人PBMC分离和培养步骤和体会

1、将静脉血20ｍl用ACD抗凝剂以容积比血：抗凝剂＝9：1抗凝处理。 2、按血：分离液＝1：2注入国产淋巴细胞分离液上层，400g 20℃离心30分钟。 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g，10min洗三次。 4、获得细胞可做分选或其他实验。体会： 1、实验中我用过肝素方法抗凝，但效果不好，因为肝素抗凝后交接层混浊，洗涤后没有细胞。后来是一位老师推荐我用ACD抗凝剂，效果very good。 2、实验用的是国产淋巴细胞液（天津TBD），没有用过进口的Ficoll/Paqnl。 3、分层时的离心温度只能在20－25℃，过高细胞容易死亡或破坏，过低分层效果不好。我刚开始不知道，试过用5℃离心，其结果是一塌糊涂。 4、不能使用角离心机。......阅读全文

流式细胞仪实验方法

一、实验准备1．标本制备：2． zui小化非特异性结合：二、凋亡1．凋亡的检测方法：网站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA 四、血小板

2018-07-13 13:36 News WIKI 相关搜索

流式细胞仪实验方法-1

流式细胞仪实验方法一、实验准备1．标本制备：2． zui小化非特异性结合：二、凋亡1．凋亡的检测方法：和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法三、细胞因子1．激活的细胞因子2．C

2019-10-01 18:07 News WIKI 相关搜索