标记抗体的应用技术——化学发光免疫分析
实验方法原理尽管辣根过氧化物酶(HRP)可以催化Luminol-H2O2反应体系产生化学发光,但由于该体系的检测灵敏度不够高,不能满足酶联免疫测定的要求。因此,为了提高体系的检测灵敏度,可将HRP催化H2O2氧化曙红(Eosin)的反应与该反应产物增强HRP催化luminol-H2O2的化学发光反应相偶合,建立偶合放大化学发光酶联免疫分析法。这里,酶的活性是基于下列发光反应进行检测的 HRPluminol+H2O2───→产物+hν 产 物 ↑ Eosin+H2O2 ────┘ ......阅读全文
标记免疫分析技术2
四、发光免疫分析:发光免疫分析:直接用发光物质标记抗原或抗体生物的发光剂:荧火虫荧光素(酶催化发光)化学的发光剂:鲁米那、吖啶脂等在有过氧化氢的弱碱溶液中即可迅速发光。美国CHIRON公司生产的ACS-180使用类均相的包被抗体的磁性微粒,扩大了反应面,加速了免疫反应,又应用吖啶脂作标记的化学发光分
标记免疫分析技术概述
一、概要 定义:应用广泛、先进的免疫分析技术,是生物活性物质分析方法的新领域;基本技术是将多种标记示踪技术和高度灵敏性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的分析技术。 特点:灵敏度高,特异性强,重复性好,准确性高,操作简便,易于自动化商品化。 发展:放射免疫分析,免疫放射分析,酶标记免疫分析,
标记免疫分析技术1
一、标记分析技术概述1959年,美国学者Yalow和Berson建立了放射免疫分析技术,这种技术以免疫反应的特异性,和放射性同位素标记的灵敏性显示了其在微量检测方面的优势,吸引着各国的生物医学工作者。标记免疫分析技术进入了一个崭新的时期。从而使免疫分析,从定性分析和半定量分析走向了定量分析。医学检测
标记免疫分析技术概述
一、概要 定义:应用广泛、先进的免疫分析技术,是生物活性物质分析方法的新领域;基本技术是将多种标记示踪技术和高度灵敏性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的分析技术。 特点:灵敏度高,特异性强,重复性好,准确性高,操作简便,易于自动化商品化。 发展:放射免疫分析,免疫放射分析,
化学发光免疫分析的分类
根据化学发光所用的标记物和发光原理的不同,一般可分为3类:直接化学发光免疫分析、酶促化学发光免疫分析和电化学发光免疫分析。不同于前两者,电化学发光由电启动电极表面的电化学发光剂发生电化学反应产生光信号,常需要共反应剂提高发光效率,如三丙胺(tripropylamine,TPA)作为三联吡啶钌([
化学发光免疫分析的特点
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的
化学发光免疫分析的类型
化学发光反应参与的免疫测定分为以下几种类型: (一)化学发光酶免疫测定 化学发光酶免疫测定(CLEIA)是采用化学发光剂作为酶反应底物的酶标记免疫测定。经过酶和发光两级放大,具有很高的灵敏度。以过氧化物酶为标记酶、以鲁米诺为发光底物、并加入发光增强剂以提高敏感度和发光稳定性。应用的标记酶也可以
化学发光免疫分析的发展
化学发光免疫分析的发展化学发光免疫分析(CLIA)以分析灵敏度高、线性范围宽、无散射光、试剂消耗低等优点被广泛应用于生命科学、临床诊断、环境监测、食品安全和药物分析等领域。当前各种新标记物、标记方法、多项技术联用及各种自动化、微型化的仪器不断被开发出来,化学发光免疫分析(CLIA)也达到了更高的水平
化学发光免疫分析的类型
化学发光是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。直接发光是最简单的化学发光反应,有两个关键步骤组成:即激发和辐射。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光
碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析结果是什么呢?
以碱性磷酸酶(ALP)标记抗体(或抗原),反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,加入AMPPD发光剂,碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。 化学发光酶免疫分析的特点: ①属酶免疫测定范畴,测定过程与ELISA相似,仅最后一步酶反应的底物改为发光剂和测定的仪器为光信号检
化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中
化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中
化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中
化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中
免疫学技术专题:非标记抗体免疫电镜技术
一、原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的
病毒免疫荧光实验_荧光素标记抗体
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光标记抗体方法有直接标记法和间接标记法两种。(1) 直接法:较为常用,具体步骤是:1) 抗体溶液的制备:用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 将待标记抗体稀释至 20mg/ml;2) 荧光素:根据待标记抗体的总量,按 0.01mg 荧光素/mg 蛋白
免疫诊断——化学发光免疫分析技术
第一节 化学发光免疫分析技术概述免疫学是生命科学和医学中一门重要的基础和前沿学科,以免疫学理论和原理为基础的免疫学检验在临床疾病的预防、诊断、治疗及预后评估中发挥重要作用。免疫学检验是依据抗原与抗体特异性反应原理,借助于各种敏感的标记、示踪(放射性核素、荧光素、酶、镧系元素、发光物质、胶体金等)技术
化学发光免疫分析技术的原理
化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激
化学发光免疫分析技术的简介
上世纪70年代中期Arakawe首先报道CLIA ,发展至今已经成为一种成熟的、先进的超微量活性物质检测技术,应用范围广泛,近10年发展迅猛,是目前发展和推广应用最快的免疫分析方法,也是目前最先进的标记免疫测定技术,灵敏度和精确度比酶免法、荧光法高几个数量级,可以完全替代放射免疫分析、彻底淘汰酶
化学发光免疫分析技术的原理
化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下
化学发光酶免疫分析的特点
①属酶免疫测定范畴,测定过程与ELISA相似,仅最后一步酶反应的底物改为发光剂和测定的仪器为光信号检测仪; ②酶标记抗原或抗体结合稳定; ③酶催化鲁米诺、AMPPD等发光剂发出的光稳定,持续时间长,便于记录和测定。
直接化学发光免疫分析的特点
①无需催化剂,只需碱性环境; ②加入H2O2和NaOH迅速反应,背景噪声低,敏感性强; ③可直接标记,反应稳定; ④瞬间发光,持续时间短。
化学发光免疫分析技术的原理
化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激
化学发光免疫分析技术的简介
上世纪70年代中期Arakawe首先报道CLIA ,发展至今已经成为一种成熟的、先进的超微量活性物质检测技术,应用范围广泛,近10年发展迅猛,是目前发展和推广应用最快的免疫分析方法,也是目前最先进的标记免疫测定技术,灵敏度和精确度比酶免法、荧光法高几个数量级,可以完全替代放射免疫分析、彻底淘汰酶
化学发光酶免疫分析的特点
化学发光酶免疫分析的特点:①属酶免疫测定范畴,测定过程与ELISA相似,仅最后一步酶反应的底物改为发光剂和测定的仪器为光信号检测仪;②酶标记抗原或抗体结合稳定;③酶催化鲁米诺、AMPPD等发光剂发出的光稳定,持续时间长,便于记录和测定。
化学发光酶免疫分析的内容
化学发光酶免疫分析(CLEIA)是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗体(或抗原),与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入底物(发光剂),酶催化和分解底物发光。(一)辣根过氧化物酶标
化学发光免疫分析技术的类型
化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为两种: (1)化学发光标记免疫分析法; (2)酶标记、以化学发光底物作信号试剂的化学发光酶免疫分析法 化学发光标记免疫分析 化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) , 是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化
化学发光免疫分析及其进展
摘要: 化学发光免疫分析是将化学发光与免疫分析方法相结合,综合了化学发光的高灵敏度和免疫分析的高选择性,被广泛应用到临床检测和药物分析中。随着新的发光试剂,新固相材料的研制以及新标记技术应用,化学发光免疫分析方法的灵敏度,重现性将大大提高。 在分析化学中,化学发光是当基态分子
化学发光免疫分析仪
化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳
化学发光免疫分析及其进展
化学发光免疫分析是将化学发光与免疫分析方法相结合,综合了化学发光的高灵敏度和免疫分析的高选择性,被广泛应用到临床检测和药物分析中。随着新的发光试剂,新固相材料的研制以及新标记技术应用,化学发光免疫分析方法的灵敏度,重现性将大大提高。 在分析化学中,化学发光是当基态分子吸收化学反应中