人造血干细胞的培养、转导和分析实验
反转录病毒介导的基质细胞支持 CD34+ 细胞转导实验材料人骨髓、脐带血或用抗凝血剂处理的外周血试剂、试剂盒HBSSPBSBBMM包被磁珠的鼠抗IgG反转录病毒载体上清液鱼精蛋白硫酸盐LBMMG418HEPES 溶液仪器、耗材转导培养基甲基纤维素培养基铯辐射源离心管旋转平台免疫磁性选择装置注射器培养皿实验步骤展......阅读全文
人造血干细胞的培养、转导和分析实验
反转录病毒介导的基质细胞支持 CD34+ 细胞转导实验材料人骨髓、脐带血或用抗凝血剂处理的外周血试剂、试剂盒HBSSPBSBBMM包被磁珠的鼠抗IgG反转录病毒载体上清液鱼精蛋白硫酸盐LBMMG418HEPES 溶液仪器、耗材转导培养基甲基纤维素培养基铯辐射源离心管旋转平台免疫磁性选择装置注射器培养
转导的应用和实验方法
应用转导是细菌的遗传学研究中的一种常用研究手段。它可以用来在细菌间转移基因,进行互补测验,进行基因定位,特别是通过共转导方法进行基因的精细结构分析。在遗传工程中可以把所要克隆的基因通过重组DNA技术插入到λ噬菌体的DNA中,然后通过离体包装方法把它用噬菌体外壳蛋白包装起来,再去感染寄主细胞以制备基因
噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤(二)
四、实验步骤 1、噬菌体的诱导和裂解液的制备 ( 1 ) 供菌体的活化与培养:取一环供体菌,接种于盛有 5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中, 37 ℃培养 16 h 后,吸 0.5 ml 菌液,接种于盛有 4.5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中,继续培养 4-6 h 。 (
噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤(一)
一、实验目的 以局限性转导为例来说明转导的基本原理,进一步验证 DNA是遗传物质,并初步掌握转导实验的基本方法。 二、实验原理与意义 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。 转导实验中常用的是λ噬菌
细菌的局限性转导实验原理、材料和实验步骤
一、实验原理: 转导是由噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。转导可分为局限性转导和普遍性转导二大类。 本实验试图用局限性转导为例,用噬菌体(λ)专一性转导半乳糖发酵基因的现象来说明转导的基
羊水标本的制备、培养和分析实验
实验材料羊水试剂、试剂盒乙醇chang 培养基秋水仙胺低渗液甲醛 冰乙酸固定剂Permount 封固剂仪器、耗材用于细胞培养的20ml 注射器或试管15ml 离心管离心机盖玻片巴氏吸管倒置显微镜精细镊蓝垫或纸巾玻片加热器实验步骤展
人PBMC分离和培养
1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次4、获得细胞可做分选或其他实验。体会:1、实验中我用过肝素方法抗凝,但效
如何采集人的造血干细胞
自骨髓或外周血中采集造血干细胞。全麻下对患者或供者的髂 后上棘反复穿刺抽取骨髓,一般根据受者体重采集2〜4 X108/化个 细胞。除了轻度贫血,采集骨髓对供者外周血细胞计数没有明显影 响。通常都能良好耐受。自供者或患者外周血采集造血干细胞的过程称为“白细胞置换 术”。可事先给予G- CSF、GM-
转导蛋白的定义和作用
中文名称转导蛋白英文名称transducin定 义一种以光为配体的三聚体G蛋白。在眼睛的光感受细胞中与视紫红质偶联,后者被光激活后就将转导蛋白激活,继而激活环鸟苷酸特异性的磷酸二酯酶并将视觉信号逐级放大,最终将光信号转变为神经信号,导致视觉反应。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(
人PBMC分离和培养步骤和体会
1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理。 2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟。 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次。 4、获得细胞可做分选或其他实验。 体会:
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层,分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞).其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用,该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能;B型细胞的功能是合成输出蛋白且与透明质酸酶的形成密切相关,同时与
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层,分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞).其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用,该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能;B型
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层,分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞).其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用,该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能;B型
怎样用一个实验区分细菌的转化和转导
转化:是DNA和受体菌进行转化转导:是缺陷噬菌体和受体菌进行DNA的重组。Transformation 中文翻译为 “转化”Certain prokaryotes are able to take up free DNA released by other bacteria. This proces
3D细胞培养和分析实验流程
利用合适的细胞培养试剂和技术,可以很容易地培养出3D球状体。球状体的完整实验流程包括:细胞培养、荧光染色和成像分析。赛默飞可以提供3D细胞培养的完整解决方案,包括InvitrogenTM和Thermo ScientificTM细胞培养系统、试剂、仪器和分析软件。
λ噬菌体的局限性转导实验
λ噬菌体是一种温和噬菌体,在大肠杆菌宿主细胞内其DNA可整合在宿主染色体上,如同细菌的基因一样传递给子代细胞,此为溶原状态。在溶原菌中,λ噬菌体有两种选择:①溶原生长:即继续维持其溶原状态;②裂解生长:在某些物理化学等因素的诱导下,λ噬菌体借助宿主细胞的酶系统,开始有序的复制、转录、表达,装配成完整
人滑膜细胞原代培养实验
酶消化法 实验方法原理 将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
人滑膜细胞原代培养实验
酶消化法 实验方法原理 将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
人外周血淋巴细胞培养实验材料和操作过程
在正常情况下,人外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素(PHA)是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂,在PHA作用下,原处于Go期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性,淋巴细胞经过含有HPA培养液培养,在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体
转导子的概念和应用特点
细菌细胞受某些DNA病毒感染后,宿主细胞染色体的一小部分可共价结合到病毒DNA上,随病毒一起进行复制,因而可参入子代病毒颗粒DNA中,当这些病毒感染其他细胞时,病毒DNA把第一个细胞染色体的一部分带到第二个细胞的染色体内。这种以病毒(在细菌中为噬菌体)为媒介将宿主细胞的基因从一个细胞转移到另一个细胞
昆虫细胞的保存和培养实验
实验材料 昆虫试剂、试剂盒 胎牛血清台盼蓝乙醇仪器、耗材 培养瓶培养箱细胞计数器搅拌台转子离心机实验步骤 1. 将4 ml 含10%胎牛血清的完全昆虫细胞培养基加入一个25 cm2 培养瓶。取出一支冻存Sf9细胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后剧烈摇动融化之,当安瓿的内容物几乎完全融化时,将安
昆虫细胞的保存和培养实验
实验材料昆虫试剂、试剂盒胎牛血清台盼蓝乙醇仪器、耗材培养瓶培养箱细胞计数器搅拌台转子离心机实验步骤1. 将4 ml 含10%胎牛血清的完全昆虫细胞培养基加入一个25 cm2 培养瓶。取出一支冻存Sf9细胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后剧烈摇动融化之,当安瓿的内容物几乎完全融化时,将安瓿浸入7
分离和培养人角膜内皮细胞实验——分离人角膜内皮细胞
实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4
培养细胞形态和培养细胞形态分析
培养细胞形态 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。 1、成纤维型细胞 在培养中的细胞
造血干细胞的定义和功能
造(zào)血(xuè)干(gàn)细(xì)胞(bāo)(Hematopoietic stem cells, HSCs) 是血液系统中的成体干细胞,是一个异质性的群体,具有长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。它是研究历史最长且最为深入的一类成体干细胞,对研究各类干细胞,包括肿瘤干细胞,
造血干细胞的功能和意义
造(zào)血(xuè)干(gàn)细(xì)胞(bāo)(Hematopoietic stem cells, HSCs) 是血液系统中的成体干细胞,是一个异质性的群体,具有长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。它是研究历史最长且最为深入的一类成体干细胞,对研究各类干细胞,包括肿瘤干细胞,
造血干细胞的形态和功能
造血干细胞(英语:Hematopoietic stem cells, HSCs)是可以分化出所有血细胞的干细胞。增殖、分化血细胞的过程称作造血作用 (Hematopoiesis),主要发生在红骨髓。而红骨髓则是在胚胎发育过程中,从中胚层分化出来的。造血干细胞具有"多潜能性"(multipotent)
食用真菌的液体培养和固体栽培实验——液体培养
实验方法原理实验材料侧耳( Pleurotus ostreatus 俗称平菇、北风菌等)试剂、试剂盒马铃薯培养基玉米粉蔗糖培养基玉米粉综合培养基仪器、耗材旋转式恒温摇床接种铲接种针三角瓶实验步骤1. 一种(斜面菌种,俗称母种。母种斜面移种后称原种)培养用无菌接种铲薄薄铲下侧耳斜面菌丝 1 块,接种于
人信号转导分子(Smad1)酶联免疫(ELISA)分析试剂盒使用...
人信号转导分子(Smad1)酶联免疫(ELISA)分析试剂盒使用说明检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本信号转导分子(Smad1)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人信号转导分子(Smad1)水平。
共转导定位法对基因结构进行分析的方法原理和应用
原理和基因的共转导定位也没有不同。共转导的精确性较好,而且所需要的只是一个转导噬菌体菌株,所以应用较广,尤期适用于测定一系列属于同一基因的点突变的相对位置。