基因枪法转化小麦实验
实验材料幼胚盾片 试剂、试剂盒乙醇 &nbs......阅读全文
基因枪法转化小麦实验
实验材料幼胚盾片 试剂、试剂盒乙醇 漂白消毒剂
基因枪法转化小麦实验(二)
实验材料 BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒 无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中,加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min,短暂离心 3s,然后弃上清。
基因枪法转化小麦实验(一)
实验材料 幼胚盾片试剂、试剂盒 乙醇漂白消毒剂仪器、耗材 诱导培养基实验步骤 下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小
基因枪法转化小麦实验——准备供体材料
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒乙醇漂白消毒剂仪器、耗材诱导培养基实验步骤下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小麦亚族 Tr
基因枪法转化小麦实验——DNA包裹金粉颗粒
实验材料BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材离心管实验步骤1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中,加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min,短暂离心 3s,然后弃上清。重复用乙
基因枪法转化小麦实验——使用-PDS1000/He-基因枪轰击
实验材料金粉试剂、试剂盒乙醇消毒液实验步骤注意:由于基因枪通过高压使粒子加速到极高的速度,故操作基因枪时应采取适当的安全措施并且佩戴安全眼镜。在任何使用基因枪转化的实验中,必须设置对照检测分化和选择效率(见注 40) 。( 1 ) 根据 PDS-1000/He (见图 4.2 ) 基因枪操作指南操
基因枪法转化大麦实验
实验材料麦穗试剂、试剂盒植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材EP 管移液枪实验步骤1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,调到合适
基因枪法转化大麦实验
实验材料麦穗 试剂、试剂盒植物凝胶 乙醇
基因枪法转化小麦实验——轰击后未成熟盾片培养
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒新霉素磷酸转移酶草胺膦乙酰转移酶基因仪器、耗材基因枪诱导培养基分化培养基实验步骤1. 诱导愈伤( 1 ) 基因枪轰击后,将盾片分散转移,每个重复分到 2~3 个含诱导培养基(MS9% 0.5 Dag) 的平皿中,大约 10 个盾片一皿(见注 48)。( 2 ) 用封口膜
基因枪法转化大麦实验(一)
实验材料 麦穗试剂、试剂盒 植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材 EP 管移液枪实验步骤 1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,
基因枪法转化大麦实验(二)
4. 粒子轰击幼胚(1) 幼胚渗透处理轰击前,取分离 1 天后的幼胚,放在高渗培养基中处理 4 h。每皿 20~30 枚幼胚,置于培养皿中心 1.6 cm2 范围内,盾片朝上。胚可以放得紧密一些,但相互之间不要碰到。轰击之后幼胚继续高渗处理 16 h。(2) 基因枪准备① 基因枪所有组件和内部的枪体
基因枪法介绍
基因枪法,又称粒子轰击(particle bombardment),高速粒子喷射技术(High-velocity particle microprojection)或基因枪轰击技术(gene gun bombardment),是由美国Cornell大学生物化学系John.C.Sanford等于198
基因枪法的作用
基因枪法,又叫粒子轰击细胞法或微弹技术。基因枪的作用是用压缩气体(氦或氮等) 动力产生一种冷的气体冲击波进入轰击室(因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤),把粘有DNA 的细微金粉打向细胞,穿过细胞壁、细胞膜、细胞质等层层构造到达细胞核,完成基因转移。只有很少部分的细胞符合这样的要求,大多数会
什么是基因枪法?
基因枪法,又叫粒子轰击细胞法或微弹技术。基因枪的作用是用压缩气体(氦或氮等) 动力产生一种冷的气体冲击波进入轰击室(因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤),把粘有DNA 的细微金粉打向细胞,穿过细胞壁、细胞膜、细胞质等层层构造到达细胞核,完成基因转移。只有很少部分的细胞符合这样的要求,大多数会
转基因技术基因枪法简介
利用火药爆炸或高压气体加速(这一加速设备被称为基因枪),将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后通过细胞和组织培养技术,再生出植株,选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比,基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建
小麦花器官转化实验
实验材料小麦种子 试剂、试剂盒壮观霉素 利福平
小麦花器官转化实验
实验材料小麦种子试剂、试剂盒壮观霉素利福平仪器、耗材温室或走入式生长箱奥绿肥塑料盆LB 培养基MS 培养基解剖镜巴龙霉素实验步骤一、材料1. 植物材料Crocus 或 Chinese Spring 小麦种子由美国农业部国家种质资源信息中心提供(http: // www . ars- grin .
小麦花器官转化实验
实验材料 小麦种子试剂、试剂盒 壮观霉素利福平仪器、耗材 温室或走入式生长箱奥绿肥塑料盆LB 培养基MS 培养基解剖镜巴龙霉素实验步骤 一、材料1. 植物材料Crocus 或 Chinese Spring 小麦种子由美国农业部国家种质资源信息中心提供(http: // www . ars-
基因枪法可以得到永久转基因植株吗?
基因枪法注入基因后,该植物原则上一直都是转基因植物,无性繁殖的后代也一直是转基因植物,而其种子繁殖的下一代则不一定,有可能种子繁殖的下一代含有目标基因,也可能没有。
基因枪法的操作过程
基因枪法: 将直径4um的钨粉或金粉在供体DNA中浸泡,然后用基因枪将这些粒子打入细胞、组织或器官中,具有一次处理多个细胞的优点,但转化效率较低。另外这种方法也用于基因治疗和抗体制备,并已取得初步成效。
基因枪法的基本原理
这一方法是依靠一种基因枪来帮助导入外源基因。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒(金粒或钨粒),将DNA吸附在表面,以一定的速度射进植物细胞,由于小颗粒穿透力强,故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组,从而实现稳定转化的目的。它具有
基因枪法的定义和原理简介
基因枪法是一种基因导入仪技术,它把遗传物质或其他物质附着于高速微弹直接射入细胞、组织和细胞器,是目前国际上最先进的基因导入技术。气体基因枪以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,使气体基因枪枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室,因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤。气体基因枪可在广泛的
我国科学家破解小麦遗传转化中基因型依赖难题
近日,中国农业科学院作物科学研究所作物转基因及基因编辑技术与应用创新团队鉴定了一个与小麦植株再生相关的基因TaWOX5,并利用TaWOX5基因克服了小麦遗传转化中的基因型依赖难题。此外,研究团队还依托该基因建立了栽培一粒小麦、黑麦和六倍体小黑麦的遗传转化体系。相关研究结果在线发表于《自然·植物》
棉花转基因技术基因枪法花粉活体育种实例
中国农科院棉花研究所针对 20 多个棉花品种,成功建立了高效、稳定的规模化转化体系,以流水线的操作方式,建立了高效、工厂化的棉花转基因技术体系。本文援引中国农业科学院棉花研究所的发明ZL内容,以制备转 GAPDH 基因棉花的具体方法为例,以应用实例演示棉花转基因技术的具体应用案例。土壤盐渍化是一个全
河南小麦苗情加快转化升级
当前,河南省小麦已进入返青拔节期。随着气温回升及田间管理措施的落实,小麦生长发育速度加快,苗情迅速转化升级,较冬前明显好转。一二类苗面积为6896万亩,占84.1%,较冬前增加14.3个百分点,接近常年同期较好水平。麦田群体合理,个体发育较好,各地苗情均衡向好发展。 开春以来,河南省各
发现新小麦抗旱基因
利用现代分子生物学技术,如何挖掘小麦抗旱基因、揭示小麦抗旱性特异调控的分子机理及遗传网络,对于小麦抗旱遗传改良具有重要意义,也是目前小麦分子遗传育种学科的一个研究难题。据小麦遗传育种学相关专家介绍,已有研究文献表明在众多的小麦基因里,基因TaNAC071-A具有抗旱功能。西北农林科技大学植物保护学院
吸枪法检漏介绍
1.吸枪法检漏方法吸枪法检漏,又叫正压法检漏,是氦质谱检漏仪的常用检漏方法。吸枪通过细长管道与氦质谱检漏仪相连,被检件充入压力高于环境大气压力的氦气(或氦与氮混合或氦与大气混合气体),吸枪的吸嘴在被检件可疑有漏孔的表面以一定速度移动,通过漏孔漏出的气体的一部分进入吸嘴,随之进入检漏仪质谱室,得出泄
Nature公布小麦基因组
利物浦大学、加州大学戴维斯分校等9所研究机构合作对小麦基因组进行了测序,他们的研究将于十一月二十九日在Nature杂志上发表,有望帮助人们增加小麦产量,培育更适应环境变化的品种。 到2050年,世界人口预计会从七十亿增加到九十亿,在可用耕地越来越少的情况下,要满足全球对粮食持续增长的需求,
植物基因转化技术
相关知识植物基因转化技术是指将外源基因导入植物细胞或组织,获得转基因植物的技术。植物基因转化技术总体上可分为两大类:1 以生物体为介导的基因转移法;2 DNA直接导入法。前者如农杆菌介导法,植物病毒介导法;后者如基因枪法、电击法、聚乙二醇法、脂质体法及花粉管通道法。其中应用最广的是根癌农杆菌介导法。
什么叫做鸟枪法
基因测序“鸟枪法”,也俗称“霰弹法”。简单地说,它有点类似生活中玩的拼图游戏。拼图游戏是将一个完整的画面分成杂乱无章的碎块,然后重新拼装复原。而“鸟枪法”则是先将整个基因组打乱,切成随机碎片,然后测定每个小片段序列,最终利用计算机对这些切片进行排序和组装,并确定它们在基因组中的正确位置。