml 的丙酮溶液。PI（Sigma，MO
细胞膜完整性及膜转运功能检测实验
1. 主要试剂的的配制碘化丙锭（PI）染色液（4℃ 避光保存）：Pl，100 μg/ml；TritonX-100，1.0%；NaCl 0.9%。2. 操作流程2.1 样本的准备2.1.1 培养细胞收集悬浮细胞于 Eppendorf 管中。贴壁细胞用胰蛋白酶消化后制成单细胞悬液，1000r/min离心
细胞膜完整性及膜转运功能检测实验——碘化丙锭染色法
区分活细胞和死亡细胞的关键在于死亡细胞膜转运功能及膜完整性的丧失。许多阳离子染料，如台盼蓝、碘化丙锭（PI）、溴化乙锭（EB）以及7-氨基放线菌素D（7-ADD）等，常被用于检测细胞的存活率。活细胞由于膜具有完整性而不被着色，死亡细胞（如坏死细胞或晚期凋亡细胞）由于其膜完整性的丧失而被着色。实验步骤
细胞膜完整性及膜转运功能检测实验—膜联蛋白－V－染色法
实验方法原理细胞凋亡时，其细胞膜上的磷脂分布发生改变，尤其是凋亡早期，细胞膜上的磷脂酰胆碱暴露出来，由于 PS（磷脂酰丝氨酸）外膜化比凋亡引起的核酸变化更早期，成为细胞凋亡的早期指征之一。抗凝剂膜联蛋白 V 具有与带负电荷的磷脂酰胆碱结合的特性，因此可采用荧光素标记的膜联蛋白 V 和 PI 同时染色
检测形态学及细胞膜完整性的HoechsPI双染色法
细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性液增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间，利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪检测细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。 利用Hoechs-PI染色法，正常细胞对染料有抗拒性，荧光染色很浅，凋亡细胞主要摄取Hoecha染
细胞膜的物质转运功能
细胞膜是脂溶性的脂质双分子层，小分子物质通过被动转运和主动转运的方式进行转运物质的，在细胞合成代谢和分解代谢中起至关重要的作用。被动转运是物质由高浓度一侧向低浓度一侧转运。能量来源于浓度差，不消耗能量ATP。它分为易化转运和单纯扩散。前者又分为通道转运和载体转运。通道转运转运钾离子、钠离子、钙离
细胞膜的细胞膜的物质转运功能是什么
（1）单纯扩散：一些脂溶性小分子物质由膜的高浓度一侧向低浓度一侧移动的过程。 扩散物质：脂溶性高、分子量小的物质，如O2、CO2、N2、乙醇、尿素和水分子等。 特点：①不需要载体；②不消耗能量；③扩散的最终结果是使该物质在膜两侧的浓度达到平衡。 （2）经载体和通道膜蛋白介导的易化扩散：
细胞膜糖类电镜显示实验——钌红染色法
细胞膜糖类 电镜 显示技术 免疫组织化学实验技术及应用 第十四章细胞膜糖类电镜显示实验可以用于：观察细胞膜上的糖蛋白和糖脂。其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术，此外，还有钌红染色法等。实验方法原理钌红染色法的原理是钌红可以与羧基（酸性基）通过静电结合，电镜下呈电子密度高染色。实验材料组织样品试剂
植物膜转运的模型预测、实验验证及生理学影响
图注：上图：玉米根部O2流的振荡变化作为O2利用情况的指标。A:不同氧气浓度下O2流的振荡规律；B:O2流振荡对外界氧气的依赖性。关键词：适应(Adaptation)；离子流(Ion flux)；膜(Membrane)参考文献：Shabala S et al. . J. Exp. Bot. .200
细胞凋亡的检测
早期细胞凋亡检测（Hoechst-PI染色法）实验步骤展开晚期细胞凋亡检测（TUNEL法）实验步骤晚晚期细胞凋亡检测（DNA含量分析法）实验步骤展开
怎样固定悬浮细胞
如何判断悬浮细胞培培养时，细胞是死的还是活的将在动物细胞凋亡研究中应用的Hoechst-PI双重荧光染色 法与琥珀酸脱氢酶(SDH)染色法相结合，建立了一种更加完善的、能同时鉴别和研究悬浮培养的植物细胞凋亡及坏死的新方法——Hoechst-PI- SDH三重染色法(H-P-S法)。该方法可直接用于红
细胞膜的制备方法实验——分离顶层膜、基底膜或中间膜
从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜试剂、试剂盒包被缓冲液PAA裂解缓冲液Nyoodenz仪器、耗材阳离子硅胶微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头离心管实验步骤1. 制备下列溶液：(1) 包被缓冲液（CB）20 mmol/L MES135 mmol/L NaCI0.5
细胞凋亡的检测
早早期细胞凋亡检测（半胱氨酸蛋白酶3法） 早期细胞凋亡检测（磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法） 早期细胞凋亡检测（细胞线粒体膜蛋白法） 早期细胞凋亡检测（Hoechst-PI染色法） 晚期细胞凋亡检测（TUNEL法） 晚晚期
细胞凋亡的检测
早早期细胞凋亡检测（半胱氨酸蛋白酶3法） 早期细胞凋亡检测（磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法） 早期细胞凋亡检测（细胞线粒体膜蛋白法） 早期细胞凋亡检测（Hoechst-PI染色法） 晚期细胞凋亡检测（TUNEL法） 晚晚期
叶绿体被膜完整性的测定
一、原理由于玻璃氰化钾不能透过被膜，故完整叶绿体在等渗介质中不能进行玻璃氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体，铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理，比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反应速率，就可计算叶绿体被膜的完整度。二、仪器与用具氧电极测氧全套装置；烧杯；微量进样器；
叶绿体被膜完整性的测定
一、原理由于玻璃氰化钾不能透过被膜，故完整叶绿体在等渗介质中不能进行玻璃氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体，铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理，比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反应速率，就可计算叶绿体被膜的完整度。二、仪器与用具氧电极测氧全套装置；烧杯；微量进样器；
叶绿体被膜完整性的测定
一、原理由于玻璃氰化钾不能透过被膜，故完整叶绿体在等渗介质中不能进行玻璃氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体，铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理，比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反应速率，就可计算叶绿体被膜的完整度。二、仪器与用具氧电极测氧全套装置；烧杯；微量进样器；
叶绿体被膜完整性的测定
叶绿体被膜完整性的测定可用于：（1）促进光合作用的分子机理研究；（2）检测细胞活性。实验方法原理由于玻璃氰化钾不能透过被膜，故完整叶绿体在等渗介质中不能进行玻璃氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体，铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理，比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反
转运RNA的功能
主要是携带氨基酸进入核糖体，在mRNA指导下合成蛋白质。即以mRNA为模板，将其中具有密码意义的核苷酸顺序翻译成蛋白质中的氨基酸顺序（见蛋白质的生物合成、核糖体）。tRNA与mRNA是通过反密码子与密码子相互作用而发生关系的。在肽链生成过程中，第一个进入核糖体与mRNA起始密码子结合的tRNA叫起始
转运RNA的功能
主要是携带氨基酸进入核糖体，在mRNA指导下合成蛋白质。即以mRNA为模板，将其中具有密码意义的核苷酸顺序翻译成蛋白质中的氨基酸顺序（见蛋白质的生物合成、核糖体）。tRNA与mRNA是通过反密码子与密码子相互作用而发生关系的。在肽链生成过程中，第一个进入核糖体与mRNA起始密码子结合的tRNA叫
细胞膜功能
为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境； 选择性的物质运输，包括代谢底物的输入与代谢 产物的排除，其中伴随着能量的传递； 提供细胞识别位点，并完成细胞内外信息跨膜传递；? 为多种酶提供结合位点，使酶促反应高效而有序地进行；? 介导细胞与细胞，细胞与基质之间的连接；? 质膜参与形成具有不
细胞膜功能
（1）分隔、形成细胞和细胞器，为细胞的生命活动提供相对稳定的内部环境，膜的面积大大增加，提高了发生在膜上的生物功能； （2）屏障作用，膜两侧的水溶性物质不能自由通过； （3）选择性物质运输，伴随着能量的传递； （4）生物功能：激素作用、酶促反应、细胞识别、电子传递等。 （5）识别和传递信
细胞膜的物质运转及受体功能
细胞膜的物质运转及受体功能(1)分隔、形成细胞和细胞器，为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境，膜的面积大大增加，提高了发生在膜上的生物功能；(2)屏障作用，膜两侧的水溶性物质不能自由通过；(3)选择性物质运输，伴随着能量的传递；(4)生物功能：激素作用、酶促反应、细胞识别、电子传递等。(5)识别和传
流式细胞仪之细胞凋亡检测的PI双染色法
流式细胞仪是检测悬浮的单细胞或微粒的信号分析技术，被誉为实验室的“CT”，可用于细胞凋亡检测 、细胞分选、单细胞内细胞因子表达分析等。这里简单介绍下流式细胞仪检测细胞凋亡的两种方法。第一部分 流式细胞仪 检测细胞凋亡:Heochst 33342/PI双染色法一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染
转运反应成分的制备实验——转运反应
试剂、试剂盒磷酸肌酸肌酸磷酸激酶ATPGTP仪器、耗材微量离心管实验步骤1. 将反应混合物加入一在冰上放置的微量离心管中。能量重建系统成分如下：5 mmol/L 磷酸肌酸20 单位/ml 肌酸磷酸激酶0.5 mmol/L ATP0.5 mmol/L GTP2. 滴一滴孵育混合物到一片位于带盖子的湿盒
支原体的检测实验_荧光染色法
实验方法原理荧光显微镜检查法，荧光染料用 Hoechst 33258，它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA，能着色，是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1. 标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出（如细胞已
我揭示葡萄糖转运体在细胞膜的分布形态和动态转运机制
葡萄糖分子是维持细胞代谢和生命活动的重要能量来源。葡萄糖转运体1(GLUT1)广泛存在于人体细胞表面，对于维持正常生理功能极为重要，其表达和功能异常与很多疾病相关。然而，GLUT1在细胞膜上的详细定位与分布信息，以及定位分布信息与它们的生理功能之间的联系还未完全解析，尤其是单个葡萄糖分子跨膜转运
转运RNA的功能简介
主要是携带氨基酸进入核糖体，在mRNA指导下合成蛋白质。即以mRNA为模板，将其中具有密码意义的核苷酸顺序翻译成蛋白质中的氨基酸顺序（见蛋白质的生物合成、核糖体）。tRNA与mRNA是通过反密码子与密码子相互作用而发生关系的。在肽链生成过程中，第一个进入核糖体与mRNA起始密码子结合的tRNA叫
胞吞转运的功能特点
中文名称胞吞转运英文名称transcytosis定 义上皮细胞将胞外大分子在一侧以受体介导胞吞作用摄入胞内，经内体分拣，小泡穿过细胞质转运，在另一侧将物质外排到胞外间隙的运输过程。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生理（二级学科）