菌脂多糖的制备实验——超声波处理法
实验材料菌液仪器、耗材离心机摇床实验步骤1. 获得的菌液经2500转/分,20分钟离心洗涤1~2次,将沉淀配成2倍于湿菌浓度的浓菌液。2. 用超声波发生器中频(约相当于12000 cps)处理20分钟。3. 处理液经3000转/分,离心30分钟,吸取上清液即为脂多糖抗原。置4℃冰箱保存备用。......阅读全文
菌脂多糖的制备实验——超声波处理法
实验材料菌液仪器、耗材离心机摇床实验步骤1. 获得的菌液经2500转/分,20分钟离心洗涤1~2次,将沉淀配成2倍于湿菌浓度的浓菌液。2. 用超声波发生器中频(约相当于12000 cps)处理20分钟。3. 处理液经3000转/分,离心30分钟,吸取上清液即为脂多糖抗原。置4℃冰箱保存备用。
菌脂多糖的制备
实验原理热酚提取法的原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。主要设备高速离心机,水浴锅,冰箱,试管,超声仪,透析袋等。实验步骤1. 热酚提取法: 1) 细菌浓悬液用盐水经2
菌脂多糖的制备
实验方法原理 原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。实验材料 细菌浓悬液试剂、试剂盒 热酚盐水仪器、耗材 离心机培养箱透析膜实验步骤 1. 细菌浓悬液用盐水经2500
菌脂多糖的制备
实验概要脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁的组成成分,所以抗脂多糖抗体的制备可用革兰氏阴性细菌菌体抗原来制备,因此这里只介绍几种细菌脂多糖提取的方法。实验原理热酚提取法的原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也
菌脂多糖的制备
实验概要脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁的组成成分,所以抗脂多糖抗体的制备可用革兰氏阴性细菌菌体抗原来制备,因此这里只介绍几种细菌脂多糖提取的方法。实验原理热酚提取法的原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也
菌脂多糖的制备实验——煮沸法
实验材料菌液仪器、耗材离心机摇床实验步骤1. 将培养后得到的浓菌液沸水浴煮沸2小时。2. 置冰箱静置两星期以上(使菌体残渣自由下沉)。3. 3000转/分离心30分钟,取上清夜即为粗脂多糖抗原,置冰箱中保存备用。
菌脂多糖的制备实验——热酚提取法
实验方法原理原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。实验材料细菌浓悬液试剂、试剂盒热酚盐水仪器、耗材离心机培养箱透析膜实验步骤1. 细菌浓悬液用盐水经2500转/分,2
细菌脂多糖的简介
细菌脂多糖(英文名:Lipopolysaccharide, LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分,是由脂质和多糖构成的物质(糖脂质)。LPS的结构如概述图: 上面为O抗原 ,中间为核心多糖,下面为类脂A。LPS的生理作用是通过存在于宿主细胞的细胞膜表面的Toll样受体(Toll-like
脂多糖受体的相关介绍
脱落的脂多糖(LPS)通过存在于目标细胞的细胞膜中的TLR4来表现其作用。TLR家族与炎性细胞因子的表现有关,在自然免疫中起着重要作用。到目前为止,已知的存在于人体中的属于TLR家族的分子就有10种。TLR家族的细胞外结构域拥有富亮氨酸重复序列(LRR)这种结构。LRR是由从属于氨基酸一种的白氨
脂多糖的基本信息
脂多糖(Lipopolysaccharide)(英文简写LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分,是由脂质和多糖构成的物质(糖脂质)。LPS的结构如右图: 左面为O抗原 ,中间为核心多糖,右面为类脂A.脂多糖是一种内毒素(Endotoxin),当其作用于人类或动物等其他生物细胞时,就会表现出多种
关于脂多糖的基本介绍
脂多糖(Lipopolysaccharide)(英文简写LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分,是由脂质和多糖构成的物质(糖脂质)。LPS的结构如右图: 左面为O抗原 ,中间为核心多糖,右面为类脂A. 脂多糖是一种内毒素(Endotoxin),当其作用于人类或动物等其他生物细胞时,就会表
脂多糖的信号传导介绍
以TLR4为媒介的信号转导途径。 通过配体结合形成的细胞内信号转导途径就和IL-1受体是一样的,具体情况如下。首先,当LPS与TLR4结合时,其会通过衔接蛋白-髓样分化因子88(英文名:Myeloid Differentiation Protein-88、MyD88)激活丝氨酸/苏氨酸激酶这种
脂多糖的结构与性质
脂多糖: ①脂质和多糖的复合物; ②为革兰氏阴性细菌外璧层中特有的一种化学成分,分子量大于10000,结构复杂,在不同类群、甚至菌株之间都有差异。以沙门氏菌为例,其脂多糖由核心多糖、O-多糖侧链、和类脂A组成。为革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,脂多糖是内毒素和重要群特异性抗原(O抗原)。
脂多糖的结构与性质
脂多糖:①脂质和多糖的复合物;②为革兰氏阴性细菌外璧层中特有的一种化学成分,分子量大于10000,结构复杂,在不同类群、甚至菌株之间都有差异。以沙门氏菌为例,其脂多糖由核心多糖、O-多糖侧链、和类脂A组成。为革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,脂多糖是内毒素和重要群特异性抗原(O抗原)。脂多糖由三部分组
关于脂多糖的受体介绍
脱落的脂多糖(LPS)通过存在于目标细胞的细胞膜中的TLR4来表现其作用。TLR家族与炎性细胞因子的表现有关,在自然免疫中起着重要作用。到目前为止,已知的存在于人体中的属于TLR家族的分子就有10种。TLR家族的细胞外结构域拥有富亮氨酸重复序列(LRR)这种结构。LRR是由从属于氨基酸一种的白氨
脂多糖(LPS)是什么
ps是细菌脂多糖的意思,细菌脂多糖主要是一类脂多糖类物质。革兰氏阴性杆菌细胞壁最主要的成分就是细菌脂多糖,同时决定了革兰氏阴性细菌细胞表面抗原的多样性,但是有些lps是带有毒性的,感染后会产生毒性,所以对于人免疫反应有很重要的作用。有提高阳离子在细胞表面浓度的作用。也是许多噬菌体在细菌表面的吸附受体
可溶性抗原的制备及鉴定1
蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备 用于制备免疫原的材料必须是新鲜或低
细菌脂多糖的结构与性质
革兰氏阴性细菌细胞壁。脂多糖存在于覆盖全身的外膜(脂质双分子层)的细胞外侧的脂质中(图1中的上侧)。在LPS的生理活性表现中被认为起到最重要作用的是类脂A部分,类脂A可以单独体现其生理作用 [1] 。 LPS很难从细胞壁脱落,当细菌死亡等时它会通过溶解、破坏细胞来脱落。LPS具有热稳定性和化学
简述细菌脂多糖的生理作用
在自然界中,LPS除了来源于肠道细菌以外还附着在食用植物、中药中。有报告显示,通过口服、注射等自然摄取的LPS是没有毒性的,反而有助于免疫系统的成熟和调节。例如,在婴幼儿时期自然摄入LPS的话可预防成为过敏体质,通过诱导生物体内抗菌物质可防止抗生素耐药细菌的繁殖。在皮肤方面,LPS信号转导对于皮
细菌细胞壁的脂多糖
脂多糖是G-细菌细胞壁所特有的成分,位于G-细菌细胞壁外面的一层较厚(8~10nm)的类脂多糖类物质,由类脂A、核心多糖和O-特异侧链3部分组成。类脂A是由2个氨基葡萄糖组成的二糖,分别与磷酸和长链脂肪酸相连;核心多糖是由5~10种糖,主要是己糖或己糖胺组成;O-特异侧链(也称O-抗原)是由3~5个
脂多糖的基本内容介绍
脂多糖(Lipopolysaccharide)(英文简写LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分,是由脂质和多糖构成的物质(糖脂质)。LPS的结构如右图: 左面为O抗原 ,中间为核心多糖,右面为类脂A. 脂多糖是一种内毒素(Endotoxin),当其作用于人类或动物等其他生物细胞时,就会表
酵母菌RNA制备实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材 离心管离心机摇床实验步骤 1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期(OD600=1.0)。 2. 将培养液转移到50 ml,离心管,于4℃,1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清,菌体沉淀用1 ml 冰冷的水
关于脂多糖的信号传导的介绍
以TLR4为媒介的信号转导途径。 通过配体结合形成的细胞内信号转导途径就和IL-1受体是一样的,具体情况如下。首先,当LPS与TLR4结合时,其会通过衔接蛋白-髓样分化因子88(英文名:Myeloid Differentiation Protein-88、MyD88)激活丝氨酸/苏氨酸激酶这种
关于脂多糖的结构与性质介绍
一、脂多糖: ①脂质和多糖的复合物; ②为革兰氏阴性细菌外壁层中特有的一种化学成分,分子量大于10000,结构复杂,在不同类群、甚至菌株之间都有差异。以沙门氏菌为例,其脂多糖由核心多糖、O-多糖侧链、和类脂A组成。为革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,脂多糖是内毒素和重要群特异性抗原(O抗原)。
脂多糖小胶质细胞的活化机制
北五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.叶的化学成分及化合物五味子醇甲对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞激活时所分泌的促炎性因子的影响。方法用色谱法分离并通过波谱分析对化合物的结构进行鉴定;采用LPS诱导的小胶质细胞活化模型,以Griess法检测化合物对LPS激活
茶多糖的制备主要方法
1.有机溶剂沉淀法 茶多糖在有机溶剂中的溶解度较小通过有机溶剂沉淀的方法可将茶多糖与其他成分初步分离。用到的有机溶剂主要有乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。 2.季铵盐沉淀法 在酸性、中性或弱碱性条件下,一些季铵盐如溴代十六烷基三甲铵(CTAB)、十六烷基盐酸吡啶(CPC)能与茶多糖形成不溶于水的盐,以
概述岩藻多糖的制备
岩藻多糖是一种水溶性的多糖,多采用水提法、酸提法或CaCl2法从褐藻或海带中提取出来;新近报道的提取方法还有超声波提取法和超滤膜提取法等。水提法主要是利用岩藻多糖易溶于热水、不溶于乙醇等有机溶剂的特点,得到岩藻多糖粗品,Wang等将100g的叶剪切后,放到3500mL、120℃的沸水中蒸煮3h,
岩藻多糖的制备方法
岩藻多糖是一种水溶性的多糖,多采用水提法、酸提法或CaCl2法从褐藻或海带中提取出来;新近报道的提取方法还有超声波提取法和超滤膜提取法等。水提法主要是利用岩藻多糖易溶于热水、不溶于乙醇等有机溶剂的特点,得到岩藻多糖粗品,Wang等将100g的叶剪切后,放到3500mL、120℃的沸水中蒸煮3h,提取
酵母菌DNA制备实验1
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落,在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。 2. 将1.5 ml 的过夜培养物转移
酵母菌DNA制备实验2
实验材料酵母试剂、试剂盒TERNA酶乙酸铵无水乙醇仪器、耗材离心机培养箱玻璃培养管实验步骤1. 在18 mm×150 mm 无菌玻璃培养管或17 mm×100 mm 无菌聚丙烯酰胺管中用10 ml YPD培养基过夜培养酵母菌至静止期。2. 培养物室温下在台式离心机上1 200 g 离心5 min