报告基因实验——植物提取物中LUC活性的检测
实验材料植物组织试剂、试剂盒裂解液萤光素酶分析缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、完整组织1. 液氮速冻植物组织（5~50 mg)，研磨成粉末状。2. 100~400 ul 裂解液室温重悬，组织匀浆。3. 16000 g，4℃ 离心 15 min，弃掉破碎的细胞。4. 检测提取物中的蛋白质浓度。5. 立即使用提取物，或者 -80℃ 保存。二、原生质体1. 50 g 离心 4 min，小份收集（1 x106 ) 原生质体。2. 用 2 ml 的 3M 缓冲液重悬，50 g 离心 4 min。3. 400 ul 裂解液重悬，短暂涡旋（或者通过 26G 的抽吸）。4. 16000 g，4℃ 离心 15 min，沉淀破碎的细胞。检测提取物的蛋白质浓度。三、萤光素酶的检测1. 取 20 ul 分装的组织提取液于不透明的微型板，以未转化组织的提取物作对照。2. 设置光度计程序，加入 100 ul 萤光素酶分析缓冲液，等待 2s，在 ......阅读全文
GUS报告基因的定性和定量检测
一、GUS报告基因的定性检测 GUS能与显色底物X-gluc 反应，显现蓝色，因而可以通过组织化学染色定性研究GUS的表达水平和表达模式。GUS 染色的稳定性好，组织定位精确，成为在植物中运用很广的报道基因。 1. GUS染色底物的配制 试剂名称 母液
酶标仪在植物领域的三种应用总结
一、简介 在基于哺乳动物细胞的研究中，酶标仪主要应用于: (1) 常规分子检测，如核酸、蛋白浓度及酶活性分析等；(2) 信号转导研究， 如一些细胞信号事件如 ROS，修饰的检测；(3) 整体细胞水平的分析，如细胞的活力、凋亡和杀伤等。然而在植物领域中，酶标 仪的应用则偏向前
酶标仪在植物领域的三种应用总结
一、简介 在基于哺乳动物细胞的研究中，酶标仪主要应用于: (1) 常规分子检测，如核酸、蛋白浓度及酶活性分析等；(2) 信号转导研究， 如一些细胞信号事件如 ROS，修饰的检测；(3) 整体细胞水平的分析，如细胞的活力、凋亡和杀伤等。然而在植物领域中，酶标 仪的应用则偏向前两个方向，此外
天麻提取物的活性成分及含量测定
活性成分 化学成分含天麻甙(天麻素,gastrodin)、天麻甙元、天麻醚甙(gastrodioside)、 派立辛(parishin)、香草醇、β2甾醇、对羟基苯甲醛、柠檬酸、琥珀酸等。 含量测定 照高效液相色谱法测定。 色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－
细胞凋亡中Caspase3活性的检测
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组
细胞凋亡中Caspase3活性的检测
细胞凋亡中Caspase-3活性的检测主要应用于（1）酶的活力测定（2）细胞凋亡指标检测。实验方法原理Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，
细胞凋亡中Caspase3活性的检测
实验方法原理 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活
植物提取物控制细菌“交谈”
这项工作发表在3月4日出版的《Nature Communications》，一群工程大肠杆菌在化学信号的引导下能够彼此沟通或停止沟通。 这项工作由Jacobs工程学院生物工程教授Jeff Hasty教授领导。 传统的合成生物使用原生细菌通讯系统（名为群体感应，quorum sensing）来
银耳提取物抗抑郁活性研究（二）
1.4.4蔗糖水消耗实验给药结束后，大鼠适应性的饮用1%的蔗糖溶液3d后饮用正常饮用水1 d,测试前2h，单笼饲养大鼠，正常摄食，分别为大鼠供应1%蔗糖溶液和自来水，此过程需要保持各试验组蔗糖水的位置均衡。1h后，测定液体饮用量。蔗糖水偏爱度1%蔗糖水的消耗量占总消耗量的百分比。1.4.5悬尾实
银耳提取物抗抑郁活性研究（一）
摘要:目的研究银耳提取物对大鼠抗抑郁活性的影响·方法采用雄性Wistar大鼠(体重180 - 220 g)建立慢性应激抑郁症大鼠模型，建模成功大鼠随机分为4组，分别为模型组(生理盐水2.0 ml/kg)，银耳提取物低剂量组((0. 5 g / kg) ,银耳提取物中剂量组(1.0 g/kg)
报告基因实验——花青素表达的定量
实验材料植物组织试剂、试剂盒酸性乙醇或甲醇花青素-3-O-葡萄糖苷仪器、耗材滤膜实验步骤1. 瞬时表达研究植物组织经基因枪转化培养大约 12 h 后，转化细胞开始表现出深红色或者偶尔为深蓝色的斑点。颜色常常会向整个液泡扩散，从外表上看整个细胞都是红色的。在几天时间里，颜色将会增强，并且能在 1~2
细胞凋亡检测实验——Caspase3活性检测法
实验方法原理Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（
分子植物卓越中心揭示抗铝毒转录因子调控机制
10月21日，中国科学院分子植物科学卓越创新中心上海植物逆境生物学研究中心研究员黄朝锋研究组在Plant Cell上在线发表题为Regulation of Aluminum-Resistance in Arabidopsis Involves the SUMOylation of the Zin
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理 各种液体对植物叶片的湿润力不同，湿润力愈强的液体，就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料 植物叶片试剂、试剂盒 搪瓷盘秒表试剂瓶仪器、耗材 液体石蜡无水乙醇苯二甲苯实验步骤 1. 在室外取自然生长的叶片，于叶背中脉任意一侧依次滴上一滴液体
固定法植物气孔检测实验
实验方法原理无水乙醇能使植物细胞迅速脱水、死亡，因而细胞壁硬化，细胞形状固定，气孔也得以保特原样，有利以后镜检研究，植物材料还可以长期保存。实验材料植物叶片 试剂、试剂盒无水乙醇
印迹法植物气孔检测实验
实验方法原理 把有机溶胶涂在植物的表面，胶体风干后就凝成薄膜，这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹，从而显示出气孔的开闭情况，此法除用来观测气孔外，还可用于观测表皮组织上的细胞，茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料 植物叶片试剂、试剂盒 脱脂棉牛皮胶甲苯石蜡仪器、耗材 显微镜目镜测微尺载玻片盖玻片
固定法植物气孔检测实验
实验方法原理无水乙醇能使植物细胞迅速脱水、死亡，因而细胞壁硬化，细胞形状固定，气孔也得以保特原样，有利以后镜检研究，植物材料还可以长期保存。实验材料植物叶片试剂、试剂盒无水乙醇仪器、耗材显微镜载玻片盖玻片镊子解剖刀实验步骤1. 用镊子撕剥下叶子的表皮（可先用解剖刀切一小口以利撕取），迅速地（愈快愈好
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理各种液体对植物叶片的湿润力不同，湿润力愈强的液体，就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料植物叶片试剂、试剂盒搪瓷盘秒表试剂瓶仪器、耗材液体石蜡无水乙醇苯二甲苯实验步骤1. 在室外取自然生长的叶片，于叶背中脉任意一侧依次滴上一滴液体石醋、无水
固定法植物气孔检测实验
实验方法原理 无水乙醇能使植物细胞迅速脱水、死亡，因而细胞壁硬化，细胞形状固定，气孔也得以保特原样，有利以后镜检研究，植物材料还可以长期保存。实验材料 植物叶片试剂、试剂盒 无水乙醇仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片镊子解剖刀实验步骤 1. 用镊子撕剥下叶子的表皮（可先用解剖刀切一小口以利撕取），迅速地
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理各种液体对植物叶片的湿润力不同，湿润力愈强的液体，就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料植物叶片 试剂、试剂盒搪瓷盘
印迹法植物气孔检测实验
实验方法原理把有机溶胶涂在植物的表面，胶体风干后就凝成薄膜，这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹，从而显示出气孔的开闭情况，此法除用来观测气孔外，还可用于观测表皮组织上的细胞，茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料植物叶片试剂、试剂盒脱脂棉牛皮胶甲苯石蜡仪器、耗材显微镜目镜测微尺载玻片盖玻片磨口玻璃
印迹法植物气孔检测实验
实验方法原理把有机溶胶涂在植物的表面，胶体风干后就凝成薄膜，这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹，从而显示出气孔的开闭情况，此法除用来观测气孔外，还可用于观测表皮组织上的细胞，茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料植物叶片
D荧光素钾盐使用方法及常见问题解答
D-荧光素钾盐是荧光素酶的水溶性底物，存在于多种发光生物体中。在ATP和荧光素酶的催化作用下，D-荧光素钾被氧化，产生蓝绿色的光(560nm)，当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关。编码荧光素酶的Luc基因是植物、细菌、哺乳动物细胞的常用报告基因。由于没有背景干扰，因此可以很容易地检
荧光素酶报告基因检测的操作步骤
荧光素酶检测系统，可用裂解液来温和而快速地提取真核细胞中的荧光素酶，用其底物来检测荧光素酶活性。检测步骤如下：1. 加裂解缓冲液裂解转染的细胞。2. 将上述裂解物转移入微孔板或者试管中（根据检测的需要选择所用器材类型）。3. 加入含有所有酶反应成分（必须包括底物荧光素），使化学发光反应开始。4. 使
植物体内抗坏血酸氧化酶活性的测定实验
实验方法原理抗坏血酸氧化酶在有氧情况下，能氧化抗坏血酸成脱氢抗坏血酸，同时促进其氢与空气中的氧结合成水。抗坏血酸氧化酶的测定是在该酶的最适pH及适宜的温度下，向反应瓶中加入一定量的底物（抗坏血酸）及酶提取液，让酶作用一段时间，然后测定底物被消耗的数量来计算酶的活性。抗坏血酸被消耗的量，可用碘液滴定剩
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在有氧的条件下，能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度，即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下：. 实验材料马铃薯块茎
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在有氧的条件下，能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度，即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下：.实验材料 马铃薯块茎试剂、试剂盒 聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材 UV－1206
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在有氧的条件下，能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度，即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下：.实验材料马铃薯块茎试剂、试剂盒聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材UV－1206UV－1
植物体内抗坏血酸氧化酶活性的测定实验
实验方法原理 抗坏血酸氧化酶在有氧情况下，能氧化抗坏血酸成脱氢抗坏血酸，同时促进其氢与空气中的氧结合成水。抗坏血酸氧化酶的测定是在该酶的最适pH及适宜的温度下，向反应瓶中加入一定量的底物（抗坏血酸）及酶提取液，让酶作用一段时间，然后测定底物被消耗的数量来计算酶的活性。抗坏血酸被消耗的量，可用碘液滴定
植物体内抗坏血酸氧化酶活性的测定实验
实验方法原理抗坏血酸氧化酶在有氧情况下，能氧化抗坏血酸成脱氢抗坏血酸，同时促进其氢与空气中的氧结合成水。抗坏血酸氧化酶的测定是在该酶的最适pH及适宜的温度下，向反应瓶中加入一定量的底物（抗坏血酸）及酶提取液，让酶作用一段时间，然后测定底物被消耗的数量来计算酶的活性。抗坏血酸被消耗的量，可用碘液滴定剩