病毒的血清学实验——病毒红细胞凝集试验
实验方法原理有些病毒(如流感病毒等)表面有血凝素(为糖蛋白)在一定条件下,能与鸡,豚鼠的红细胞表面的糖蛋白受体结合而发生凝集现象。利用病毒血凝试验可以检测某些病毒的存在,滴定病毒的血凝效价,便可大致估计病毒颗粒的数量(1 个血凝单位=106病毒颗粒)。若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合后,使病毒失去凝集红细胞的能力,从而抑制血凝现象的出现,此为血凝抑制现象。实验步骤1. 取一块洗净晾干的20 孔凹窝塑料板,用蜡笔做好标记。用带有橡皮吸头的吸管,于1~6 孔内各加人生理盐水0.2 ml,在第1 孔内加入已经稀释成1:5 的流感病毒尿囊液0.2 m1,混匀后吸出0.2 ml 至第2 孔,再混匀后吸0.2 ml 至第3 孔,如此稀释到第8 孔(病毒稀释度即分别为1:10~1280),自第8 孔吸出0.2 ml 弃去(弃于消毒缸中),第9 孔不加流感病毒尿囊液,作红细胞对照。2. 每孔加人1% 鸡红细胞0.2 ......阅读全文
病毒的血清学实验——病毒红细胞凝集试验
实验方法原理有些病毒(如流感病毒等)表面有血凝素(为糖蛋白)在一定条件下,能与鸡,豚鼠的红细胞表面的糖蛋白受体结合而发生凝集现象。利用病毒血凝试验可以检测某些病毒的存在,滴定病毒的血凝效价,便可大致估计病毒颗粒的数量(1 个血凝单位=106病毒颗粒)。若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合后,使病毒失
病毒的血清学实验——病毒红细胞凝集抑制试验
实验步骤1. 取干净凹窝塑料板一块,用蜡笔做好标记,用带有橡皮吸头的吸管,于第2 至第9 孔内各加人生理盐水0.2 mL;2. 于第1 ,第2 及第9 孔中各加入稀释成1:5 的流感病人发病早期血清0.2 ml (血清处理见附录),混匀后,从第2 孔吸出0.2 ml 加入第3 孔,按同法稀释至第
关于病毒血清学检测—红细胞凝集实验的简介
病毒血清学检测—红细胞凝集实验:部分病毒如流感等表面有血凝素(糖蛋白),在一定条件下,能与鸡、豚鼠红细胞表面的糖蛋白受体结合而发生凝集现象。滴定病毒的血凝效价,便可大致估计病毒颗粒的数量(1个血凝单位=106病毒颗粒)。若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合后,使病毒失去凝集红细胞的能力,从而抑制
关于病毒红细胞凝集抑制试验的简介
病毒红细胞凝集抑制试验,某些病毒(如流行性感冒病毒)在试管内遇人或动物的红细胞,即被吸附在细胞上,并使红细胞发生凝集现象,称“病毒红细胞凝集试验”。如将该病毒先与免疫血清混和,然后加入红细胞,则因病毒已和相应抗体结合,不能被红细胞吸附,乃不出现红细胞凝集现象,称“红细胞凝集抑制试验”。这种红细胞
关于病毒血清学检测—凝集实验的介绍
凝集实验:颗粒性抗原与相应抗体结合后发生凝集的血清学试验。抗原与抗体复合物在电解质作用下,经过一定时间,形成肉眼可见的凝集团块。临床常用于鉴定菌种和梅毒感染的确认。6.病毒蛋白检测 病毒侵入宿主细胞后可合成自身结构蛋白与非结构蛋白,也可与宿主细胞发生相互作用而上调或下调宿主蛋白的表达,除直接检
病毒的血清学实验—EB-病毒-VCAIgA-试验
实验方法原理用带EB 病毒衣壳抗原的类淋巴细胞作抗原靶细胞,可与病人血清中的VCA--IgA 抗体结合,形成抗原抗体复合物,再与酶标抗人IgA 抗体结合,加入底物后酶催化底物变为有色产物,使靶细胞着色,产物的量与病人血清中的抗体量直接相关,故可根据颜色反应的深浅对抗体定量分析。实验步骤取冷存的EB
病毒的血清学实验
间接免疫荧光法检测人类巨细胞病毒早期抗原(HCMV-EA)实验方法原理人类巨细胞病毒(HCMV)感染细胞后,经短期培养48~72 小时,可产生早期蛋白抗原(HCMV-EA),应用已知抗HCMV-EA 的单克隆抗体(McAb-20 K)与之结合,再加入荧光素(FITC)标记羊抗人IgG 荧光抗体,在荧
病毒的血清学实验
实验方法原理 有些病毒(如流感病毒等)表面有血凝素(为糖蛋白)在一定条件下,能与鸡,豚鼠的红细胞表面的糖蛋白受体结合而发生凝集现象。利用病毒血凝试验可以检测某些病毒的存在,滴定病毒的血凝效价,便可大致估计病毒颗粒的数量(1 个血凝单位=106病毒颗粒)。若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合后,使
关于病毒血清学检测—病毒中和实验的简介
病毒中和实验是指病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。可用来检查患病后或人工免疫后机体血清中抗体的增长情况,也可用来鉴定病毒或研究其抗原结构。病毒中和实验可以在细胞培养、鸡胚或动物上进行,一般将抗体做稀释,与一定量的病毒混合,然后检测其在细胞培养、鸡胚或动物上的感染性。
正粘病毒诊断血清学试验
必须同时检测患畜急性期和恢复期双份血清。如果抗体增高4倍以上,即可诊断为流感病毒感染。双份血清应在相同条件下的同次试验中进行,以保证结果的可靠性。 A.补体结合试验〓抗原由国家流感中心或有关生物制品所购取,或应用由感染鸡胚尿囊膜制备甲、乙、丙三型可溶性抗原。病畜血清应先灭活。接种流感灭活疫苗之后
红细胞凝集试验的凝集种类
(1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集,其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。即红细胞表面存在着对各种病毒的受体,病毒与受体结合,以红细胞为桥梁的结果而引起凝集。利用此反应可以进行病毒的定性和定量。另外,如果存在抗病毒的抗体时,则由病
病毒血清学检测实验方法
1.病毒中和实验 是指病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。可用来检查患病后或人工免疫后机体血清中抗体的增长情况,也可用来鉴定病毒或研究其抗原结构。病毒中和实验可以在细胞培养、鸡胚或动物上进行,一般将抗体做稀释,与一定量的病毒混合,然后检测其在细胞培养、鸡胚或动物上的
关于红细胞凝集试验的凝集种类介绍
(1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集,其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。即红细胞表面存在着对各种病毒的受体,病毒与受体结合,以红细胞为桥梁的结果而引起凝集。利用此反应可以进行病毒的定性和定量。另外,如果存在抗病毒的抗体时,则
红细胞凝集试验的凝集种类是什么?
(1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集,其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。即红细胞表面存在着对各种病毒的受体,病毒与受体结合,以红细胞为桥梁的结果而引起凝集。利用此反应可以进行病毒的定性和定量。另外,如果存在抗病毒的抗体时,则
红细胞凝集试验的定义
红细胞凝集指红细胞凝集的现象。有由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的红细胞凝集。
红细胞凝集试验的简介
指红细胞凝集的现象。有由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的红细胞凝集。 (1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集,其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。即红细胞表面存在着对各种病毒的受体,病毒与受体结合,以红细胞为桥梁的结果而引起凝
红细胞凝集试验的介绍
指红细胞凝集的现象。有由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的红细胞凝集。 (1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集,其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。即红细胞表面存在着对各种病毒的受体,病毒与受体结合,以红细胞为桥梁的结果而引起凝集
病毒的血清学实验—ELISA检测乙脑病毒早期特异性IgM抗体
实验方法原理将抗μ链球蛋白(豚鼠抗兔IgM 抗体)非特异地吸附在固相上,加入待检乙脑病人血清,血清中的IgM 能和抗μ链球蛋白结合。当再加入定量特异性日本乙脑病(JBEV)抗原和酶标记的相应抗体(兔抗IBEV IgG)时,病人血清抗体再与IBEV 抗原和酶标抗IBEV IgG 结合作用于酶底物,酶底
流行性乙型脑炎病毒的常规血清学试验
1.血凝抑制试验 对乙脑诊断而言,本法特异性较低,但敏感性高,简便易行。常用于病毒的初步鉴定,确定有无乙脑病毒存在。检测血清标本中的HI抗体,多采用2ME—HI法。 2.补体结合试验 补体结合抗体仅存在于lgG 中,病后出现迟,消失快,适用于诊断感染。 3.中和试验 抗体存在于lgG、 lg
红细胞凝集试验的实验内容及操作方法
(一)血球凝集(HA)试验1. 在96孔微量反应板上进行,自左至右各孔加50 uL生理盐水。2. 于左侧第1孔加50 uL病毒液(尿囊液或冻干疫苗液),混合均匀后,吸50 uL至第2孔,依次倍比稀释至第11孔,吸弃50 uL;第12孔为红细胞对照。3. 自右至左依次向各孔加入0.5%鸡红细胞悬液50
自身红细胞凝集试验原理
抗人O型红细胞的单克隆抗体能与任何种血型的红细胞结合,但不引起凝集反应,这种抗体与另一特异性抗体(或抗原)连接成检测标本中的抗原(或抗体)。该反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜红细胞,因此反应中的标本为受检者的全血。自身红细胞凝集可用于HIV抗体、HBsAg的检测。
红细胞凝集试验的基本介绍
指红细胞凝集的现象。有由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的红细胞凝集。 (1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集,其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。即红细胞表面存在着对各种病毒的受体,病毒与受体结合,以红细胞为桥梁的结果而引起凝
植物病毒的血清学方法检测
血清学方法是检测植物病毒最为常用和有效的手段之一。植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白,是一种很好的抗原, 特异性的抗体与相应的抗原结合, 使抗原失去活力, 这种结合的过程叫做免疫反应, 也叫血清反应。由于不同病毒产生的抗血清都有各自的特性, 因此可以用已知病毒的抗血清来鉴定病毒种类。目前应用最广泛
红细胞凝集试验的试验方法介绍
血凝及血凝抑制试验 有些病毒具有凝集某种(些)动物红细胞的能力,称为病毒的血凝,利用这种特性设计的试验称血球凝集(HA)试验,以此来推测被检材料中有无病毒存在,是非特异性的,但病毒的凝集红细胞的能力可被相应的特异性抗体所抑制,即血球凝集抑制(HI)试验,具有特异性。通过HA-HI试验,可用已知
关于红细胞凝集实验的介绍
血凝及血凝抑制试验 有些病毒具有凝集某种(些)动物红细胞的能力,称为病毒的血凝,利用这种特性设计的试验称血球凝集(HA)试验,以此来推测被检材料中有无病毒存在,是非特异性的,但病毒的凝集红细胞的能力可被相应的特异性抗体所抑制,即血球凝集抑制(HI)试验,具有特异性。通过HA-HI试验,可用已知
关于病毒血清学检测的基本介绍
病毒血清学检测是利用抗原与抗体的特异性反应检测病毒及其抗体的血清学技术。包括中和实验、红细胞凝集实验、补体结合实验、蛋白检测以及发光物质和荧光素标记的酶联免疫吸附试验( ELISA)等方法。近年来,免疫组化、免疫共沉淀、免疫转印等技术在临床也有了更多的运用,为病毒感染的实验室检测提供了基础。
吸附法纯化病毒实验——红细胞吸附法
实验方法原理用于某些可与红细胞吸附的病毒的浓缩,如正粘病毒和副粘病毒,由于红细胞吸附法是特异的,故可达到浓缩并纯化的目的。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液鸡红细胞悬液仪器、耗材烧杯水浴锅实验步骤用作吸附病毒的红细胞一般选择适宜动物的红细胞,常用的是鸡红细胞。基本步骤为:① 1%~3% 鸡
关于病毒血清学检测—补体结合实验的介绍
补体结合实验用免疫溶血机制做指示系统,来检测另一反应系统抗原或抗体的试验,可以用于检测动物血清中的病毒抗体,病毒抗原与抗体的相互反应可以引起补体结合,最终可导致膜溶解。在补体结合试验中,如果反应系统中存在待测的抗体(或抗原),则抗原抗体发生反应后可结合补体;再加入指示系统时,由于反应液中已没有游
间接红细胞凝集试验是什么
以红细胞作为可溶性抗原的载体并使之致敏。致敏的红细胞与特异性抗体结合而产生凝集,抗原与抗体间的特异性反应即由此而显现。常用的红细胞为绵羊或O型人红细胞。
红细胞凝集试验的制备方法介绍
1. 阿氏液(Alsever):即红细胞保养液 枸橼酸钠(5H2O) 0.80g 枸橼酸(H2O) 0.055g 葡萄糖 2.05g 氯化钠 0.42g 双蒸水 加至 100 ml 将以上试剂加热溶解于双蒸水中,调整pH至6.8,115℃灭菌10min,4℃保存备用。 2. 0.5