小鼠免疫实验_用电泳分离的抗原进行免疫
实验材料任意品系小鼠6~8 周试剂、试剂盒冷的 0.1 mol L KClPBS抗原完全和不完全弗氏佐剂仪器、耗材组织研磨机22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 将含 10~50 μg 目的蛋白抗原的蛋白质混合物上样于适当的 SDS 变性分离胶并电泳。2. 将胶浸泡在冷的 0.1 mol/L 的 KCl 中 5~15 min。蛋白质条带会在透明凝胶的背景下出现白色沉淀。用解剖刀或剃须刀切下合适的条带。3. 在组织研磨机中用最小量的 PBS 研磨凝胶条带。确定连续加入 100 μl 直至研碎的凝胶条带成为液体所需的最小体积。4. 用包含 10~25μl 抗原的凝胶悬液 200~400 μl 腹腔注射免疫小鼠。5. 3 周后用包含 10~25μl 抗原的凝胶悬液 200~400μl 腹腔注射强化免疫小鼠。6. 采血,测定抗体滴度,进行细胞融合试验(见基本方案步骤 4~......阅读全文
小鼠免疫实验_-用电泳分离的抗原进行免疫
实验材料任意品系小鼠6~8 周试剂、试剂盒冷的 0.1 mol L KClPBS抗原完全和不完全弗氏佐剂仪器、耗材组织研磨机22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 将含 10~50 μg 目的蛋白抗原的蛋白质混合物上样于适当的 SDS
小鼠免疫实验_-制备免疫脾细胞:用可溶性抗原致敏
实验材料任意品系小鼠(6~8 周)试剂、试剂盒PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 准备等体积 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液(200~400 μl/鼠)。用双头带塞
小鼠免疫实验
实验方法原理 实验材料 任意品系小鼠(6~8 周)试剂、试剂盒 PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材 22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤 1. 准备等体积 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液(200~40
实验小鼠肺部炎症的局部免疫疗法
实验概要局部肺部疾病,如哮喘,慢性阻塞性肺病或肺癌的免疫疗法的创新要求肺部目标细胞有一个完善的交付途径。一个重要途径是通过直接滴入到呼吸道而不是通过消化道。本试验详细的介绍了抗体获得,重组细胞因子,抑制小分子和其他分子疗法,以有效诱导和保护呼吸道的免疫反应。动物在可吸入麻醉下提供治疗,将溶液滴入小鼠
实验小鼠肺部炎症的局部免疫疗法
实验概要局部肺部疾病,如哮喘,慢性阻塞性肺病或肺癌的免疫疗法的创新要求肺部目标细胞有一个完善的交付途径。一个重要途径是通过直接滴入到呼吸道而不是通过消化道。本试验详细的介绍了抗体获得,重组细胞因子,抑制小分子和其他分子疗法,以有效诱导和保护呼吸道的免疫反应。动物在可吸入麻醉下提供治疗,将溶液滴入小鼠
抗原与免疫血清的制备实验
将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。实
抗原与免疫血清的制备实验
将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。
抗原和免疫血清的制备实验
实验材料 家兔试剂、试剂盒 普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪器、耗材 标准比浊管离心机实验步骤 1. 抗原的制备:标准菌株的选择:所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集,与特异血清有高度凝集者可作为菌种。2. 菌液的制备(1)原液制
小鼠免疫程序
一、抗原的准备 1、收到抗原时,首先要了解抗原的种类、性质和浓度,以便采取不同的处理方法。 2、多肽抗原,一般分多肽―偶联KLH和多肽―偶联BSA(或GGG)或裸多肽三种。多肽―偶联KLH一般用于免疫,而多肽―偶联BSA或裸肽一般用于检测,在免疫时注意区分使用。 3、分装 (1)收到抗原后,应及时
小鼠弓形虫循环抗原(TCA)酶联免疫分析
小鼠弓形虫循环抗原(TCA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中弓形虫循环抗原(TCA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠弓形虫循环抗原(TCA)水平。用纯化的小鼠弓形虫循环抗原(TCA)
小鼠肝炎病毒抗原(MHV-Ag)酶联免疫分析(ELISA)
小鼠肝炎病毒抗原(MHV Ag)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于检测小鼠血清,血浆中肝炎病毒抗原(MHV Ag)水平。实验原理: 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中小鼠肝炎病毒抗原(MHV Ag)。用纯化的小鼠肝炎病
免疫学实验阿米巴原虫抗原介绍
阿米巴原虫抗原介绍: 指检测人体肠道中的溶组织内阿米巴致病后血液中的原虫抗原。 阿米巴原虫抗原正常值: 酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光法、直接免疫荧光法:阴性。 阿米巴原虫抗原临床意义: 阿米巴病最可靠的诊断依据是:粪便直接涂片显微镜检查有溶组织内阿米巴原虫(滋养体
通过细胞计数对疾病模型小鼠进行免疫监测
通过细胞计数对疾病模型小鼠进行免疫监测 摘要生物样本往往是非单一细胞的混合物,如原代分离的细胞样本和许多培养的细胞样本都是由不同种类或不同功能的细胞组成。而对于样本中不同细胞亚群的区分和定量恰恰是很多研究中的关键一环。这些混合在一起的不同细胞通常是使用流式细胞仪和荧光标记的细胞类型特异性抗体来进行
免疫沉淀实验——免疫沉淀放射性标记抗原
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS仪器、耗材离心机实验步骤1. 按基本方案进行,但以下说明的操作步骤已经修改:(2b)按所需选用步骤4b所提供的其中之一备择物(①,②,③)预澄清放射性抗原溶液。(4b)加入1 μl 抗原特异性抗血清,或3 μg 抗原特异性单抗,或抗质特异性杂交瘤培养上 清(克隆化细
方案1-用-FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀
实验材料抗 FLAGM2 单克隆抗体293 T 细胞试剂、试剂盒抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶甘氨酸辣根过氧化物酶IEF缓冲液裂解缓冲液NaCl磷酸盐缓冲液聚乙烯亚胺RF10培养基RPMI 1640 培养基4 X SDS-PAGE 加样缓冲液叠氮化钠胰岛素仪器、耗材大型离心机配有检测 GFP 滤片
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
材料二甲苯 酒精(100%,95%) EDTA抗原修复工作液(pH8.0,稀释50倍使用) 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4(稀释10倍使用) DAB显色液(临用前配制:试剂盒A、B、C各50ul,于1ml水中混匀)。方法1. 石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜 2.
免疫学实验白细胞抗原(HLA)介绍
白细胞抗原(HLA)介绍: 人类白细胞抗原(HLA)是一群存在于细胞表面的糖蛋白分子,曾认为引起器官移植排斥反应的主要抗原。 检测HLA有助于对某些疾病的诊断、分型、推测预后,可采用血清法测定A、B、C位点抗原,以混合淋巴细胞培养法测定D、 DR抗原。 白细胞抗原(HLA)正常
免疫学实验抗原皮内试验介绍
抗原皮内试验介绍: 本试验主要用于对尘、螨、花粉等抗原过敏者的血清学治疗指导有帮助。 皮内试验是最常用的皮肤试验。应用范围也很广,几乎各类抗原及各型反应都可用皮内试验进行测定,只是不同类型的反应观察结果的时间和判定结果的标准有所不同。 抗原皮内试验正常值: 阴性。
抗原和抗体浓度的优化免疫斑点实验
对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法:1、 用TBS和P
半抗原性免疫原怎么样进行制备?
半抗原指只具有抗原性而无免疫原性的物质。 多见于分子量小于4000的有机物质。半抗原与载体相结合具有免疫原性。(一)载体1.多肽聚合物:常用多聚赖氨酸。2.蛋白质:以牛血白蛋白最常见。3.大分子聚合物和某些颗粒。(二)半抗原与载体的连接方法1.物理方法:通过电荷和微孔吸附半抗原。2.化学方法:通过功
免疫细胞:抗原递呈细胞
1.抗原递呈细胞的概念 在机体的免疫应答过程中,能摄取、加工、处理抗原并将抗原信息提呈给T淋巴细胞的辅佐细胞,称为 抗原提呈细胞(APC)。 2.抗原递呈细胞的种类 抗原提呈细胞分专职性递呈细胞和非专职性递呈细胞两类。单核/巨噬细胞、树突状细胞(DC)和B淋巴细胞等能表达MHC Ⅱ类分子的
免疫印迹与免疫检测实验——第二抗体欧联物进行免疫检测
实验材料蛋白质试剂、试剂盒封闭缓冲液TTBS缓冲液第一抗体TBS缓冲液仪器、耗材手套摇床实验步骤1. 将膜放入可热密封的塑料袋,加5 ml 封闭液,密封塑料袋,在旋转摇床或摆动平台中摇动30~60 min。 2. 用封闭液稀释第一抗体(取决于抗体和检测系统,以1:10~1:100 000稀释)。
免疫荧光技术直接法测抗原实验步骤
直接法测抗原⑴基本原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。⑵试剂与仪器磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01m
免疫学实验甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)介绍
甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)介绍: 甲型肝炎病毒抗原是一种能够引发甲型肝炎病毒抗体产生的物质,检测出甲型肝炎病毒抗原可证实甲型肝炎病毒在体内的存在。 甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)正常值: 阴性。 甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)临床意义: 异常结果: 本检查主要用于甲型肝炎的辅助诊
免疫学实验疟原虫抗体和抗原介绍
疟原虫抗体和抗原介绍: 指检测疟原虫感染后血液中的抗原和抗体。疟原虫抗体和抗原正常值: 间接免疫荧光法:小于1:20。 酶联免疫吸附试验、放射免疫法:阴性。疟原虫抗体和抗原临床意义: 异常结果:本检测用于疟疾的诊断。 人感染发生原虫血症后1周就可检出免疫抗体,且在短期内达到高峰,一段时间后
免疫学实验轮状病毒抗原的检测介绍
轮状病毒抗原的检测介绍: 轮状病毒(rotavirus,RV)是婴幼儿秋冬腹泻的主要病原菌,常导致水电解质酸碱平衡紊乱,严重危害患儿身心健康甚至危及生命。因此,临床越来越重视腹泻患者粪便中病原的检测。 轮状病毒抗原的检测是人类轮状病毒感染的特异诊断。轮状病毒抗原的检测正常值: 轮状病毒抗原检测
小鼠脑片免疫组织化学(ABC法)实验——免疫组化法
实验方法原理通过特异的抗原抗体反应标记上可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗原或抗体成分的方法。在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察其性质定位,还可以利用细胞分光光度计、图像分析仪、共聚焦显微镜等进行细胞原位半定量测定。免疫组织化学的显著特点是特异性强。实验材料冷冻切片试剂、试剂盒一抗;二
免疫沉淀实验——抗Ig血清免疫沉淀放射性标记抗原
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS仪器、耗材离心机摇床实验步骤1. 按基本方案进行,但以下说明的操作步骤已经修改: (2a)按每毫升加入2 μl 正常血清的量对放射性标记抗原进行预澄清处理,加入适量的抗血清,于4℃放置12~18 h, 111 000 g 离心10 min,保留上清。 (4a)加入1