人肝恶性淋巴瘤裸小鼠原位和皮下移植模型的建立实验

人肝恶性淋巴瘤裸小鼠原位和皮下移植模型的建立可以:(1)探讨肝恶性淋巴瘤发病机制;(2)为实验治疗提供工具;(3)为肝脏恶性淋巴瘤病因学和发病机制提供实验研究用的肿瘤动物模型。实验方法原理采用人肝恶性淋巴瘤术中新鲜组织块分别植入裸小鼠肝实质内和肩胛间皮下, 观察原位移植和皮下移植成瘤率, 移植瘤的侵袭、转移;并进行形态学( 光镜、电镜、免疫组织化学) 、血清学[ 甲胎蛋白( AFP) 、乙型肝炎病毒表面抗原( H BsAg) 、乳酸脱氢酶( LDH) ] 检测,染色体核型和流式细胞分析。实验材料BALB C-nu nu 裸小鼠肝恶性淋巴瘤新鲜标本试剂、试剂盒RPMI-1640 培养液碘酊酒精在戊巴比妥钠CD3抗体CD7抗体CD19抗体CD20抗体CD45RO抗体CD79a 抗体仪器、耗材丝线光学显微镜套管针手术刀纱布实验步骤一、实验动物准备BALB/C-nu/ nu 裸小鼠,鼠龄4~ 6 周,体重17~ 20 g, 雌雄兼用,在......阅读全文

人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立——皮下种植法

人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立可应用于:(1)深入研究淋巴瘤发病机理;(2)评价治疗药物;(3)研究建立人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠模型的条件及肿瘤特点。实验方法原理采用SCID 小鼠皮下接种107 细胞可成功地建立人人弥漫性大B 细胞淋巴瘤(DLBCL )移植瘤模型,成瘤率70%,肿瘤的组

前列腺原位肿瘤模型的建立实验——原位种植法

前列腺原位肿瘤模型的建立可以:(1)连续活体监测前列腺癌发生、发展;(2)用于前列腺原位肿瘤生长及治疗的研究;(3)研究前列腺癌的生物学行为。实验方法原理10只BALB/C裸鼠前列腺背侧包膜内注入携带红色荧光蛋白(RFP)的前列腺癌PC-3细胞(PR7细胞)悬液20μL,第2、4、6、8周分别用非侵

如何正确地选择肿瘤动物模型?(一)

在中国,现在每天约有7710例患者死于癌症,每分钟大概6人死于癌症, 因此,癌症的研究无疑成为生物医学的重中之重,动物模型在肿瘤发生发展及药物研发上扮演着至关重要角色。那么面对不同的肿瘤模型,究竟怎样的动物模型才可以准确反映人类肿瘤发展情况呢?这就是我们本期内容,告诉大家什么样的肿瘤

如何正确地选择肿瘤动物模型?(一)

在中国,现在每天约有7710例患者死于癌症,每分钟大概6人死于癌症, 因此,癌症的研究无疑成为生物医学的重中之重,动物模型在肿瘤发生发展及药物研发上扮演着至关重要角色。那么面对不同的肿瘤模型,究竟怎样的动物模型才可以准确反映人类肿瘤发展情况呢?这就是我们本期内容,告诉大家什么样的肿瘤动物模型才是你真

皮下荷瘤实验的介绍及应用(一)

肿瘤细胞系移植模型(CDTX)因易构建、成瘤率高、周期短等优点而广泛应用,并且目前临床上常用的抗肿瘤药大多是通过该模型而被发现。本期咱们就首先为大家介绍,CDTX模型中看似最简单却深藏多种不确定因素的皮下荷瘤。皮下荷瘤定义肿瘤细胞系移植到同种或异种动物的皮下形成肿瘤块,荷瘤是将肿瘤细胞移植到小鼠体内

小鼠脑出血模型的建立

实验材料 小鼠试剂、试剂盒 戊巴比妥钠仪器、耗材 钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤 1.固定小鼠 a.用绳子将已麻醉的小鼠俯卧(背朝上)固定在鼠板上,绳子用活结,这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b.用棉花将小鼠的头微微垫高,这样方便切开皮肤。

小鼠脑出血模型的建立

实验材料小鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠仪器、耗材钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤1.固定小鼠 a.用绳子将已麻醉的小鼠俯卧(背朝上)固定在鼠板上,绳子用活结,这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b.用棉花将小鼠的头微微垫高,这样方便切开皮肤。 2.钻

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 组织块移植组将直径2 mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内,每例人肺癌新鲜标本均移植入5只裸鼠体内,成瘤者为第1代。取第1代移植瘤组织块以相同方法每例标本移植于另5只BALB/C裸鼠背部皮下组织内,成功者为第2代。重复上述传代方法得到第3代移植瘤。将人肺癌细

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 组织块移植组将直径2 mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内,每例人肺癌新鲜标本均移植入5只裸鼠体内,成瘤者为第1代。取第1代移植瘤组织块以相同方法每例标本移植于另5只BALB/C裸鼠背部皮下组织内,成功者为第2代。重复上述传代方法得到第3代移植瘤。将

肿瘤动物模型建立实验

  一、肿瘤动物模型建立的意义:   (1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效;   (2)作为抗肿瘤药物筛选模型;   (3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台;   (4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。   二、诱发性肿瘤动物模型   实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化

肿瘤动物模型建立实验

一、肿瘤动物模型建立的意义: (1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效; (2)作为抗肿瘤药物筛选模型; (3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台; (4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。 二、诱发性肿瘤动物模型 实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立实验——肺癌动物模型

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立可以:(1)疾病定性筛选;(2)抗癌药物的筛选;(3)为患者进行个体化治疗提供药物筛选的依据;(4)为研究经过各项治疗后患者肿瘤细胞发生各种突变的情况和机制奠定基础。实验方法原理组织块移植组将直径2 mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内,每

人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 采用SCID 小鼠皮下接种107 细胞可成功地建立人人弥漫性大B 细胞淋巴瘤(DLBCL )移植瘤模型,成瘤率70%,肿瘤的组织学表现类似于人DLBCL。实验材料 SPF 级SCID 小鼠试剂、试剂盒 RPMI 1640培养液青霉素谷氨酰胺链霉素CD19 APC抗体CD20 PE抗体

肿瘤动物模型的构建——结直肠癌篇

结直肠癌(colorectal cancer, CRC)属于世界上第三大最常见的恶性肿瘤。近年来,随着生活水平的提高,国内外结直肠癌的发病率保持着稳定增长的态势,严重威胁着人类的健康。因此,建立合适、可靠的结直肠癌动物模型,对于其病程机理研究和临床药物治疗都具有重大意义。首先,让我们了解一下结直

抗肿瘤药物研究及新药筛选(五)

4、磺酰罗丹明染色法 试验原理:SRB是一种蛋白质结合染料,粉红色,可溶于水。 SRB可与生物大分子中的碱性氨基酸结合。其在515 nm波长的OD读数与细胞数呈良好的线性关系。故可用作细胞数的定量。MTT法的一个缺点是OD值可随放置时间而变,而SRB法无此现象。因此更适用于进行大规模的试验。

转基因小鼠模型的建立(SOP)5

4.显微注射(1)导入DNA的制备:显微注射首先涉及导入DNA的制备,显微注射的转入基因通常为去除载体序列的线状DNA,转基因所用载体是真核表达载体,即含有在哺乳动物细胞内表达的真核启动子。所谓组织特异性的实现多是通过组织特异性启动子来实现组织特异性表达的。制备转基因小鼠,必须对待导入DNA进行分离

转基因小鼠模型的建立(SOP)1

名称:转基因小鼠模型的建立(SOP)关键词:转基因小鼠目的:在动物体研究转化基因原理:转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术,它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供

转基因小鼠模型的建立(SOP)7

4)  如果未见DNA溶液流,则轻轻摩擦持样器钝缘,渐渐的打开注射器针头。针头重新进入油内确定DNA溶液流的存在。5)  移动持卵管回到受精卵下部。通过微分驱动水压控制系统使持卵管内产生温和的负压,并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必须确保受精卵基底部与凹玻片基底部轻轻接触。注意不宜吸得过紧,否则会使

转基因小鼠模型的建立(SOP)3

(2)受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小,体重在20-25克左右,严禁用低体重以及超重母鼠,若体重较低,其体能不足以维持妊娠,可能导致受精卵的重新吸收;若体重较重,麻醉剂被吸收入脂肪组织,降低麻醉效果,可能使手术困难,而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在,所以手术时切掉脂肪组织可能导

转基因小鼠模型的建立(SOP)6

[洗卵管制作]1)  点燃酒精灯,调节火焰到最佳。捏持玻璃毛细吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋转过火。2)  当吸管开始变软,快速撤离火焰,向外急剧扯拉使吸管变长,形成口径大约200?l的吸管。注意制备过程中离开火焰的时间以及扯拉的力度,尽量保证制备吸管的一致性。3)  为吸管评分,轻柔地折断吸管,辨别

转基因小鼠模型的建立(SOP)7

10)  移卵操作完成后,撤回移卵管,去除器械,按原本位置将各器官重置于腹腔内。10)缝合切口,用小夹夹持皮肤。常用自动小夹代替缝线,这样可以避免小鼠啃嘶缝线,切口裂开。11)若进行双侧手术,则于另一侧子宫角重复上述操作。12)手术完成后,安置小鼠于清洁的笼中。麻醉状态下,小型哺乳动物无法有效维持机

转基因小鼠模型的建立(SOP)8

(1)  RNA的分离:根据实验者的需要从转基因小鼠组织或细胞中提取总RNA或mRNA。分离总RNA比较简单,且适合做基因做基因转录分析。实验操作参见第一章的第四节。(2)  Northern 印迹分析:该技术用于定性检测转基因动物组织或细胞中转基因转录的相对水平。其实验操作参见第一章的第九节。(3

转基因小鼠模型的建立(SOP)4

(6)  为保暖包裹小鼠于纱布中或将其放置于热垫内使其苏醒,处于麻醉状态下的小鼠应该严格监护直到其完全苏醒。手术后小鼠饲养2周后确定手术是否成功。(7) 实验性饲养:将1-2只母鼠与输精管切除小鼠合笼饲养,次晨进行阴道栓检查。有阴道栓的母鼠,用磷酸缓冲液处理后24小时,其输卵管潮红。卵细胞应该处于单

转基因小鼠模型的建立(SOP)2

[不足之处](1)外源基因随机整合;(2)个别原核不清晰,需进行特殊处理;(3)需大型精密仪器,费用昂贵;(4)操作周期相对较长。(二)实验器材的准备1.输精管切除术用器材:弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培

国内近期动物疾病模型文献2

(六)消化系统疾病动物模型  1.毛江森等:甲型肝类模型(猕猴),中国科学,(6):765,1981。  2.余昌安等:甲型肝炎模型(树鼩)中国医学科学院学报,(3):148,1981。  3.严瑞琪等:乙型肝炎模型(树鼩)广西医学院学报,(1):10,1984。  4.李高钰等:病毒性肝炎模型(大

人源化小鼠模型在人类疾病研究中的应用

  俞晓峰博士现任赛业模式生物副总裁、高级科学家,负责基因修饰模式动物的研发与技术服务等工作。   俞博士在遗传基因模式动物领域有超过20年研发与管理等方面的丰富经验,在干细胞相关领域及哺乳动物细胞系基因改造研究也取得了巨大成就,其研究成果多次发表在Nature Immunology、Hum Mo

人源化小鼠模型在人类疾病研究中的应用

  俞晓峰博士现任赛业模式生物副总裁、高级科学家,负责基因修饰模式动物的研发与技术服务等工作。   俞博士在遗传基因模式动物领域有超过20年研发与管理等方面的丰富经验,在干细胞相关领域及哺乳动物细胞系基因改造研究也取得了巨大成就,其研究成果多次发表在Nature Immunology、Hum Mo

替吉奥胶囊的药理毒理

  1、抗肿瘤作用 本品对吉田氏肉瘤、AH-130腹水型肝癌、佐藤氏肺癌(大鼠)、S-180肉瘤、Lewis肺癌、Colon 26(小鼠)等各种皮下移植肿瘤,以及人胃癌、大肠癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、肾脏癌皮下移植肿瘤(裸鼠)具有抑制肿瘤增殖的作用。 此外,本品对Lewis肺癌肺转移模型及L5178

替吉奥胶囊的药理作用

  1、抗肿瘤作用 本品对吉田氏肉瘤、AH-130腹水型肝癌、佐藤氏肺癌(大鼠)、S-180肉瘤、Lewis肺癌、Colon 26(小鼠)等各种皮下移植肿瘤,以及人胃癌、大肠癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、肾脏癌皮下移植肿瘤(裸鼠)具有抑制肿瘤增殖的作用。 此外,本品对Lewis肺癌肺转移模型及L5178

人源化小鼠模型在人类疾病研究中的应用(二)

中国实验动物信息网: 针对目前常用免疫缺陷小鼠模型存在的问题,有哪些改进方法与策略?俞博士:虽然相对于早期的免疫缺陷小鼠(如SCID, NOD-SCID等),免疫缺陷IL2rg小鼠已经具有支持人细胞,组织和免疫系统成功移植的能力。然而,为了进一步改善该模型在实际应用中存在的某些不足,在此类模