火箭电泳实验

实验方法原理在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。实验材料待检血清试剂、试剂盒巴比妥缓冲液琼脂粉仪器、耗材微量进样器打孔器玻璃板电泳仪实验步骤1. 抗体琼脂板的制备:同单向扩散法,但注意稀释液应用pH8.6离子强度0.05 M 的巴比妥缓冲液。2. 打孔见下图图1 火箭电泳抗原孔位置图3. 将用缓冲液稀释的适宜浓度的参考血清及适当稀释的抗原(人血清)分别加入各孔中,每孔10或20微升,要求加量准确而不外溢。4. 把加完样的免疫琼脂板放入电泳槽中进行电泳,电压4~6伏/厘米,电泳时间1~5小时,直到大部分抗原孔前端出现顶端尖窄而完全闭合的火箭状沉淀线,关闭电源。5. 取下琼脂板,以抗原孔中心为起点,量出各火箭状沉淀线的高度。同单向琼脂扩......阅读全文

火箭免疫电泳的概念简介

火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与

火箭免疫电泳的操作步骤

1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复

火箭免疫电泳的操作步骤

1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复

火箭免疫电泳的方法简介

火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。

火箭免疫电泳基本原理

火箭免疫电泳(Rocket immunoelectrophoresis)基本原理:也称免疫扩散,抗原在含有定量抗体的琼脂糖中泳动,两者比例适宜时,在较短时间内生成锥形的沉淀峰。在一定浓度范围内,沉淀峰的高度与抗原含量成正比。

逆向火箭免疫电泳的概念

中文名称逆向火箭免疫电泳英文名称reverse rocket immunoelectrophoresis定  义火箭免疫电泳的一种变化,电泳时使抗体走过含抗原的琼脂糖凝胶,由此形成的“火箭”形沉淀带的长度与抗体的量相关。用来对一系列抗体样品进行效价测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法

火箭免疫电泳所需使用仪器和材料

(一)材料和试剂1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至500ml2、1%预复琼脂(或琼脂糖)1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。3、1.5%琼脂糖凝胶1.5g琼脂糖加50ml蒸馏水置水

关于乳糜微粒的火箭电泳法的简介

  ① 抗原稀释倍数与抗血清用量的选择,应以火箭峰清晰、校准曲线斜率适中并成直线为宜。本法同时测定apoA-Ⅰ与apoB,应调整两种抗血清用量,使二者峰高有区别,apoB峰高不小于1cm。  ② 不同种类来源的抗血清(如兔与羊),在等效价的情况下进行试验,结果会有差异。apoA-Ⅰ测定以兔抗血清为好

关于沉淀反应—火箭电泳(rocket-electrophoresis)-的简介

  火箭电泳(rocket electrophoresis) 若在单向琼脂扩散基础上,加入抗原后,将琼脂板置电场中,使抗原置于负极即向正极定向扩散,在与板中的抗体结合而形成锥形沉淀峰,形似火箭,故名火箭电泳。沉淀峰的高度与抗原浓度成正比。由于在电场作用下,促使带负电荷多的抗原泳动,故火箭电泳需时短,

火箭免疫电泳的定义和应用介绍

火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与

关于乳糜微粒的火箭电泳法注意事项

  ① 抗原稀释倍数与抗血清用量的选择,应以火箭峰清晰、校准曲线斜率适中并成直线为宜。本法同时测定apoA-Ⅰ与apoB,应调整两种抗血清用量,使二者峰高有区别,apoB峰高不小于1cm。  ② 不同种类来源的抗血清(如兔与羊),在等效价的情况下进行试验,结果会有差异。apoA-Ⅰ测定以兔抗血清为好

逆向火箭免疫电泳的定义和应用介绍

中文名称逆向火箭免疫电泳英文名称reverse rocket immunoelectrophoresis定  义火箭免疫电泳的一种变化,电泳时使抗体走过含抗原的琼脂糖凝胶,由此形成的“火箭”形沉淀带的长度与抗体的量相关。用来对一系列抗体样品进行效价测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法

免疫电泳实验_电泳

试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤电泳时温度可控制在 10~15℃,同前述电泳的方法一样,先在冷却板上铺一层煤油,再铺胶。电极芯与凝胶的边缘接触 5~10 mm,并保持平行,电泳时的电场强度约为 20 V/cm。

制备电泳实验——连续电泳

仪器、耗材聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖电泳实验步骤1. 连续洗脱电泳使用连续洗脱的聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳能制备微克到毫克级的多肽,蛋白或核酸。装置可以是各种各样的。有的是把样品直接加在固体凝胶的表面,分子经过电泳分离后,由流动的缓冲液洗脱,纯化后的分子被浓缩,并由蠕动泵和部分收集器收集。2. 连

火箭免疫电泳法测定补体C4、B因...

1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度;(3)电泳缓冲液 称

制备电泳实验

实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品通过某种电泳方法进一步分离纯化后,再用扩散洗脱或电泳洗脱收集纯样品,继而用作其他分析的需要。实验材料 凝胶切片仪器、耗材 解剖刀匀浆器实验步骤 1. 扩散洗脱扩散洗脱是用解剖刀或匀浆器将凝胶切片捣

制备电泳实验

洗脱 连续电泳 等电聚焦制备电泳             实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品

核酸电泳实验

琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶EB(德元国际Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外

免疫电泳实验_免疫电泳

实验材料待检抗原试剂、试剂盒抗体琼脂巴比妥缓冲液仪器、耗材电泳仪载物玻片打孔器玻璃铸型微量进样器实验步骤1.  取载物玻片(7.5ⅹ2.5厘米)加上3.5毫升1.5%琼脂凝胶,制成2毫米厚的琼脂板。2.  按图位置,在琼脂板未凝固时,放入抗血清槽铸型,注意勿使铸型全部浸入琼脂中,待凝固时再打孔。3.

制备电泳实验——等电聚焦制备电泳

实验方法原理等电聚焦制备电泳是一种非变性制备技术。由于等电聚焦电泳技术的特点,因而是一种理想的制备方法。试剂、试剂盒电极液两性电解质Ultrodex实验步骤一、液体介质垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成 pH

交叉电泳实验技术

(一)原理      交叉免疫电泳是把琼脂平板电泳和火箭电泳结合起来的一种方法。先将抗原样品在琼脂凝胶中进行电泳分离,然后使已分开的各抗原成分与原泳动方向呈90度角的方向泳向含抗体的琼脂凝胶中,于是该抗原样品中的各个抗原成分和它相对应的抗体依次形成若干锥形沉淀线,根据沉淀线的位置及面积(或高度)可确

凝胶电泳实验

            试剂、试剂盒 丙烯酰胺 双丙烯酰胺储存液 过硫酸铵 乙醇 上样(终止)缓冲液 甲酰胺 EDTA 溴酚蓝 二

交叉电泳实验技术

(一)原理    交叉免疫电泳是把琼脂平板电泳和火箭电泳结合起来的一种方法。先将抗原样品在琼脂凝胶中进行电泳分离,然后使已分开的各抗原成分与原泳动方向呈90度角的方向泳向含抗体的琼脂凝胶中,于是该抗原样品中的各个抗原成分和它相对应的抗体依次形成若干锥形沉淀线,根据沉淀线的位置及面积(或高度)可确定该

免疫电泳实验

溶液的准备 倒胶 打孔与加样 电泳 检测             试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液

双向电泳实验

试剂、试剂盒 尿素去污剂仪器、耗材 聚丙烯酰胺凝胶实验步骤 一、第一向1. 等电聚焦凝胶的准备双向电泳通常用聚丙烯酰胺凝胶作介质,但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非离子或两性离子去污剂。为了增加样品的可溶性,可加 0.5% CHAPS。在第一向电泳中,最重要的是用载体两性电解

脑脊液蛋白电泳实验

1、原理 与血清蛋白电泳相同,利用各种蛋白质在电场作用下迁移率不同来进行检测。由于CSF蛋白质含量较低,电泳前须进行浓缩处理。一般采用透析法浓缩,将CSF加入透析袋内,置于吸水的透析液中,CSF中的水分移至透析液内,CSF的蛋白质浓度增加后,再进行电泳分析医`学教育网搜集整理。 2、试剂与器材

免疫电泳实验

试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤 1. Tris-巴比妥缓冲液贮液2.24 g 二乙基巴比妥酸,4.43 g Tris,0.053 g 乳酸钙,0.065 g 叠氮钠,用双蒸水溶解后,在容量瓶中定容至 100 ml。2. 电极缓冲液用双蒸水稀释 4 倍。3. 1%

免疫电泳实验

实验方法原理 免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用,即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳,使分离成不同的电泳区带,然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清,使进行免疫扩散沉淀反应,这样,每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠成束,不易鉴别的缺点,

制备电泳实验——洗脱

蛋白质的分离纯化是研究其结构、特性和功能的基础,诸如一级结构、溶液构象、晶体结构、免疫功能和生物机理等研究都必须用一定量并具有活性的纯样品作为研究材料。本实验来源「蛋白质电泳实验技术」主编:郭尧君。实验方法原理严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品

凝胶电泳实验

试剂、试剂盒 丙烯酰胺 双丙烯酰胺储存液过硫酸铵乙醇上样(终止)缓冲液甲酰胺EDTA溴酚蓝二甲苯腈酶和酶缓冲液PCR 产物(放射性)凝胶培养基仪器、耗材 ZapCap 过滤器108 孔深井式梳子色谱纸上样器丙烯酸防护板胶片暗盒凝胶印迹膜盖革计数器凝胶干燥系统胶片S2 型测序仪石蜡封口膜移液管剃须刀片