细菌的局限性转导实验原理、材料和实验步骤
一、实验原理: 转导是由噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。转导可分为局限性转导和普遍性转导二大类。 本实验试图用局限性转导为例,用噬菌体(λ)专一性转导半乳糖发酵基因的现象来说明转导的基本原理。并初步掌握转导实验的基本方法。 用E Coli k12 (λ) gal 作为供体菌,此菌带有原噬菌体(λ)。控制半乳糖发酵的基因在细菌染色体上和(λ)紧密连锁。当此菌体受紫外光诱导后,原噬菌体被释放出来,其中有一定比例的噬菌体带有邻近的半乳糖发酵基因。这种噬菌体称λdg,这种噬菌体在感染另一不能发酵半乳糖的菌体时(即受菌体)就有可能使其转变成为能发酵半乳糖的菌体。整个过程可以下图表示: K12(λ)gal+(供体菌) ↓UV λgal+ ↓ K12 S......阅读全文
细菌的转导
一、基本知识与原理 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子 遗传学的发展,转身已成为基因精细结构分析的常用方法之一。 根据噬菌体转导供体菌基因的差异,转导可分为普遍性转导和局限性转导。这里以局限性转导为例说明转导的基本原理。局限性转导实验中常用的是大噬菌体,它能整
细菌的转导
一、基本知识与原理 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转身已成为基因精细结构分析的常用方法之一。 根据噬菌体转导供体菌基因的差异,转导可分为普遍性转导和局限性转导。这里以局限性转导为例说明转导的基本原理。局限性转导实验中常用的是大噬菌体,它能整合在
细菌的转导
一、基本知识与原理 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子 遗传学的发展,转身已成为基因精细结构分析的常用方法之一。 根据噬菌体转导供体菌基因的差异,转导可分为普遍性转导和局限性转导。这里以局限性转导为例说明转导的基本原理。局限性转导实验中常用的是大噬菌体,它能整
细菌的转导
一、基本知识与原理 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转身已成为基因精细结构分析的常用方法之一。 根据噬菌体转导供体菌基因的差异,转导可分为普遍性转导和局限性转导。这里以局限性转导为例说明转导的基本原理。局限性转导实验中常用的是大噬菌体,它能整合在
细菌的局限性转导实验原理、材料和实验步骤
一、实验原理: 转导是由噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。转导可分为局限性转导和普遍性转导二大类。 本实验试图用局限性转导为例,用噬菌体(λ)专一性转导半乳糖发酵基因的现象来说明转导的基
细菌的局限性转导
实验概要本实验介绍了细菌的局限性转导实验的原理、材料和实验步骤。实验原理转导是由噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。转导可分为局限性转导和普遍性转导二大类。本实验试图用局限性转导为例,用噬菌体(λ)专一性转导半乳糖发酵基
怎样用一个实验区分细菌的转化和转导
转化:是DNA和受体菌进行转化转导:是缺陷噬菌体和受体菌进行DNA的重组。Transformation 中文翻译为 “转化”Certain prokaryotes are able to take up free DNA released by other bacteria. This proces
转导在细菌遗传学研究中的应用
应用转导是细菌的遗传学研究中的一种常用研究手段。它可以用来在细菌间转移基因,进行互补测验,进行基因定位,特别是通过共转导方法进行基因的精细结构分析。在遗传工程中可以把所要克隆的基因通过重组DNA技术插入到λ噬菌体的DNA中,然后通过离体包装方法把它用噬菌体外壳蛋白包装起来,再去感染寄主细胞以制备基因
转导的应用和实验方法
应用转导是细菌的遗传学研究中的一种常用研究手段。它可以用来在细菌间转移基因,进行互补测验,进行基因定位,特别是通过共转导方法进行基因的精细结构分析。在遗传工程中可以把所要克隆的基因通过重组DNA技术插入到λ噬菌体的DNA中,然后通过离体包装方法把它用噬菌体外壳蛋白包装起来,再去感染寄主细胞以制备基因
噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤(二)
四、实验步骤 1、噬菌体的诱导和裂解液的制备 ( 1 ) 供菌体的活化与培养:取一环供体菌,接种于盛有 5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中, 37 ℃培养 16 h 后,吸 0.5 ml 菌液,接种于盛有 4.5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中,继续培养 4-6 h 。 (
噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤(一)
一、实验目的 以局限性转导为例来说明转导的基本原理,进一步验证 DNA是遗传物质,并初步掌握转导实验的基本方法。 二、实验原理与意义 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。 转导实验中常用的是λ噬菌
λ噬菌体的局限性转导实验
λ噬菌体是一种温和噬菌体,在大肠杆菌宿主细胞内其DNA可整合在宿主染色体上,如同细菌的基因一样传递给子代细胞,此为溶原状态。在溶原菌中,λ噬菌体有两种选择:①溶原生长:即继续维持其溶原状态;②裂解生长:在某些物理化学等因素的诱导下,λ噬菌体借助宿主细胞的酶系统,开始有序的复制、转录、表达,装配成完整
细菌信号转导网络复杂度的进化原理获揭示
近日,中国科学院南海海洋研究所研究员高贝乐团队以具有足够进化深度和生态多样性的弯曲菌门为研究对象,分析了六大信号转导系统在该门不同分支的进化过程及复杂度构建的方式,解析了细菌的信号网络从简单演变为复杂,或从复杂至简单的过程。相关研究发表于mBio。 细菌依赖信号转导系统来感知和响应环境变化以维
细菌信号转导网络复杂度的进化原理获揭示
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/12/491034.shtm 近日,中国科学院南海海洋研究所研究员高贝乐团队以具有足够进化深度和生态多样性的弯曲菌门为研究对象,分析了六大信号转导系统在该门不同分支的进化过程及复杂度构建的方式,解析了细菌的
细菌培养实验
实验步骤一、需氧培养法:本法是临床细菌室最常用的培养方法,适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃,这适合于绝大多数致病菌的生长。此外,还有用 4℃ 培养,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长,而其他革兰氏阳性菌则不能,故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
细菌培养实验
一、需氧培养法:本法是临床细菌室最常用的培养方法,适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃,这适合于绝大多数致病菌的生长。此外,还有用 4℃ 培养,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长,而其他革兰氏阳性菌则不能,故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
细菌鉴定实验
实验方法原理 玻片凝集反应(slide agglutirlation)是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质(如细菌,立克次体,钩端螺旋体等)混合,在有适当电解质存在的条件下,如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物,即为阳性:如两者不对应便无凝集物出现,即为阴性。此法属定性试验,
并发转导与基因定位——三点杂交实验
实验方法原理本实验用噬菌体P22对鼠伤寒沙门氏菌进行并发转导(共转导),供体细菌中的两个连锁基因可被导入受体细菌中,与受体细菌中的一个可选择表型的基因进行三点杂交分析,用以确定这三个基因的排列顺序。若有三个基因,其野生型分别用A、B、C表示,相应的突变型基因分别记为a、b、c。若A、B、C三个基因的
P1-噬菌体普遍性转导实验
实验方法原理细菌病毒(噬菌体)分为烈性噬菌体和温和噬菌体。烈性噬菌体感染细胞后,伴随着细胞裂解会释放出新的子代噬菌体颗粒。被温和噬菌体感染的细胞或是裂解,释放出新的子代噬菌体颗粒,或是成为溶源状态,噬菌体的基因组整合到细菌染色体上,与细菌染色体一起复制,这时的噬菌体基因组称为原噬菌体(prophag
并发转导与基因定位——三点杂交实验
实验方法原理 本实验用噬菌体P22对鼠伤寒沙门氏菌进行并发转导(共转导),供体细菌中的两个连锁基因可被导入受体细菌中,与受体细菌中的一个可选择表型的基因进行三点杂交分析,用以确定这三个基因的排列顺序。若有三个基因,其野生型分别用A、B、C表示,相应的突变型基因分别记为a、b、c。若A、B、C三个基因
P1-噬菌体普遍性转导实验
实验方法原理 细菌病毒(噬菌体)分为烈性噬菌体和温和噬菌体。烈性噬菌体感染细胞后,伴随着细胞裂解会释放出新的子代噬菌体颗粒。被温和噬菌体感染的细胞或是裂解,释放出新的子代噬菌体颗粒,或是成为溶源状态,噬菌体的基因组整合到细菌染色体上,与细菌染色体一起复制,这时的噬菌体基因组称为原噬菌体(propha
转导的含义
转导(transduction)由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基 实验材料
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为
人造血干细胞的培养、转导和分析实验
反转录病毒介导的基质细胞支持 CD34+ 细胞转导实验材料人骨髓、脐带血或用抗凝血剂处理的外周血试剂、试剂盒HBSSPBSBBMM包被磁珠的鼠抗IgG反转录病毒载体上清液鱼精蛋白硫酸盐LBMMG418HEPES 溶液仪器、耗材转导培养基甲基纤维素培养基铯辐射源离心管旋转平台免疫磁性选择装置注射器培养
细菌RNA制备实验
革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取 实验材料 RNA 试
细菌简单染色实验
实验方法原理常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别,
细菌的生化实验
各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同.用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类.利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应.生物化学试验的方法很多,这里主要介绍碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验 (1)原
细菌的生化实验
各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多,这里主要介绍碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验(1)原理:不同