免疫电泳实验_免疫电泳
实验材料待检抗原试剂、试剂盒抗体琼脂巴比妥缓冲液仪器、耗材电泳仪载物玻片打孔器玻璃铸型微量进样器实验步骤1. 取载物玻片(7.5ⅹ2.5厘米)加上3.5毫升1.5%琼脂凝胶,制成2毫米厚的琼脂板。2. 按图位置,在琼脂板未凝固时,放入抗血清槽铸型,注意勿使铸型全部浸入琼脂中,待凝固时再打孔。3. 加待检标本:用微量进样器往孔中加1~5微升。4. 电泳:电压9~7伏/厘米,泳动15~20小时。5. 电泳后取出抗血清槽铸型,加入抗血清,进行双扩散,一般在24小时内沉淀弧出全。6. 观察结果:或描绘、拍照或进行染色,染色后的标本便于结果分析及保存。图1 免疫电泳抗原孔和抗体槽位置示意图展开......阅读全文
免疫电泳实验_免疫电泳
实验材料待检抗原试剂、试剂盒抗体琼脂巴比妥缓冲液仪器、耗材电泳仪载物玻片打孔器玻璃铸型微量进样器实验步骤1. 取载物玻片(7.5ⅹ2.5厘米)加上3.5毫升1.5%琼脂凝胶,制成2毫米厚的琼脂板。2. 按图位置,在琼脂板未凝固时,放入抗血清槽铸型,注意勿使铸型全部浸入琼脂中,待凝固时再打孔。3.
免疫电泳实验
实验方法原理 免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用,即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳,使分离成不同的电泳区带,然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清,使进行免疫扩散沉淀反应,这样,每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠成束,不易鉴别的缺点,
免疫电泳实验
试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤 1. Tris-巴比妥缓冲液贮液2.24 g 二乙基巴比妥酸,4.43 g Tris,0.053 g 乳酸钙,0.065 g 叠氮钠,用双蒸水溶解后,在容量瓶中定容至 100 ml。2. 电极缓冲液用双蒸水稀释 4 倍。3. 1%
免疫电泳实验
实验方法原理免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用,即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳,使分离成不同的电泳区带,然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清,使进行免疫扩散沉淀反应,这样,每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠成束,不易鉴别的缺点,大
免疫电泳实验
溶液的准备 倒胶 打孔与加样 电泳 检测 试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液
对流免疫电泳实验——对流免疫电泳
对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术,其基本原理是:在琼脂板上打两排孔,左侧各孔加人待测抗原,右侧孔内放人相应抗体,抗原在阴极侧,抗体在阳极侧。通电后,带负电荷的抗原泳向阳极抗体侧,而抗体借电渗作用流向阴极抗原侧,在两者之间或抗体的另一侧形成沉淀线。实验方法原理对流免疫电泳是在琼脂扩散基础
免疫电泳实验_电泳
试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤电泳时温度可控制在 10~15℃,同前述电泳的方法一样,先在冷却板上铺一层煤油,再铺胶。电极芯与凝胶的边缘接触 5~10 mm,并保持平行,电泳时的电场强度约为 20 V/cm。
微量免疫电泳实验
实验方法原理免疫电泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学检测技术(双向扩散)结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高, 时间短等优点, 是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临床诊断方面也有
免疫电泳实验_检测
检测试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤如用考马斯亮蓝染色,先用生理盐水洗去没有反应的蛋白。为了加速染色步骤,将凝胶压干。(将凝胶放在玻璃板上,先用蒸馏水湿润。在小孔中注入双蒸水,以防止凝胶压扁时,小孔中的空气使凝胶破裂。用一张湿滤纸和 5 张干滤纸盖在上面。再在上面放
微量免疫电泳实验
实验方法原理 免疫电泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学检测技术(双向扩散)结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高, 时间短等优点, 是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临
免疫电泳(immunoelectrophoresis-)实验
免疫电泳(immunoelectrophoresis )是将电泳和琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定型方法,具有灵敏快速的优点。该实验可分为如下两个步骤:1.电泳 将待检的可溶性物质在琼脂板上进行电泳分离。由于各种可溶性蛋白分子的大小、质量与所带电荷不同,在电场的作用下,其带电分子的运动速度
单向定量免疫电泳实验
实验方法原理火箭电泳(rocketimmunoelectrophoresis)又称单向定量免疫电泳,将抗原样品放在含有专一性抗体的凝胶孔中,抗体静电荷为零不移动;而抗原分子在电场作用下移动,形成抗原-抗体复合物沉淀下来。后面的抗原继续向正极泳动遇到沉淀的抗原-抗体复合物,抗原过量使复合物沉淀溶解,与
免疫电泳实验_倒胶
试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤为使琼脂糖溶液均匀铺层和得到重复的结果,玻璃板必须水平放置。为便于在免疫电泳中从第一向到第二向的转移,最好使用琼脂糖凝胶支持膜。12 ml 琼脂糖溶液在 84 cm X 94 cm 上的凝胶厚度为 1.5 mm。倒胶后约 3 分钟凝固
单向定量免疫电泳实验
实验方法原理 火箭电泳(rocketimmunoelectrophoresis)又称单向定量免疫电泳,将抗原样品放在含有专一性抗体的凝胶孔中,抗体静电荷为零不移动;而抗原分子在电场作用下移动,形成抗原-抗体复合物沉淀下来。后面的抗原继续向正极泳动遇到沉淀的抗原-抗体复合物,抗原过量使复合物沉淀溶解,
对流免疫电泳实验
实验方法原理 对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而快速的方法。此方法能在短时间内出现结果,故可用于快速诊断,敏感性比双向扩散技术高10~15倍。实验材料 待检血清试剂、试剂盒 琼脂巴比妥缓冲液生理盐水仪器、耗材 电泳仪离心机打孔器微量进样器实验步骤 1. 琼脂板的制备根据需
单向定量免疫电泳(火箭免疫电泳)
实验原理单向定量免疫电泳又称火箭电泳(rocket immunoelectrophoresis)。在琼脂内掺入适量的抗体,在电场作用下,定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体,形成抗原—抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动,遇到琼脂内沉淀的抗原—抗体复合物,抗原量的增加造成抗原过
免疫电泳
实验概要蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。每种蛋白质都有自己的等电点。在等电点时,蛋白质所带的正负电荷相等。在pH值大于等电点的溶液中,羧基解离多,此时蛋白质带负电荷,带负电荷的蛋白质在电场中向正极移动;在pH值小于等电点的溶液中,氨基解离多,此时蛋白质带正电荷,在电场中向负极移动。
免疫电泳
实验概要本实验介绍了免疫电泳(immunoelectrophoresis,IE)实验原理及操作流程。蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。每种蛋白质都有自己的等电点。在等电点时,蛋白质所带的正负电荷相等。在pH值大于等电点的溶液中,羧基解离多,此时蛋白质带负电荷,带负电荷的蛋白质在电场中
免疫电泳
一、操作步骤1.取一块干净的玻璃板,用少量75%乙醇冲洗,晾干后置于水平台,将1%琼脂糖融化,56℃水浴中保温。2.将琼脂糖铺于玻璃板上,厚度约为1㎜。凝固后,打孔。3.在孔内加入抗原,其中一孔内加电泳指示剂。4.将凝胶板放在电泳槽中进行电泳,确定电泳时间。5.电泳后在凝胶板上沿电泳方向平行挖2㎜宽
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
免疫电泳实验_溶液的准备
免疫电泳(immunoelectrophoresis) 技术是基于抗原的电泳迁移以及与抗体的专一性免疫亲和或沉淀反应来鉴定其强度和特异性。在大部分电泳中,样品中的抗原通过含有相应抗体的 pH 8.6 的薄层琼脂糖凝胶,抗原在 pH 8.6 时通常带强负电,与在含有抗体的凝胶中电泳时发生免疫反应。本实
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
沉淀反应实验:免疫电泳(immune-electrophoresis)实验
免疫电泳实验免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离,然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散,在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物,故可用抗原成分分析;且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。1、材料(1)待检标本(抗原):正常人
免疫电泳法
免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带,然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽,将抗体加入沟槽内,使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状,以分析标本中所含组分的性质,本实验常用于抗原分析及免疫性疾病的诊
免疫电泳(Immunoelectrophoresis)
【原理】 免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带,然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽,将抗体加入沟槽内,使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状,以分析标本中所含组分的性质,本实验常用于抗原分析及
免疫电泳简介
免疫电泳(immune electrophoresis)是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定性方法。由Grabar与Williams于1953年创立。此项技术由于既有抗原抗体反应的高度特异性,又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力,是广泛应用于生物医学领域的一项免疫学基本
免疫电泳试验
免疫电泳试验 实验方法原理 免疫电泳试验是凝胶电泳与双向免疫扩散相结合的免疫化学技术。应用琼脂进行免疫电泳试验可分为以下二个步骤:1.琼脂电泳 将待检的