支原体的检测实验_培养检测法

实验方法原理这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。实验材料肉汤血清试剂、试剂盒细胞悬液仪器、耗材培养基实验步骤1. 肉汤制备用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加10%马血清;2. 培养每45 ml肉汤培养基加2.5×106 /ml细胞悬液5 ml;培养14 天后观察肉汤培养基颜色变化;3. 菌落培养培养14 日后取0.5 ml加入到已冷却到50 ℃培养基中;4. 为分离支原体进行深入研究,可用琼脂培养基做分寓培养。展开......阅读全文

支原体的检测实验_培养检测法

实验方法原理这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。实验材料肉汤血清试剂、试剂盒细胞悬液仪器、耗材培养基实验步骤1.  肉汤制备用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加10%马血清;2.  培养每45 ml肉汤培养基加2.5×106 /ml细胞悬液5 ml

培养法检测支原体

培养法最为可靠且成本低廉,但培养周期较长。常用于细胞以及I临床治疗细胞的支原体检查。1、所需仪器设备及培养基(1)仪器设备:培养箱,显微镜。(2)培养基①支原体肉汤培养基。②精氨酸肉汤培养基。③支原体琼脂培养基。2、检查方法(1)样品的贮存:样品如在24h以内进行支原体检测,则可贮存在2—8℃;如果

支原体的检测实验_电镜检测法

实验方法原理在用一般方法难以确定时,可做电镜检测。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  细胞培养 48~72 小时。2.  接近汇合前,用0.05%~0.25%胰蛋白酶消化细胞5~10 分钟。3.  用吸管轻轻吹打,制备成细胞悬液。

支原体的检测实验_相差显微镜检测法

实验材料细胞仪器、耗材培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤1.  标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物(长形盖片;24 小时前置入),令细胞面向上,置放在载物片上,再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片;如不用支持物培养法,也可取少许培养液滴在载物片上,再覆以盖片法观察亦可。2.  观察相

支原体培养实验——支原体固体培养基接种法

支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。实验材料肺炎支原体试剂、试剂盒糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊青霉素仪器、耗材培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪

PCR法检测支原体

实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设

支原体的检测实验

相差显微镜检测法 低涨处理地衣红染色观察法 荧光染色法 电镜检测法 培养检测法             实验材料 细胞

支原体培养实验——支原体半固体培养基接种法

实验方法原理一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清

ELISA法检测肺炎支原体

ELISA法检测肺炎支原体 肺炎支原体可引起支原体肺炎,曾被称为“非典型肺炎”。支原体肺炎通常起病缓慢,病情严重,体征轻微,肺炎常为间质性。此外,肺炎支原体与人脑组织有共同抗原,故亦可引起中枢神经系统症状。临床上一般通过检查肺炎支原体抗体IgG、IgM诊断支原体肺炎。 (一)肺炎支原体抗体I

支原体培养实验

实验材料 肺炎支原体试剂、试剂盒 糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊 青霉素仪器、耗材 培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实验步骤 一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭

支原体污染细胞培养的检测方法

由于支原体种类不同,应采取不同的方法进行检测,常用的方法有如下几种。1、观察细胞的形态和生长特征支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,其病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。2、分离培养法大多数支原体可出现特有的典型菌落。该方法准确、可靠,但时间长,敏感性不

细胞培养中支原体污染的检测

细胞培养中最令人头疼的问题之一是微生物的污染,而支原体的污染更给人一种看不见摸不着的感觉。长期以来,这个问题一直令细胞培养工作者困惑。在人们日常生活的工作环境中,支原体可以说无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。国内外研究表明造成细胞培

细胞培养污染之支原体污染检测

细胞培养 中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等,说起支原体污染,估计细胞培养的同学就开始犯愁了,细胞培养的老手都知道,支原体污染非常不易察觉,怎么才能检测支原体污染呢?1、细菌 、真菌污染的检测(1)肉眼观察 细菌 、真菌污染常在传代、换液、加样等开放性操作之后发生,而且增生迅速,

细胞培养箱内的支原体怎么检测

可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。培养基准备: 基本配方为Difco PPLO broth(60%),马血清(20%),15%酵母膏溶液(10%),10x储存液(10%)。由于培养时间长,可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊(1:2000)至培养基中以防止其他细菌的污染。 1

细胞培养中支原体污染的检测方法!

细胞培养中令人头疼的问题之一是支原体的污染。在人们日常生活工作环境中,支原体无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。据说有11%的细胞株均受到不同程度的支原体污染,更有统计细胞培养中支原体感染发生率达到63%,对实验结果会产生不可预期的影

细胞培养中支原体污染的检测方法

细胞培养中最令人头疼的问题之一是支原体的污染。在人们日常生活工作环境中,支原体无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。据说有11%的细胞株均受到不同程度的支原体污染,更有统计细胞培养中支原体感染发生率达到63%,对实验结果会产生不可预期的

细胞培养箱内的支原体怎么检测

可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。培养基准备: 基本配方为Difco PPLO broth(60%),马血清(20%),15%酵母膏溶液(10%),10x储存液(10%)。由于培养时间长,可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊(1:2000)至培养基中以防止其他细菌的污染。 1

支原体的检测

实验材料 细胞仪器、耗材 培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤 1.  标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物(长形盖片;24 小时前置入),令细胞面向上,置放在载物片上,再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片;如不用支持物培养法,也可取少许培养液滴在载物片上,再覆以盖片法观察亦可。2.  

支原体的检测实验_荧光染色法

实验方法原理荧光显微镜检查法,荧光染料用 Hoechst 33258,它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA,能着色,是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1.  标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出(如细胞已

支原体的检测实验_低涨处理地衣红染色观察法

实验方法原理本法为固定染色法,简便易行,标本可长期保存,不仅适于检测支原体,亦可用于检测真菌和细菌。实验材料细胞试剂、试剂盒培养液枸橼酸Carnoy地衣红冰醋酸酒精仪器、耗材离心机实验步骤1.  取材用支持物盖片培养法或培养液均可;用培养液时,先吸取培养液1 毫升,500~800 转/分,离心5 分

荧光检测支原体

实验方法原理在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液指示细胞试剂、试剂盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA

荧光检测支原体

实验方法原理在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液                                      

生化检测项目支原体检查法介绍

支原体检查法介绍:  支原体检查法是检查人体否受到支原体的感染,为临床诊断与治疗支原体感染患者提供依据的一种检查方法。支原体只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮细胞表面的受体上,而不进入组织和血液。支原体检查法正常值:  酶联免疫法:为阴性。支原体检查法临床意义:  临床意义 阳性,见于支原体感染,可

肺炎支原体及其快速培养法

支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型,它既不同于,也不同于病毒,是介于细菌和病毒之间,能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界,与人类、 动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多,造成的危害非常广泛。目前证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、 解脲支原体、 人型支原

ELISAIgM检测和被动凝集法检测肺炎支原体抗体的比较

一、肺炎支原体感染的特点肺炎支原体(MP)是一种常见的非典型肺炎的病原体,经飞沫和直接接触传播,临床多表现为呼吸道感染综合征,起病可急可缓,以发热和咳嗽为主要表现。中高度发热多见,也可低热或无热。MP对大环内酯类抗生素敏感, 但对常规治疗肺炎的药物耐受。早诊断、早治疗有利于避免滥用抗生素, 缩短病程

支原体常用检测方法

  支原体这种微小的微生物(直径0.2-0.8 µm),是细胞培养中令人头疼的大问题。支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者,会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。支原体感染不易察觉,因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。   污染实验室培养细胞的支原体

支原体污染及检测

(1)支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。 目前通过对国内100余株/系细胞的检测,形势不容乐观。污染率达30% ~ 60% 。

微生物学技术:PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪