抗原与免疫血清的制备
实验方法原理 动物产生抗体的量,一方面可因动物的种类、年龄、营养状况及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面还与抗原的种类、注射量、注射途径、注射次数以及注射的间隔时间有关。抗原量低到一定限度时,抗体不能产生或用现有方法不能测出,但超过最高限度对抗体的产生反起抑制作用。在最低限度以上,抗体根据抗原量的增加而增加,达到最高限度时,即不再增加。每种类型的抗原,其使用量都是根据经验而得出的。本实验的抗原是细菌细胞,采用每毫升中含 9 亿个细菌,比较恰当。抗原初次注射后,经一段诱导期,血清内即可找到抗体,以后逐渐上升,抗体量一般不高,然后逐渐下降。但再次注射时,抗体量迅速上升到最高水平,而且维持时间也长。因此,制备抗体一般需要多次注射抗原,才能得到高效价的免疫血清。注射途径最常用的是静脉。实验材料 24 h 培养的大肠杆菌斜面 2 kg 左右的健康雄家兔或未孕的健康雌家兔试剂、试剂盒 硫柳汞0.5% 石炭酸生理盐水仪器、耗材 M......阅读全文
抗原与免疫血清的制备
实验方法原理 动物产生抗体的量,一方面可因动物的种类、年龄、营养状况及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面还与抗原的种类、注射量、注射途径、注射次数以及注射的间隔时间有关。抗原量低到一定限度时,抗体不能产生或用现有方法不能测出,但超过最高限度对抗体的产生反起抑制作用。在最低限度以上,抗体根据抗原量
抗原与免疫血清的制备实验
将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。
抗原与免疫血清的制备实验
将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。实
抗原和免疫血清的制备实验
实验材料 家兔试剂、试剂盒 普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪器、耗材 标准比浊管离心机实验步骤 1. 抗原的制备:标准菌株的选择:所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集,与特异血清有高度凝集者可作为菌种。2. 菌液的制备(1)原液制
抗原和免疫血清的制备实验——抗菌血清的制备
抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。实验材料家兔试剂、试剂盒普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪
抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备
实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1. 弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1:5比例混合,高压灭菌。2. 人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中,边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳剂,研磨要充分,使乳剂滴入冰水中
抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体(溶血素)制备
实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 红细胞悬液的制备(1) 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法(2) 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹
免疫血清的制备
实验方法原理 具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗体混合物(即多克隆抗体)。另外,抗体的产生具有回忆应答的规律性,现为初次免
免疫血清制备方法
免疫血清的制备可用于:(1)制备免疫标记抗体等;(2)供特异性免疫治疗用等。实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗
免疫血清的制备实验
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990) 实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化
免疫血清制备方法(二)
五、结果鉴定 以双相琼脂扩散试验测定所获免疫血清的抗体效价,并用琼指免疫电泳鉴定免疫血清中抗体的质量,应产生单一的沉淀弧线。鉴定方法的具体步骤参见有关部分。 六、材料 (一) 动物:健康成年家兔,雄性,体重2~3公斤。 (二) 器材:剪刀、镊子、注射器(2ml、50ml)附针头(9号、6号)、称量瓶
免疫血清制备方法(一)
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时
免疫血清的制备及效价测定
实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1. 制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的
免疫血清的制备及效价测定
实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1. 制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的
免疫血清的制备及效价测定
制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、
抗原制备
不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件:(1)分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位
免疫学技术:免疫血清制备方法
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时
抗原的制备方法
实验步骤一、抗原的提取 抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中
抗原的制备2
2.核酸的分离纯化 从细胞中提取核酸后,仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程,也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时,为防止核酸大分子的变性降解,必须在0~4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用,是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍,现普遍采用加入去污剂或加入E
抗原的制备方法
抗原的制备 除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。 一、抗原的提取
抗原的制备方法
实验步骤一、抗原的提取抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中,如
抗原的制备1
抗原的制备 除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。 一、抗原的提取
抗原的制备方法
实验概要除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。实验步骤一、抗原的提取
免疫诊断方法抗原与抗体的制备介绍
抗原与抗体是血清学反应的物质基础。抗原的制备与纯化是获得特异性抗体的先决条件,所得到的抗体又可反过来纯化和检测抗原。 (一)抗原的制备 抗原种类繁多,按其物理性状可分颗粒性和可溶性两类。前者指细胞性抗原(包括细菌抗原),其制备较为简便,一般用新鲜细胞以无菌生理盐水或磷酸缓冲液洗涤后配成一定浓
抗原的制备方法2
表2-1 室温下由S1提高到S2时每升加固体硫酸铵的克数 0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242 278 3
ICC用细胞抗原的制备
一、材料和试剂1、0.01M PBS(pH7.4): NaCl 8.0g; KCl 0.2g; Na2HPO4 1.44g; KH2PO4 0.24g; ddH2O至1000ml ; 高压灭菌,分装。2、0.25%胰酶:称取EDTA 0.02g NaCl 0.8g KCl 0.04g
若想提供抗原制备抗体,需要提供多少抗原?
① 如果您的抗原是合成多肽,通常需要5mg以上。对于需要做亲和纯化的项目,需要额外提供3-4mg多肽。提供的多肽要求是冻干粉。② 如果抗原是蛋白,建议您提供3-5mg浓度为1mg/ml以上的蛋白并注明蛋白保存的缓冲液和蛋白浓度。对于需要做亲和纯化的项目,需要额外提供3-4mg蛋白用于亲和纯化。 该量
免疫血清的定义
(1)抗毒素,将类毒素多次免疫动物(常用马)后,采取动物的免疫血清,经浓缩纯化后制得。主要用于治疗细菌外毒素所致疾病。常用的有白喉抗毒素、破伤风抗毒素。(2)抗菌血清,在本世纪40年代以前曾用抗肺炎、抗百日咳、抗炭疽等抗菌血清治疗有关疾病。自从磺胺类药物和抗生素大量应用后,已极少应用于临床治疗。但对
免疫血清的分类
免疫血清 immune serum亦称抗血清。含有抗体的血清制剂。种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。
皮肤试验的条件和抗原制备
首先应当制备试验用抗原,如有合格商品可直接购买。可以作为变应原的物质种类繁多,例如动物皮毛、家禽羽毛、鸽粪、昆虫、螨类、真菌、花粉、杂草、物理粉尘和各种食品等都可能成为变应原。不同抗原的制备方法不同,但一般包括以下几个步骤:①收集原料;②粉碎与匀浆;③脱脂与提取;④过滤与分离;⑤分装保存。分装保存之