小麦花器官转化实验

实验材料小麦种子试剂、试剂盒壮观霉素利福平仪器、耗材温室或走入式生长箱奥绿肥塑料盆LB 培养基MS 培养基解剖镜巴龙霉素实验步骤一、材料1. 植物材料Crocus 或 Chinese Spring 小麦种子由美国农业部国家种质资源信息中心提供(http: // www . ars- grin . gov / npgs /)。Crocus 为红色硬粒加拿大春小麦种质系 [ 7 ] ,Chinese Spring 小麦常用于遗传学研究(见注 2)。 2. 生长设施(1) 一个温控温室或走入式生长箱(2) 标准化盆栽基质,如泥炭土 2 号(Fafard #2) (Knoxville Seed and Greenhouse)(3) 通用型奥绿肥 14-14-14 (Osmocote) (Hummert International)......阅读全文

小麦花器官转化实验

实验材料小麦种子                                                          试剂、试剂盒壮观霉素                                                                  利福平    

小麦花器官转化实验

实验材料小麦种子试剂、试剂盒壮观霉素利福平仪器、耗材温室或走入式生长箱奥绿肥塑料盆LB 培养基MS 培养基解剖镜巴龙霉素实验步骤一、材料1. 植物材料Crocus 或 Chinese Spring 小麦种子由美国农业部国家种质资源信息中心提供(http: // www .   ars- grin .

小麦花器官转化实验

实验材料 小麦种子试剂、试剂盒 壮观霉素利福平仪器、耗材 温室或走入式生长箱奥绿肥塑料盆LB 培养基MS 培养基解剖镜巴龙霉素实验步骤 一、材料1. 植物材料Crocus 或 Chinese Spring 小麦种子由美国农业部国家种质资源信息中心提供(http: // www .   ars-

基因枪法转化小麦实验

实验材料幼胚盾片                                                          试剂、试剂盒乙醇                                                                  漂白消毒剂    

基因枪法转化小麦实验(二)

实验材料 BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒 无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中,加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min,短暂离心 3s,然后弃上清。

基因枪法转化小麦实验(一)

实验材料 幼胚盾片试剂、试剂盒 乙醇漂白消毒剂仪器、耗材 诱导培养基实验步骤 下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小

基因枪法转化小麦实验——准备供体材料

实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒乙醇漂白消毒剂仪器、耗材诱导培养基实验步骤下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小麦亚族 Tr

花器官培养的技术方法

中文名称花器官培养英文名称flower culture定  义将植物的花序、花及其组成部分从母体植株上切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

基因枪法转化小麦实验——DNA包裹金粉颗粒

实验材料BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材离心管实验步骤1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中,加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min,短暂离心 3s,然后弃上清。重复用乙

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验

试剂、试剂盒:缓释肥                                                                  乙酰丁香酮  仪器、耗材:盆钵                                                          

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验

试剂、试剂盒缓释肥乙酰丁香酮仪器、耗材盆钵植物支撑器LB 培养基通用型试管YEP 固体培养基TSIM 培养基实验步骤一、材料1. 母体植株的生长( 1 ) 将母体植株种植于 12 , 7F ( 直径为 13 cm) 的盆钵中,每盆 4 株。( 2 ) 用 Levingtons  M2 培养土,并施用

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验(二)

5. 转基因幼苗的生长需要用到以下材料:( 1 ) Jiffy 7 泥炭颗粒(Jiffy 产品, Norway)( 2 ) 播种托盘及相应的 24 孔穴盘(可任选供应商)( 3 ) 适合播种盘大小的培养箱(可任选供应商)6. 转基因植株的生长需要用到以下材料:( 1 ) 12F(直径 12 cm)盆

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验

实验材料 农杆菌细胞试剂、试剂盒 根癌农杆菌甘油原液抗生素仪器、耗材 MG L 液体培养基实验步骤 1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中,28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜(17~20 h) 至 O

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验(一)

试剂、试剂盒 缓释肥乙酰丁香酮仪器、耗材 盆钵植物支撑器LB 培养基通用型试管YEP 固体培养基TSIM 培养基实验步骤 一、材料1. 母体植株的生长( 1 ) 将母体植株种植于 12 , 7F ( 直径为 13 cm) 的盆钵中,每盆 4 株。( 2 ) 用 Levingtons  M2 培养土,

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验

实验材料农杆菌细胞                                                          试剂、试剂盒根癌农杆菌甘油原液                                                                  抗生

器官培养实验

实验方法原理取出器官或组织,将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后,将组织放在位于气液界面的支持物上,如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养,根据需要更换培养液。试剂、试剂盒M199                                                  

器官培养实验

实验方法原理 取出器官或组织,将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后,将组织放在位于气液界面的支持物上,如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养,根据需要更换培养液。试剂、试剂盒 M199仪器、耗材 解剖器械滤膜培养皿12 孔培养板受精鸡蛋实验步骤 一、材料无菌 1. 解剖器械 2.

器官培养实验

实验方法原理取出器官或组织,将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后,将组织放在位于气液界面的支持物上,如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养,根据需要更换培养液。试剂、试剂盒M199仪器、耗材解剖器械滤膜培养皿12 孔培养板受精鸡蛋实验步骤一、材料无菌 1. 解剖器械 2. 含有或不

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验1

根癌农杆菌菌液的准备实验材料农杆菌细胞试剂、试剂盒根癌农杆菌甘油原液抗生素仪器、耗材MG L 液体培养基实验步骤1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中,28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜(17~20

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验7

转化效率的计算仪器、耗材Southern 杂交分析实验步骤1. 转化效率通常用百分比表示。计算方法为:确定的独立转基因单株总数 x100 /侵染的总幼胚数。2. 如果一个胚得到一株以上的转基因植株,这视为一个独立转化事件,来自同一转化事件的其他所有单株视为姐妹株。这些姐妹株有可能来源于不同的细胞,属

基因枪法转化小麦实验——轰击后未成熟盾片培养

实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒新霉素磷酸转移酶草胺膦乙酰转移酶基因仪器、耗材基因枪诱导培养基分化培养基实验步骤1. 诱导愈伤( 1 ) 基因枪轰击后,将盾片分散转移,每个重复分到 2~3 个含诱导培养基(MS9%  0.5 Dag) 的平皿中,大约 10 个盾片一皿(见注 48)。( 2 ) 用封口膜

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验4

胚性愈伤的诱导和再生实验材料胚仪器、耗材诱导培养基再生培养基实验步骤1. 共培养 2~3 天后,将胚转移至诱导培养基以诱导胚性愈伤(表 5.1,诱导培养基 a 适用于面包小麦,诱导培养基 b 适用于硬粒小麦)。记录下转移的胚的个数以便计算转化效率,转移时确保胚的盾片仍朝上。22~23℃ 避光培养。2

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验2

根癌农杆菌接种外植体的准备(见注 6)实验材料面包小麦硬粒小麦试剂、试剂盒乙醇仪器、耗材层流罩超净台实验步骤1. 面包小麦和硬粒小麦开花后 12~16 天剪下幼穗,将种子幼体用 70% ( V/V)的乙醇浸泡 1 min,再换用 10% 乙醇(V/V)轻轻晃动 10 min 进行表面消毒,最后用足量

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验6

转基因植株的鉴定及种子的收获实验材料再生苗仪器、耗材Magenta 盒实验步骤1. 经第二轮选择后,挑出根茎生长良好的再生苗(见注 16 ) 移栽于土壤中。首先,将各株再生苗移入 8 cm2 的盆钵里生长 1~2 周,使它们能够逐渐适应温室条件。当小苗足够大时,再取叶片提取 DNA 用于 PCR 和

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——选择

实验材料愈伤组织仪器、耗材选择培养基Magenta 培养盒实验步骤1. 将培养物转移至第一轮选择培养基中(表 5.1,选择培养基 1 ) ( 见注 15)。一些愈伤组织在转移时会自然散开,尽管这无关紧要,但放置时应将散开的愈伤块彼此靠近,以标记它们是来自同一幼胚。2. 培养 3 或 4 周后,筛选出

河南小麦苗情加快转化升级

当前,河南省小麦已进入返青拔节期。随着气温回升及田间管理措施的落实,小麦生长发育速度加快,苗情迅速转化升级,较冬前明显好转。一二类苗面积为6896万亩,占84.1%,较冬前增加14.3个百分点,接近常年同期较好水平。麦田群体合理,个体发育较好,各地苗情均衡向好发展。 开春以来,河南省各

基因枪法转化小麦实验——使用-PDS1000/He-基因枪轰击

实验材料金粉试剂、试剂盒乙醇消毒液实验步骤注意:由于基因枪通过高压使粒子加速到极高的速度,故操作基因枪时应采取适当的安全措施并且佩戴安全眼镜。在任何使用基因枪转化的实验中,必须设置对照检测分化和选择效率(见注 40) 。( 1 )  根据 PDS-1000/He (见图 4.2 ) 基因枪操作指南操

免疫器官识别实验

实验材料 胎儿胸腺胸腺组织切片人脾组织切片人淋巴结切片鸡法氏囊实验步骤一、胸腺(Thymus)胸腺位于胸腔纵隔上部,胸骨后方。胸腺在胚胎期及出生后2 岁内生长很快,体积较大;2 岁后到青春期发育仍很快;但青春期后开始萎缩,逐渐由脂肪组织所代替,它在机体免疫功能的建立上占有重要地位。骨髓内有部分淋巴细

物对牡丹花器官数量变异遗传网络调控

  花器官作为有花植物的重要繁殖系统,是物种形成与多样化的关键。在人类对植物驯化栽培和育种过程中,花器官数量决定其产量、品质及育种成败。牡丹(Paeonia suffruticosa)属于芍药科芍药属植物,其花形态多样。出于对重瓣花的偏爱,人们在漫长的驯化栽培和选择过程中对花瓣数目进行了持续选择,导

酵母转化实验_乙酸锂转化

实验材料酵母试剂、试剂盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1.  在开始实验前2天,接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中,于30℃恒温摇床,培养过夜。 2.  转化的前一天晚上,往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD培养基,然后