单亲二倍体的分子检测实验

实验材料样品 DNA试剂、试剂盒引物dNTP 混合物反应缓冲液Taq DNA 聚合酶丙烯酰胺甲叉丙烯酰胺TBE过硫酸铵仪器、耗材热循环仪PCR 管电泳装置实验步骤一、PCR 反应实验程序1.准备 PCR 反应混合物:根据 DNA 样本的数量来确定除了 DNA 外其他混合物的体积(额外增加一份来确保有足够的 PCR 反应混合物),将扩增每一个遗传标记并且在每一个 PCR 反应管内分 19.5uL 的反应混合物。2.在每个管子中加 0.5, 的 DNA 样本。3.如果不用带有加热盖的 PCR 仪,那么就需要在每个管子的顶部加入矿物油来防止液体蒸发。4.把管子放在 PCR 仪中,95℃加热 3 min 变性 DNA。5.95℃ 变性 40s、55℃ 引物退火 40s、72℃ 延伸 40s,循环 30-35 次。6.72℃ 终末延伸 7 min。7.把 PCR 产物和尿素上样缓冲液 1:1 混合.二、将 PCR 产物行测序胶(6% 胶,......阅读全文

分子克隆蛋白表达实验指南(十四)

RbCl制备感受态细胞  需准备的灭菌器具和培养液:  SOB,Buffer 1,Buffer 2,3×200ml广口瓶,1.5ml   EP管,1×500ml离心瓶(按200ml摇菌量计算),2×50ml离心管,2×移液管(用于加Buffer 1),液氮,冰  离心管,EP管,移液管使用前均需要放

分子克隆蛋白表达实验指南(十六)

Amp(50mg/ml)        溶解1g Amp于足量的水中,最后定容至20ml。分装成小份于-20℃贮存。常以20~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基,1:1000比例稀释             Kan(50mg/ml)        溶解1g Kan于足量的水中,最后定容至20ml

分子克隆蛋白表达实验指南(十七)

Buffers for His purification in denatured conditions:      配制时加终体积50%的水,之后定容至所需体积。先配pH 8.0的buffer(调pH需要较多NaOH),再统一配bufferC,D,E,分别调pH   Buffer B (200ml

分子克隆蛋白表达实验指南(八)

15. 小量蛋白诱导表达      该步骤的目的是检测蛋白是否在上清存在表达。低温时蛋白易于表达于上清,因此小量蛋白诱导表达以20或30C为培养温度。  1. 挑一单克隆的菌落于5ml含有相应的抗生素的LB培养液中,37℃振荡培养过夜(8-16h)。  2.   过夜培养液加入三瓶50ml含

分子克隆蛋白表达实验指南(十九)

Desired  pH  Volume of 1M K2HPO4 (mL)Volume of 1M KH2PO4 (mL)              5.8  8.591.5              6.0  13.286.8              6.2  19.280.8         

分子克隆蛋白表达实验指南(七)

目的基因表达      14.快速诱导表达  快速诱导目的是为检测该重组质粒在BL21中是否能被诱导表达重组蛋白,并确定在不同IPTG浓度蛋白诱导效率的差异。  5.  挑单克隆菌落于7ml含有相应抗生素LB培养液的50ml培养管中,37C振荡培养过夜(8-16h)。  6.  37C,1mM  

重庆市建成西南地区权威的“高分子材料检测实验室”

  近日,重庆市科学技术研究院与国际公认的全球行业基准代表——通标标准技术服务有限公司(SGS)合作,建成西南地区最权威的“高分子材料检测实验室”,大幅提升西南地区高分子材料领域检测能力,旨在帮助高新企业节约成本,提高生产效率,取得良好的社会经济效益。仅全市IT行业、装备制造业就有50余家高新技术企

裕兴股份高分子材料检测中心获得CNAS实验室认可证书

  裕兴股份(300305)周五午间发布公告称,公司于近日收到中国合格评定国家认可委员会(简称“CNAS”)授予的实验室认可证书。获得机构名称为江苏裕兴薄膜科技股份有限公司高分子材料检测中心,注册号CNAS L9711,签发日期为2017年2月20日,有效期至2023年2月19日。  公司表示,公司

父子关系的分子分析实验——PCR-分析多态位点实验

实验材料待检个体的全血样本试剂、试剂盒细胞休克溶液核裂解缓冲液SDS蛋白酶 K饱和NaCl溶液乙醇TE 缓冲液微型琼脂糖凝胶标准 DNA 浓度溶液溴化乙锭仪器、耗材Vacutainer 管孵育仪实验步骤尽管基于 Southern 的 RFLP 检测是一种很有效的、近乎艺术级的确定生物学关系的手段,但

染色体制备仪

  培养细胞的染色体核型分析技术在产前诊断,肿瘤预后,不孕不育查因,科学研究等方面应用广泛,也是细胞遗传的一项基本检测技术。  通过体外培养获得大量的分裂细胞之后,加入秋水仙素,使分裂中的细胞停止于分裂中期,再经过染色体制备,将染色体的条带染色显示出来,显微镜下计数细胞核型、染色体数目及条带,分析后

ELISA检测筛选到的靶分子结合肽

【材料和试剂】 (1)酶标板,酶标仪 (2)湿盒 (3)吸水纸 (4)LB培养基 (5)PEG/NaCl (6)T (7)0.1M NaHCO3(pH 8.6) (8)HRP底物缓冲液 ABTS贮存液:在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液(pH 4.0)中溶解22

幽门螺杆菌抗生素耐药基因的分子检测及分子对接分析

Abstract  摘要Aim: To explore the mutation characteristics of H. pylori resistance-related genes to antibiotics of clarithromycin (CAM), levofloxaci

最灵敏单分子检测方法面世

美国威斯康星大学麦迪逊分校研究团队开发出迄今最灵敏的单分子检测和分析方法。利用他们开发的光学微谐振器(微腔)装置,科学家不用借助即可观察单个分子,有助更好地了解物质组成部分如何相互作用,从而促进药物发现和先进材料开发。相关论文发表于新一期《自然》杂志。这项研究的核心是一个纤维微腔。图片来源:威斯康星

RNA干涉实验——体外转录合成siRNA分子实验

实验方法原理采用噬菌体 RNA 聚合酶(T7、T3 或 SP6 RNA 聚合酶)可以很方便地在体外合成 siRNA 分子的正义与反义 RNA 链,然后再通过退火形成双链的 siRNA 分子。体外转录合成 siRNA 分子与化学合成双链 RNA 分子相比,其成本相对要低得多,而且有研究报道前者对靶基因

筛选到的靶分子结合肽的ELISA检测

实验概要本实验对筛选到的靶分子结合肽进行了ELISA检测。主要试剂1. LB培养基2. PEG/NaCl3. TBS4. 0.1M NaHCO3(pH8.6)5. HRP底物缓冲液6. ABTS贮存液:在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液(pH4.0)中溶解22mgABTS,过滤除菌贮存在4℃。主要

DNA的化学检测项目介绍核酸的分子杂交

核酸的分子杂交介绍:  核酸的分子杂交是定性或定量检测特异RNA或DNA序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的碱基互补原则而发展起来的。在碱性环境中加热或加入变性剂等条件下,双链DNA之间的氢键被破坏(变性),双链解开成两条单链。这时加入异源的DNA或RNA(单链)并在一定离子强度和温度下保温(复性

筛选到的靶分子结合肽的ELISA检测

实验概要本实验对筛选到的靶分子结合肽进行了ELISA检测。主要试剂1. LB培养基2. PEG/NaCl3. TBS4. 0.1M NaHCO3(pH8.6)5. HRP底物缓冲液6. ABTS贮存液:在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液(pH4.0)中溶解22mgABTS,过滤除菌贮存在4℃。主要

杂交探针的检测实验

1.  将载玻片以胶带固定于硬纸板或废胶片上。2.  将Du Pont Cronex 成像胶片(MRF 34 Clear) 轻压在玻片上4℃曝光。3.  当用这种胶片时,应注意以胶片的胶乳面正对样品。

TUNEL检测的实验原理

细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfera

杂交探针的检测实验

实验步骤 1.  暗室中,以42~45℃水浴,温育盛有4盎司(113.3 g)Kodak NTB-2放射自显影胶乳瓶30 min。同时,在500 ml 三角瓶中预热等体积的水至相同温度。 2.  胶乳熔化后,缓慢沿三角瓶壁(以一角度)倒入瓶中

TUNEL检测的实验目的

基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNE

支原体的检测实验

相差显微镜检测法 低涨处理地衣红染色观察法 荧光染色法 电镜检测法 培养检测法             实验材料 细胞

血液实验检测的记录

每单位血液 实际完成检测的许多方面书面记录是必须的,包括:1.完成的各项检测;2.试剂的来源,批号及所用的方法;3.得出的结果;4.质量控制和质控样本检测结果;5.已检测血的用途:即是用于输血还是报废;6.设备的校验及保养记录。对于献血者的个人记录,在任何时候都必须严格保密。献血者的姓名不应出现在采

蛋白产物的检测实验

一、组织蛋白的裂解提取:1.分别取-70℃保存的各组动物的样品(半个脑、0.5g肌肉),放入小离心管中,在冰浴上以PBS充分洗涤2次,除去残留血液。2.用无菌手术剪和镊子将大鼠肌肉剪碎(脑样品不用剪碎),放入另一小离心管中,于0℃以PBS充分洗涤,4℃,3000 rpm离心5分钟。3.吸出上清夜,尽

支原体的检测实验_电镜检测法

实验方法原理在用一般方法难以确定时,可做电镜检测。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  细胞培养 48~72 小时。2.  接近汇合前,用0.05%~0.25%胰蛋白酶消化细胞5~10 分钟。3.  用吸管轻轻吹打,制备成细胞悬液。

支原体的检测实验_培养检测法

实验方法原理这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。实验材料肉汤血清试剂、试剂盒细胞悬液仪器、耗材培养基实验步骤1.  肉汤制备用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加10%马血清;2.  培养每45 ml肉汤培养基加2.5×106 /ml细胞悬液5 ml

大分子物质的水解实验——淀粉水解试验

实验方法原理淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖的过程可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实:淀粉遇碘液会产生蓝色,但细菌水解淀粉的区域,用碘测定不再产生蓝色,表明细菌产生淀粉酶酶。实验材料枯草芽孢杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)试剂、试剂盒

大分子物质的水解实验——石蕊牛奶试验

实验方法原理有些微生物能水解牛奶中的蛋白质酪素,酪素的水解可用石蕊牛奶来检测。石蕊培养基由脱脂牛奶和石蕊组成,是昏浊的蓝色。酪素水解成氨基酸和肽后, 培养基就会变得透明。 石蕊牛奶也常被用来检测乳糖发酵,因为在酸存在下,石蕊会转变为粉红色,而过量的酸可引起牛奶的固化(凝乳形成),氨基酸的分解会引起碱

大分子物质的水解实验——油脂水解试验

实验方法原理脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的 pH, 使 pH 降低, 加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色变为深红色,说明胞外存在着脂肪酶。实验材料芽孢杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)试剂、试剂盒固体油脂培养基仪器、耗材无菌平皿接种环和

生物大分子的离心分离实验(二)

例(3)用CsCl 梯度分离DNA 并测定其组成(% G+C)(i)CsCl 溶液密度D 与溶液中CsCl 的重量百分比浓度P 之间的关系: D=138.11/(137.48-P)(ii) 制备初密度为1.706 克/毫升的梯度液,应按以下要求配置·4.85 克CsCl (分析纯)·50μl ,1.