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实验步骤基 本 方 案 1 用透析和凝胶过滤层析法纯化 IgM此 法 纯 化 的 IgM 可达到较好纯度，可用于酶解、异 硫 氰 酸 盐 荧 光 素（FITC) 标记 、生物素标记或放射性标记。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)腹 水 或 单 克 隆 抗 体（MAb) 上 清（单 元 1.4)PBSSorvall离心机， SS-34型 转 子（或类似转子）透析袋26 mmX900 mm 层析柱，填有适当凝 胶 过 滤（SE) 树 脂（CPI 附 录 31)1.单 元 L 5 离心和去除IgG中脂类物质的方法纯化腹水上清，若 是 M Ab上 清 ，室温或 4℃， 15 000g离心30min，去除细胞碎片，保留上清。2.将澄清的腹水或MAb上清转至透析袋中，在 4°C 下用≥1 0 倍样品体积的蒸镏水透析24 h，在室温或4°C下将透析好的溶液以 15 000〜20 OOOg 离 心 lh ，弃去上清。3.将填有 SE 树 ......阅读全文
基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液（新鲜配置并于冰上保存）含蛋白
实验步骤基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液（新鲜配置并于冰上保存