报告基因实验——植物提取物中LUC活性的检测
实验材料植物组织试剂、试剂盒裂解液萤光素酶分析缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、完整组织1. 液氮速冻植物组织（5~50 mg)，研磨成粉末状。2. 100~400 ul 裂解液室温重悬，组织匀浆。3. 16000 g，4℃ 离心 15 min，弃掉破碎的细胞。4. 检测提取物中的蛋白质浓度。5. 立即使用提取物，或者 -80℃ 保存。二、原生质体1. 50 g 离心 4 min，小份收集（1 x106 ) 原生质体。2. 用 2 ml 的 3M 缓冲液重悬，50 g 离心 4 min。3. 400 ul 裂解液重悬，短暂涡旋（或者通过 26G 的抽吸）。4. 16000 g，4℃ 离心 15 min，沉淀破碎的细胞。检测提取物的蛋白质浓度。三、萤光素酶的检测1. 取 20 ul 分装的组织提取液于不透明的微型板，以未转化组织的提取物作对照。2. 设置光度计程序，加入 100 ul 萤光素酶分析缓冲液，等待 2s，在 ......阅读全文
仙鹤草提取物的活性成分及功效
活性成分 含仙鹤草素、仙鹤草内酯(Agrimonolide)、鞣质(为焦性儿茶酚鞣质、没食子鞣质等(6.67%-13.71%))、甾醇、有机酸、酚性成分、皂甙。 功效 仙鹤草能收敛止血、截疟、止痢、解毒，临床用于咳血魁血，崩漏下血，疟疾，血痢，脱力劳伤，痈肿疮毒，阴痒带下。
常山提取物的活性成分及药理作用
活性成分 常山含有效成分黄常山碱，简称常山碱，主要为黄常山碱甲、乙及丙，三者为互变异构体。还含黄常山定以及4-喹唑酮、伞形花内酯等。从根及叶中分离出的退热碱和异退热碱，相应地就是黄常山碱乙和黄常山碱甲。叶含生物碱总置约0.5%，其中黄常山碱的含量比根中的多10～20倍。另含少量三甲胺。根含总生
仙鹤草提取物的来源及活性成分
来源 仙鹤草别名脱力草、瓜香草、老牛筋、狼芽草。来源为蔷薇科植物龙芽草Agrimonia pilosa Ledeb.的地上部分。 全草夏、秋季采收。芽冬、春季新株萌发前采收。植物形态多年生草本，高达1m，全株具白色长毛。根茎短，常生1或数个根芽（越冬芽）。茎直立，被疏柔毛及腺毛。羽状复叶互生，
罗汉果提取物的活性成分及应用
活性成分 果中含非糖甜味的成分，主要是三萜甙类：罗汉果甜苷（mogroside)Ⅴ及Ⅳ，苷Ⅴ的甜度是蔗糖（srcrose)的256-344倍，苷Ⅳ的甜度为蔗糖的126倍。还含大量葡萄糖（glucose)[6],果糖（fructose)占14%。又含锰、铁、镍、硒、锡、碘、钼等26种无机元素、蛋
如何检测血液中的葡萄糖激酶活性？
样本收集：从患者那里收集血液样本。 预处理：将血液样本进行预处理，以分离血清或血浆。 酶活性测定：使用生化分析仪器，如分光光度计，来测定葡萄糖激酶的活性。这通常涉及到在含有足够底物（如葡萄糖）的溶液中孵育血清或血浆样本，并在一定时间内测量产物（如葡萄糖-6-磷酸）的生成量。 结果计算：根据
基因的转移与重组体的筛选和鉴定4
（3）插入表达筛选法与插入失活相反，插入表达法是外源目的基因插入特定载体后，能激活用于筛选操作的标记基因的表达，由此进行转化子的筛选。设计载体时，在筛选标记基因前面连接一段具有抑制作用的负调控序列，插入外源DNA将使该负调控序列失活，其下游的筛选标记基因才能表达。例如质粒pTR262有一个负调控的c
美国研究植物提取物对绿叶蔬菜中致病菌的杀菌效果
据美国食品药品管理局(FDA)消息，2013年3月美国FDA网站介绍了一项利用植物提取物作为杀菌剂，对绿叶蔬菜中的致病菌进行处理的研究。 本次研究选择牛至叶(oregano)、莱檬(lime)等41种植物提取物，研究了它们对香菜、欧芹、菠菜中沙门氏菌、大肠杆菌O157、志贺氏菌的灭菌效果。
细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验
本方案介绍报道分子载体（请见图 17-5) 转染哺乳动物细胞后，测定表达的β-半乳糖苷酶活性。本方法既简单快速，又可以用可见光分光光度计进行测定。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒大
细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验
实验材料 转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒 大肠杆菌β-半乳糖苷酶Tris-Cl磷酸钠ONPGNa2CO3β-巯基乙醇MgCl2实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。100XMgCl20.1mol/L MgCl24.5mo1/L β-巯基乙醇临用前，加入适量的 14.7
细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验
本方案介绍报道分子载体（请见图 17-5) 转染哺乳动物细胞后，测定表达的β-半乳糖苷酶活性。本方法既简单快速，又可以用可见光分光光度计进行测定。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒大
细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验
实验材料 转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞 试剂、试剂盒 大肠杆菌β-半乳糖苷酶 Tris-Cl
报告基因的应用
实验概要报告基因被广泛地应用于细胞生物学中的基因表达和细胞相关内容的研究。常用的报告基因主要有GUS基因、CAT基因、hGH基因、Cato2ase基因、绿色荧光蛋白基因及萤火虫荧光素酶基因等。在这些报告基因中萤火虫荧光素酶基因因其表达产物－荧光素酶敏感性高，测定方法快速且宜于掌握，线性好，并且荧光素
双荧光素酶报告基因检测（一）
双荧光素酶实验是广大科研工作者经常会遇到的实验。双荧光素酶报告基因通常以萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）为报告基因，以海肾荧光素酶（Renilla luciferase）为内参基因。这样构建的报告系统具备很多优势，包括检测灵敏度高、动态范围广、应用灵活等。同时双荧光素酶实验也有
双荧光素酶报告基因检测（三）
双荧光素酶报告基因检测（三）萤火虫荧光素酶片段互补成像（LCI）技术是一种新兴的蛋白质相互作用研究方法，其中两个被研究的目标蛋白质分别与萤火虫荧光素酶的N端和C端相连。当这两个蛋白质发生相互作用时，荧光素酶的两个段落会接近并组合成一个活性酶。结合烟草瞬时表达系统的LCI技术，能够在植物细胞内进行实时
双荧光素酶报告基因检测（二）
双荧光素酶报告基因检测（二）双荧光素酶实验通常被用来评估miRNA是否与其潜在的靶基因发生相互作用。实验中，预测的miRNA靶标基因的3’-UTR序列被克隆到含有萤火虫荧光素酶的报告基因载体的3’-UTR位置。如果miRNA与插入到质粒中的目标序列发生结合，miRNA将通过抑制该序列的翻译来降低萤火
应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性（一）
前言报告基因对于基因表达的研究来说是非常有用的工具，它可以代替要研究的目的基因，从而帮助我们了解目的基因的信号通路和相关的疾病。荧光素酶是最常用的报告基因，使用光度计和化学发光功能的微孔板读板机我们可以很容易的检测到荧光素酶，另一方面，由于在细胞实验中其背景较低，因此具有很高的灵敏度。我们通常用萤火
植物组织中自由水含量的测定实验
实验方法原理：植物组织在与高浓度的糖液接触时，束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中；自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中，使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后，根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量，而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量，再减去自由
植物组织中自由水含量的测定实验
实验方法原理植物组织在与高浓度的糖液接触时，束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中；自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中，使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后，根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量，而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量，再减去自由水
植物组织中自由水含量的测定实验
实验方法原理 植物组织在与高浓度的糖液接触时，束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中；自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中，使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后，根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量，而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量，再减去自由
气流法检测植物呼吸速率实验
实验方法原理气流法测定植物呼吸速率的原理，是使不含CO2的稳定气流通过装有植物材料呼吸室，将植物呼吸释放出来的CO2带入CO2吸收瓶，被氢氧化钡定量吸收，生成碳酸钡白色沉淀，然后用标准草酸滴定剩余的氢氧化钡。根据实验前后二次测定草酸用量之差值，即可求出植物样品释放的CO2量，据此即可求出植物呼吸速率
气流法检测植物呼吸速率实验
实验方法原理：气流法测定植物呼吸速率的原理，是使不含CO2的稳定气流通过装有植物材料呼吸室，将植物呼吸释放出来的CO2带入CO2吸收瓶，被氢氧化钡定量吸收，生成碳酸钡白色沉淀，然后用标准草酸滴定剩余的氢氧化钡。根据实验前后二次测定草酸用量之差值，即可求出植物样品释放的CO2量，据此即可求出植物呼吸速
气流法检测植物呼吸速率实验
实验方法原理 气流法测定植物呼吸速率的原理，是使不含CO2的稳定气流通过装有植物材料呼吸室，将植物呼吸释放出来的CO2带入CO2吸收瓶，被氢氧化钡定量吸收，生成碳酸钡白色沉淀，然后用标准草酸滴定剩余的氢氧化钡。根据实验前后二次测定草酸用量之差值，即可求出植物样品释放的CO2量，据此即可求出植物呼吸速
水体中活性磷酸盐的测定方法－实验步骤
正磷酸盐常被称为活性磷，因为只有这种磷酸盐会和比色法测定磷酸盐的试验中所用的试剂直接发生反应。正磷酸盐测定 钼酸铵分光光度法在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵反应生成黄色的磷钼杂多酸，再用抗坏血酸还原成橉钼蓝，于710nm最大吸收波长处分光光度法。具体方法网上可下载。
荧光素酶基因标记肿瘤细胞的实验步骤
哺乳动物生物发光，一般是将Firefly luciferase基因（由554个氨基酸构成，约50KD）即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株，当细胞分裂、转移、分化时, 荧光素酶也会得到持续稳定的表达。将标记好的细胞接种到实验动物
嫌钙植物生理活性特征
喜钙植物、随遇植物和嫌钙植物的生理活性特征叶片生理活性喜钙植物、随遇植物和嫌钙植物叶片中可溶性蛋白质含量依次为云贵鹅耳枥、单性木兰、伞花木、油茶、青冈栎、华山松。不同植物间的可溶性蛋白含量存在着明显的差异, 可能与其内部的各种代谢水平变化的相互联系和自然环境影响有关, 因为植株所处的自然环境的变化会
植物组织ATP酶活性测定
一、原理 ATP酶（adenosinetriphosphatase）可催化ATP水解生成ADP及无机磷的反应，这一反应放出大量能量，以供生物体进行各需能生命过程。它存在于生物细胞的多个部位，比如细胞质膜上，叶绿体 类囊体膜上，对整个生命的维持有着重要的作用。在生物学研究中，常通过测定酶促反应
离体法植物体内硝酸还原酶活性的测定实验
实验方法原理硝酸还原酶（NR）催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐，产生的亚硝酸盐与对－氨基苯磺酸（或对－氨基苯磺胺）及α－萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下：生成的红色偶氮化合物在520nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。
离体法植物体内硝酸还原酶活性的测定实验
实验方法原理硝酸还原酶（NR）催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐，产生的亚硝酸盐与对－氨基苯磺酸（或对－氨基苯磺胺）及α－萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下： 生成的红色偶氮化合物在520nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示
离体法植物体内硝酸还原酶活性的测定实验
实验方法原理 硝酸还原酶（NR）催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐，产生的亚硝酸盐与对－氨基苯磺酸（或对－氨基苯磺胺）及α－萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下：生成的红色偶氮化合物在520nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示
酿酒酵母培养基制备实验—检测酵母中β半乳糖苷酶活性
试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材磁力搅拌器锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的螺旋盖瓶或锥形瓶中将下面的成分溶于水中，置于搅拌器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g，葡萄糖 12.0 g，SC-Ura 或 SC-Tr