免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白D(IgD)的纯化

实验步骤基 本 方 案 1 用透析和凝胶过滤层析法纯化 IgM此 法 纯 化 的 IgM 可达到较好纯度,可用于酶解、异 硫 氰 酸 盐 荧 光 素(FITC) 标记 、生物素标记或放射性标记。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)腹 水 或 单 克 隆 抗 体(MAb) 上 清(单 元 1.4)PBSSorvall离心机, SS-34型 转 子(或类似转子)透析袋26 mmX900 mm 层析柱,填有适当凝 胶 过 滤(SE) 树 脂(CPI 附 录 31)1.单 元 L 5 离心和去除IgG中脂类物质的方法纯化腹水上清,若 是 M Ab上 清 ,室温或 4℃, 15 000g离心30min,去除细胞碎片,保留上清。2.将澄清的腹水或MAb上清转至透析袋中,在 4°C 下用≥1 0 倍样品体积的蒸镏水透析24 h,在室温或4°C下将透析好的溶液以 15 000〜20 OOOg 离 心 lh ,弃去上清。3.将填有 SE 树 ......阅读全文

高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(二)

  01 「 多肽分离纯化色谱填料的选择 」一个理想的多肽药物分离纯化色谱填料必须满足以下特性:(a)高选择性,高分离度;(b)柱效高,分辨率高;(c)载量大;单位体积填料处理多肽样品的能力大(d)化学性能稳定,适用pH范围宽(1-14);可在线清洗, 耐脏性强,使用寿命长;(e)机械强度大,反压低

柔嫩艾美耳球虫子孢子的DE52纯化方法

实验概要球虫子孢子广泛应用于球虫的体外研究和球虫的攻毒实验等实验中,它的纯化收集的效率直接影响着实验的进程。DE-52是一个被广泛应用的纤维柱纯化体系,其纯化效率高,子孢子获得量较大。实验步骤1. DE-52维素层析柱的制备   1) 称取DE-52纤维素2.0g,用去离子水浸泡24小时,使其溶胀,

Western-Blot的过程与优化,着重于化学发光检测(三)

四、化学发光信号4.1 信号捕捉虽然化学发光蛋白质印迹法十分常用,但是对于难于捕获的信号的捕捉却很棘手。蛋白质印迹法要用到一系列需要技巧的技术,因此许多因素都会导致无法捕捉到信号。由于变量较多 (表 33. 2),问题印迹的问题诊断和排除就如同大海捞针一样困难。传统的方案在检测某一个蛋白质时通常

新发现!山东莱阳发现恐龙蛋新蛋种,命名“变形蛋”

近日,一项恐龙蛋研究最新成果被刊发。通过对山东莱阳出土恐龙蛋化石的深入研究,古生物研究人员建立了一个新蛋种,并将其命名为“变形蛋”。研究人员从“变形蛋”的径切面观察,发现其内部发育大量的锥形蛋壳单元组合,它们之间有较大的间隙;中间发育柱状蛋壳单元和小孔;最外层发育壳单元的分支,形成灌木状微结构。研究

Western-Blot的过程与优化,着重于化学发光检测2

四、化学发光信号4.1 信号捕捉虽然化学发光蛋白质印迹法十分常用,但是对于难于捕获的信号的捕捉却很棘手。蛋白质印迹法要用到一系列需要技巧的技术,因此许多因素都会导致无法捕捉到信号。由于变量较多 (表 33. 2),问题印迹的问题诊断和排除就如同大海捞针一样困难。传统的方案在检测某一个蛋白质时通常都是

表面光滑蛋可能是陈蛋

   鸡蛋是我们均衡膳食的重要组成部分,小小的一个鸡蛋不仅提供较丰富的蛋白质、多种维生素和矿物质,还富含卵磷脂、胆碱、类胡萝卜素、高密度脂蛋白等营养物质。大家都知道越新鲜的鸡蛋营养损失越少,但是很多人认为,鸡蛋表面越光滑越有卖相越新鲜。但实际上并非如此。  新鲜鸡蛋表面会有一层霜状粉末,气孔较大,蛋

我国学者通过显微CT揭示寒武纪“古球蛋”化石生物学属性

  近日,中国科学院南京地质古生物研究所副研究员殷宗军等人在国际著名地学杂志《地质学》(Geology)上发表了关于寒武纪早期宽川铺生物群中疑难化石“古球蛋”的最新研究成果。寒武纪早期宽川铺生物群中的古球蛋(显微CT数据)  本次研究采用高分辨率显微CT技术首次重构了寒武纪早期磷酸盐化疑难化石古球蛋

测定血清总蛋白及白、球比值有何临床意义

肝脏是蛋白质代谢非常旺盛的器官,是合成血浆蛋白的主要场所,除全部血清蛋白外,还有部分γ - 球蛋白和β - 球蛋白也在肝内合成。当肝有病变时,合成蛋白质的功能出现障碍,血清蛋白减少,导致血清总蛋白降低。但由于炎症,肝细胞破坏或抗原性改变刺激免疫系统而致γ - 球蛋白增高,弥补了血清蛋白减少的部分,这

测定血清总蛋白及白、球比值有何临床意义

肝脏是蛋白质代谢非常旺盛的器官,是合成血浆蛋白的主要场所,除全部血清蛋白外,还有部分γ - 球蛋白和β - 球蛋白也在肝内合成。当肝有病变时,合成蛋白质的功能出现障碍,血清蛋白减少,导致血清总蛋白降低。但由于炎症,肝细胞破坏或抗原性改变刺激免疫系统而致γ - 球蛋白增高,弥补了血清蛋白减少的部分,这

英国农民发现“蛋中蛋”-专家称不多见

  2月22日电 据外媒报道,英国一位退休的农民近日在做摊鸡蛋时,意外发现一枚奇怪的鸡蛋:敲开这枚鸡蛋的外壳,里面还有一只弹子大的小鸡蛋,这样的“蛋中蛋”可谓不多见。  68岁的约翰・菲罗斯(John Fellows)是英国多塞特郡威茅斯(Weymouth)的一位退休农民。

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验3

三、蛋白质的硝化修饰酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸侧链的硝化与亚硝化作用构成了蛋白质硝化PT M 的主要部分。这些加成反应由发育、氧化应激及衰老过程中产生的活性氮介导。活性氮的增加是由一氧化氮和活性氧的过度反应或调控紊乱造成的(Yeo et al.,2008)。活性氮和活性氧能够靶向于DNA、脂

古脊椎所等发现最早的恐龙蛋为革质蛋

  恐龙生殖生物学特征的宏演化是备受关注但争议不断的领域。过去几十年来,一些保存状态良好的蛋窝与成体关联标本提高了古生物学家对这一领域的认知。然而,由于化石证据稀缺以及缺乏大尺度的定量分析,关于生殖特征宏演化模式的研究有限,尤其是白垩纪之前的演化历史。本研究报道了一种发现于贵州省的早侏罗世蜥脚形类恐

Western-Blot的过程与优化,着重于化学发光检测

实验步骤 一、蛋白质印迹法 蛋白质印迹 (Western Blotting) 法是在混合的复合物中鉴定和定量特定蛋白质的一种有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。这一技术对固定在硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯

Western-Blot的过程与优化,着重于化学发光检测

实验步骤一、蛋白质印迹法蛋白质印迹 (Western Blotting) 法是在混合的复合物中鉴定和定量特定蛋白质的一种有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。这一技术对固定在硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯 (PVDP) 膜上的蛋白质样本进行非直接的检测。在常规的蛋白质印迹中,蛋白

血清脂蛋X的概述

  脂蛋白-X是在阻塞性黄疸时出现的一种特殊的脂蛋白,存在于低密度脂蛋白中,其生成可能与胆汁中的磷脂反流有关。测定血清脂蛋白-X对鉴别黄疸有帮助,可了解胆汁淤积的严重程度。

脂蛋合电泳的简介

脂蛋合电泳【参考范围】β脂蛋白或LDL:0.42~0.63.前β脂蛋白或VLDL:0.03~0.18.α脂蛋白或HDL:0.23~0.46.【影响因素】无【临床意义】脂蛋白电泳的基本原理与蛋白电泳相同,各种脂蛋白在一定的pH条件下,电场中可以在琼脂糖凝胶上被分离开来。按照迁移率递增的次序,分别为:乳

疫咳的病因

  病原菌是鲍特菌属(Bordetella)中的疫咳鲍特菌(B.pertussiussis),常称疫咳杆菌。已知鲍特菌属有四种杆菌,除疫咳鲍特菌外还有副疫咳鲍特菌(B.parapertussiussis)、支气管败血鲍特菌(B.bronchiseptica)和鸟型鲍特菌(B.avium)。鸟型鲍特菌

疫咳的诊断

  诊断依据 根据当地流行情况,有无疫咳患者接触史。若患儿曾有发热,但热退后咳嗽症状反而加重,特别在晚间咳嗽剧烈,且无明显肺部阳性体征,应作为疑似诊断。若有明显痉咳,外周血计数白细胞及淋巴细胞分类均明显增高则根据这些特点可作出疫咳临床诊断。加之细菌培养阳性或血清学免疫学、PCR检查阳性可以确诊疫咳。

疫咳的介绍

  疫咳(pertussis,whooping cough)是小儿常见的急性呼吸道传染病,是由疫咳杆菌所致的急性呼吸道传染病。临床特点为阵发性痉挛性咳嗽,鸡鸣样吸气声及外周血液中淋巴细胞增多。病程较长,未经治疗可迁延2~3个月。故有“疫咳”之称。幼婴患本病时易有窒息、肺炎、脑病等并发症,病死率高。近

膜蛋白的纯化实验(一)

一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同

膜蛋白的纯化实验

实验步骤 一、膜的制备 从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。 大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能

膜蛋白的纯化实验

实验步骤一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同

大鸡蛋中有小鸡蛋专业人士:“蛋中蛋”可食用

  “蛋中蛋,刚煮好的蛋剥开里面居然有个小蛋!”前日,厦门网友“两个孩子的妈”在一个本土论坛上发帖晒自己遇到的稀罕事,引来无数网友围观。短短两天时间,该贴的阅读量将近6000。大家纷纷议论:“这难道就是传说中的基因变异?”   “两个孩子的妈”自发帖后就未出现,小记昨天和前天分别私信她,也没得到回应

人类偷蛋- 巨鸟灭绝

5万年前,澳大利亚到处都是巨鸟,其中一种鸟被称为Mihirunga或“牛顿巨鸟”,它比现代鸸鹋大6倍,重达250公斤,身高超过2米。但牛顿巨鸟在4.5万年前就消失了,研究人员一直困惑罪魁祸首到底是人类狩猎还是气候变化。现在,弗林德斯大学古动物学家Trevor Worthy说,一项对古代蛋壳(残留物)

挑战《自然》结论,中国科研团队发现最早的恐龙蛋并非“软壳蛋”

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/11/512106.shtm最早的恐龙蛋是“硬壳蛋”还是“软壳蛋”?2020年美国自然历史博物馆古生物学家马克·诺瑞尔等学者在《自然》发文称,恐龙们的共同祖先所产的蛋是“软壳蛋”。近日,中国地质大学(武汉)联合

快速色谱技术

2007年各行业对快速色谱色需求   快速色谱法(Flash chromatography)是制备液相色谱中法中的一种,通常用于有机化合物的分离。快速色谱法具有操作容易、价格便宜、分析快速的优点,在纯化有机化合物应用方面,几乎没有其它技术可以和快速色谱法相媲美。快速色谱法已成为通过纯化进行正相

助力战“疫”-滴露抗疫医基金成立

  近日,由国家卫生健康委员会、中国友好和平发展基金会联合利洁时集团旗下滴露品牌共同成立了“滴露抗疫医基金”。该基金旨在对疫情防控过程中做出突出贡献的医护人员进行专项奖励。  截止2月18日,国家卫生健康委员会已经派出3.2万余名医务人员驰援湖北武汉。在这场战“疫”中,医务人员做出了巨大的努力与牺牲

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验2

二、用 于 鉴 定 P T M 的富 集 技 术2.1 磷酸化丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的可逆磷酸化也许是研究最为深人的 PT M 。蛋白质磷酸化信号网络介导细胞对与不同的应激因子、生长因子、细胞因子以及细胞间相互作用作出响应。憐酸化还影响多种细胞进程,如增殖、凋亡 、迁移 、转录和蛋白质翻译(W

免疫球蛋白G(IgG)的纯化

抗大鼠ic链单克隆抗体交联琼脂糖凝胶亲和层析实验步骤 一般情况下,单 克 隆 抗 体(尤其是大鼠源性)不能用 蛋 白A 或 蛋 白 G 交联琼脂糖凝胶层析纯化,在此情况下,可使用抗大鼠Ig 轻链单克隆抗体交联琼脂糖凝胶层析柱来结合组织培养上清或腹水中的大鼠单克隆抗体,然后用逐步降低洗脱液p H 的方

疫咳的流行特征

  (1)流行情况:本病在全世界范围内流行,美国1932~1989年间曾发生18次流行,平均每2~3年1次,即使在广泛免疫接种的今天,这种流行循环依然存在。一般菌苗接种者超过12年后免疫力下降,有报道这类人群疫咳的发生率超过50%。由此提示免疫接种可以控制疾病发生,但不能控制疫咳杆菌在人群的循环。平