动脉的基因转移实验——用外科方法将基因转入到颈动脉
实验材料成年 C57B1 6 小鼠编码重组基因的重组病毒或非病毒载体溶液试剂、试剂盒氯胺酮甲苯噻嗪普通盐水乳酸盐保护液M-199培养基恩氟沙星25 和 33G 注射器仪器、耗材外科显微切割显微镜外科手术刀片Agricola显微切割牵引机便携灼烧装置26mm 直的微血管夹毛细血管磁夹6- 0丝缝合显微注射器显微切割剪硅酮插入导管Nexabond 经典皮肤复合系统温暖的小鼠笼实验步骤1.用 25 G 的注射器通过肌肉注射麻醉一只成年的 C57B1/6 小鼠,每千克 80 mg 氯胺酮和 12 mg 甲苯噻嗪。准备好将小鼠盖上布单,将小鼠仰卧放置在显微切割显微镜下确保能看得足够清楚。2.在前部靠颈部的正中位置做一条线,用一把 15 号的手术刀从环状软骨切开一直切到垂管。切开 strap 肌肉并用 Agricola 显微切割拉伸机横向拉开。通过这样的切割,用钝圆的解剖方法将动脉管分开,保护迷走神经和喉部的回归神经。3.电凝小的旁边的分支......阅读全文
动脉的基因转移实验——用外科方法将基因转入到颈动脉
实验材料成年 C57B1 6 小鼠编码重组基因的重组病毒或非病毒载体溶液试剂、试剂盒氯胺酮甲苯噻嗪普通盐水乳酸盐保护液M-199培养基恩氟沙星25 和 33G 注射器仪器、耗材外科显微切割显微镜外科手术刀片Agricola显微切割牵引机便携灼烧装置26mm 直的微血管夹毛细血管磁夹6- 0丝缝合显微
动脉的基因转移—外科方法将基因注射到受伤小鼠股动脉
实验材料8个星期大的 C57B1 6 小鼠试剂、试剂盒肝素甲苯噻嗪氯胺酮重组病毒或非病毒载体溶液仪器、耗材培养板解剖显微镜标准外科设备导线皮肤用U形针实验步骤1.按每千克 IOOU 量的药物通过尾部静脉注射给 8 个星期大的 C57B1/6 小鼠。体重每千克 5 mg 的甲苯噻嗪和体重每公斤 80
动脉的基因转移实验——-手术将基因转移到猪的髂骨动脉
仪器、耗材3. 5mm的硝酸纤维素材料的带有支架的可促使血管球的导管实验步骤1.和基本方案 1 的第 1~6 步一样将猪的血管分开。2.通过支架插入一个 3.5 mm 的硝酸纤维素材料的带有支架的可促使血管球的导管,渐渐地后退以促使它接近大腿骨的的动脉(图 13.1.2)。然后用 8 个大气压的压力
动脉的基因转移实验——通过手术将基因转移到猪的动脉
实验材料幼年家猪性别任意病毒或非病毒的包含编码重组基因的载体试剂、试剂盒阿斯匹林Telazol甲苯噻嗪异氟烷无菌的磷酸盐缓冲溶液仪器、耗材导管(适合猪用的)和器械标准的手术器械Balfour牵引器丝带两个气囊导管压力牵引器血液动力监护仪可吸收的缝线皮肤锁环实验步骤1.在手术前 2 天,给幼年家猪按
动脉的基因转移实验
实验材料 幼年家猪性别任意病毒或非病毒的包含编码重组基因的载体试剂、试剂盒 阿斯匹林Telazol甲苯噻嗪异氟烷无菌的磷酸盐缓冲溶液仪器、耗材 导管(适合猪用的)和器械标准的手术器械Balfour牵引器丝带两个气囊导管压力牵引器血液动力监护仪可吸收的缝线皮肤锁环实验步骤 1.在手术前 2 天,给幼年
动脉基因转移手术将基因转移到兔子动脉粥样硬化的动脉
实验材料白色的新西兰兔病毒或非病毒的包含编码重组基因的载体试剂、试剂盒阿司匹林氯胺酮甲苯噻烷异氣烷肝素磷酸盐缓冲溶液仪器、耗材导管(适合兔子用的)和器械标准的手术器械2-0和 4-0的丝线3F 的球囊导管2-0的缝线兔子的颈圈Balfour牵引器手术刀片球囊导管压力计和血压计5-0的缝线1-0可吸收
基因转移的转移方法
基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。物理方法包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原
基因转移的转移方法
基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。物理方法包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原
颈动脉重度狭窄合并冠状动脉狭窄的外科治疗现状
动脉粥样硬化性疾病作为一种多侵犯大动脉、中动脉的全身慢性血管疾病,常造成患者颈动脉及冠状动脉的联合病变。颈动脉粥样硬化狭窄合并冠心病是动脉粥样硬化性疾病患者常见的问题;而目前针对此类患者的外科干预方案主要有,对两者同期行颈动脉内膜切除术(carotid endarterectomy,CEA)及冠
将基因转移至未分化ES细胞实验
分配96孔板上细胞用于冻存和体外分化试剂、试剂盒DMSOPBS胰酶溶液冻存液仪器、耗材平底 96 孔板移液器ES 生长培养基ES 分化培养基实验步骤1. 准备下列试剂和材料:DMSO(组织培养级)平底 96 孔板多道移液器无菌多道移液器容器ES 生长培养基ES 分化培养基无 Ca2+ 和 Mg2+
将基因转移至未分化ES细胞实验
ES细胞电穿孔 将ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上细胞用于冻存和体外分化 融化96孔板上的细胞 实验材料
将基因转移至未分化ES细胞实验
ES细胞电穿孔 将ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上细胞用于冻存和体外分化 融化96孔板上的细胞 实验材料
基因转移方法
(1)特异正常基因的分离与克隆:应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果,已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆,这是基因治疗的前提,在当代分子生物技术条件下,一般来说,只要有基因探针和准确的基因定位,任何基因都可被克隆。除此,如今既可人工合成DNA探针,还可用DNA合成仪在体外人工合
基因转移的方法
基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。 物理方法 包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同
基因转移方法介绍
(1)特异正常基因的分离与克隆:应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果,已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆,这是基因治疗的前提,在当代分子生物技术条件下,一般来说,只要有基因探针和准确的基因定位,任何基因都可被克隆。除此,如今既可人工合成DNA探针,还可用DNA合成仪在体外人工合
基因传递到肝脏实验
实验材料 成年小鼠试剂、试剂盒 乙醇重组腺病毒悬液仪器、耗材 带铁丝盖的鼠笼加热灯小鼠限制器棉纱店注射器实验步骤 1.一个鼠笼装 6 只小鼠,加热灯置铁丝盖上方 6~10in(15~25 cm) 给小鼠取暖。观察小鼠,约 5 min 后,它们会在角落里缩做一团,准备注射。不要在角落的位置照射小鼠。2
基因传递到肌肉实验
实验材料 新生的小鼠试剂、试剂盒 乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材 用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌) 组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤 1.用断头术或者二
简述基因治疗的基因转移方法
(1)特异正常基因的分离与克隆:应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果,已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆,这是基因治疗的前提,在当代分子生物技术条件下,一般来说,只要有基因探针和准确的基因定位,任何基因都可被克隆。除此,如今既可人工合成DNA探针,还可用DNA合成仪在体外人
关于基因转移的化学转移方法介绍
有DNA-阳离子-二甲基亚砜法。基因转移的生物学方法包括细胞融合法、脂质体介导法、原生质体融合法等。除以上三种方法外,又出现了颗粒轰击技术,就是将外源DNA包被在金属上,在电场中包被DNA的金属颗粒获得能量并以高速度运动,穿入靶细胞组织或器官内,由于这种金属颗粒可以涂成薄膜状,所以可实现较多细胞
基因转移的物理方法转移法介绍
包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原生质膜发生融合,使外源DNA通过细膜上出现的瞬间小孔而进入细胞。
关于基因治疗的基因转移方法介绍
(1)特异正常基因的分离与克隆:应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果,已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆,这是基因治疗的前提,在当代分子生物技术条件下,一般来说,只要有基因探针和准确的基因定位,任何基因都可被克隆。除此,如今既可人工合成DNA探针,还可用DNA合成仪在体外人
转基因植物的直接转入法
这是将裸露的DNA直接导入植物细胞,然后将这些细胞在体外培养再生出植株。裸露的DNA的转化效率较低,因而要辅之以高效率的组织培养系统。 植物细胞有一层很厚的细胞壁,因此需先去除植物细胞壁,使之成为原生质体,然后用来直接转入外源DNA。当然,也可用机械的方法将DNA直接注入植物细胞而毋须去除细胞
基因转移的技术方法介绍
基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。物理方法包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原
基因转移常用的方法介绍
外源基因的转移:基因转移(gene transfer)是将外源基因导入细胞内,其转移方法较多,常用的要有下列几类:1)化学法:将正常基因DNA(及其拷贝)与带电荷物质和磷酸钙、DEAE-葡萄糖或与若干脂类混合,形成沉淀的DNA微细颗粒,直接倾入培养基中与细胞接触,由于钙离子有促进DNA透过细胞有作用
简述颈动脉搏动图的方法
受检查者在检查前休息10min,取平卧位,头部转向左侧,检查者用右手示指在病人右侧胸锁乳突肌与甲状软骨旁触摸颈动脉搏动处,将脉搏传感器置于最强点,用手或支架固定。把传感器与多导生理记录仪联接,令患者平静呼气末屏气,观察荧光屏波形稳定后,与心电图,心音图及心尖搏动图同步记录5~10个心动周期,纸速
将基因转移至未分化ES细胞实验——ES细胞电穿孔
实验材料线性化转移基因 DNA未分化 ES 细胞仪器、耗材电穿孔仪和电穿孔杯neoR-MEF 滋养板ES 生长培养基实验步骤1. 准备下列试剂和材料:线性化转移基因 DNA(1 mg/ml,溶于无菌 TE)未分化 ES 细胞Bio-Rad 电穿孔仪和电穿孔杯100 mm neoR-MEF 滋养板ES
如何将基因转染到肝星状细胞
基因转染的定义是“将具生物功能的核酸转移或运送到细胞内并使核酸在细胞内维持其生物功能”。其中,核酸包括DNA(质粒和线性双链DNA),反义寡核苷酸及RNAi(RNA interference)。基因转染技术已广泛应用于基因组功能研究(基因表达调控,基因功能,信号转导和药物筛选研究)和基因治疗研究。
基因转移技术的技术方法介绍
基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。
基因转移的化学技术方法介绍
有DNA-阳离子-二甲基亚砜法。基因转移的生物学方法包括细胞融合法、脂质体介导法、原生质体融合法等。除以上三种方法外,又出现了颗粒轰击技术,就是将外源DNA包被在金属上,在电场中包被DNA的金属颗粒获得能量并以高速度运动,穿入靶细胞组织或器官内,由于这种金属颗粒可以涂成薄膜状,所以可实现较多细胞的基
基因转移的物理技术方法介绍
包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原生质膜发生融合,使外源DNA通过细膜上出现的瞬间小孔而进入细胞。