环境对果蝇基因表达的效应实验
表型的许多方面都受到生物体遗传组成和其生存环境的影响,因此可以说表型是基因型与环境相互作用的产物。果蝇卷曲翅基因的表达常受到环境的修饰,通过观察该基因在不同环境下的表达情况,即可显示环境对基因表达的影响。卷曲翅基因(cu)对温度敏感,纯合体(cu/cu)果蝇在高温下培养时翅膀顶端弯曲(图7-1),但同样基因型的果蝇在低温下培养时部分个体具有直翅膀,因此可以说cu等位基因的外显率(penetrance)是不完全的。另一方面,特别是在低温下培养的果蝇翅膀表现出不同程度的卷曲,这样可以说该基因的表现度(expressivity)是变化的。cu基因的外显率和表现度还根据性别而变化。来源:《遗传学实验教程》实验方法原理实验材料弯翅果蝇试剂、试剂盒果蝇培养基乙醚仪器、耗材恒温培养箱立体解剖镜培养瓶及麻醉瓶实验步骤1.从保种的弯翅果蝇(基因型为cu/cu)培养瓶中建立3种培养体系,雌蝇不要求是处女蝇。在培养瓶上贴上20℃、25℃、28℃标签,......阅读全文
环腺苷酸对基因表达的调节
AMP是一个重要的基因表达调控物质(Monall,1991)。在原核生物中cAMP被认为是直接活化RNA聚合酶以促进转录,即通过该酶的6因子的磷酸化来实现促进InRNA转录。近年来的研究表明,真核细胞中cAMP的作用与转录因子调节有关。Montndny等(1986)发现许多cAMP诱导转录的真核基因
环腺苷酸对基因表达的调节
环腺苷酸对基因表达的调节AMP是一个重要的基因表达调控物质(Monall,1991)。在原核生物中cAMP被认为是直接活化RNA聚合酶以促进转录,即通过该酶的6因子的磷酸化来实现促进InRNA转录。近年来的研究表明,真核细胞中cAMP的作用与转录因子调节有关。Montndny等(1986)发现许多c
环腺苷酸对基因表达的调节
AMP是一个重要的基因表达调控物质(Monall,1991)。在原核生物中cAMP被认为是直接活化RNA聚合酶以促进转录,即通过该酶的6因子的磷酸化来实现促进InRNA转录。近年来的研究表明,真核细胞中cAMP的作用与转录因子调节有关。Montndny等(1986)发现许多cAMP诱导转录的真核
环腺苷酸对基因表达的调节
AMP是一个重要的基因表达调控物质。在原核生物中cAMP被认为是直接活化RNA聚合酶以促进转录,即通过该酶的6因子的磷酸化来实现促进InRNA转录。近年来的研究表明,真核细胞中cAMP的作用与转录因子调节有关。Montndny等(1986)发现许多cAMP诱导转录的真核基因的启动子周围多含有一致或近
动物所揭示靶基因Windpipe对果蝇肠道稳态的调控机制
肠道稳态维持是通过肠干细胞的增殖分化实现的。由于外界病原微生物感染,饮食等环境压力,肠道上皮细胞不断受损,肠干细胞通过自我更新、增殖和分化来维持肠道上皮的完整性。果蝇中肠系统是研究干细胞和组织稳态的重要模型。其稳态受到多种信号通路的综合调控,包括Notch、JAK/STAT、Wnt等。然而,这些
果蝇白眼突变基因的克隆
【实验目的】掌握T克隆的原理和方法。了解质粒提取的原理和方法。【实验原理】外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA 连接酶的作用下,有Mg2+ 、ATP存在的连接缓冲系统中,将载体分子与外源DNA分子进行连接。Taq DNA
核受体对基因表达的抑制作用
核受体,例如类固醇受体(steroid receptor),可以改变响应细胞(responsive cell)的基因表达。在Cell杂志中,Ogawa等人指出核受体糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor)、过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome prol
如何避免遗传突变带来的影响?待在遗传舒适区域
有机体的表型往往是通过环境因子和遗传组成相互作用来塑造的,近日,一项发表于国际杂志PLoS Genetics上的研究报告中,来自维也纳兽医大学(Veterinarmedizinische Universitat Wien)的研究者表明,在特殊的温度下果蝇可以生存在一种“遗传舒适区域”中,尽管在不
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状
果蝇数量性状实验
【实验目的】 1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。 2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】 在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)
痘苗病毒系统基因表达实验(二)
实验方法原理含有 pT7 控制的外源基因(本实验「重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染」)的重组质粒,通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞,在培养过程中,外源基因被高效的 T7 RNA 聚合酶转录,并在感染细胞的细胞质完成
基因表达系列分析实验(SAGE)(一)
实验方法原理 实验材料 感兴趣的细胞或组织试剂、试剂盒 糖原EDTA缓冲液SDSBSATween 20连接子T4 DNA 连接酶BsmFIPC8SeeDNA乙酸钠乙醇DMSOPCR引物乙酸铵DNA ladder 聚丙烯酰胺 TBE凝胶DNA参照pZErO-1 质粒TE缓冲SOC培养液Tris · C
基因表达系列分析实验(SAGE)(二)
31. 乙醇沉淀:11.5 ml 样品10 ul SeeDNA100 ul 糖原5.1 ml 7.5 mol/L 乙酸铵38.3 ml 100% 乙醇干冰/甲醇浴 15 min。然后室温溶化 2 min。32. 轻轻涡旋混匀,台式离心机的吊桶转子室温约 3000 g (4000 r/min) 离心
基因表达系列分析实验(SAGE)(三)
58. 用 1:10 000 的 SYBR Green I 染 15 min。在 UV 盒上观察,分出感兴趣的区带。59. 把每一块凝胶放入底部有约 0.5 mm 小洞的 0.5 ml 微量离心管中(用 21-G 针头刺的)。60. 把 0.5 离心管连同凝胶块放入 2.0 ml 的硅烷化的离心管里
基因表达系列分析实验(SAGE)(四)
83. 用作测序的 2 ul PCR 产物(所需的确切用量取决于测序的方案,并应当优化)用下述方法处理:0.1 ul 外切核酸酶 I0.1 ul 虾碱性磷酸酶1.8 ul 50 mmol/L Tris·Cl,pH 8. 0加 2 ul 消化混合液到 2 ul DNA 中。84. 在热循环仪上进行反应
痘苗病毒系统基因表达实验(一)
本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体 T7 RNA 聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先,将感兴趣的基因插入质粒中,使其位于 T7 RNA 聚合酶启动子(PT7)的控制下。应用脂质体转染,重组质粒进入感染了 vTF7-3 的细胞质中,而 vTF7-3 是一种能编码噬菌体T7 RNA聚合酶的重组痘苗病
关于环腺苷酸对基因表达的调节介绍
AMP是一个重要的基因表达调控物质(Monall,1991)。在原核生物中环腺苷酸被认为是直接活化RNA聚合酶以促进转录,即通过该酶的6因子的磷酸化来实现促进InRNA转录。近年来的研究表明,真核细胞中cAMP的作用与转录因子调节有关。Montndny等(1986)发现许多cAMP诱导转录的真核
-Nature:研究揭示共生关系对宿主基因表达的影响
弧菌和夏威夷短尾鱿鱼(Euprymna scolopes)之间的专一的伙伴关系是终生的,但它必需在每个小鱿鱼在海洋中孵化后在其发光器官中被再造。这种复杂的过程涉及最初附着在发光器官表面的黏膜纤毛上皮上的仅仅3到5个费氏弧菌细胞,随后通过这种生物在发光器官毛穴的聚集,以及后来迁移到发光器官的腺
果蝇的伴性遗传实验
实验方法原理 果蝇的红眼与白眼是一对由性染色体上的基因控制的相对性状。用红眼雌果蝇与白眼雄果蝇交配,F1代雌雄均为红眼果蝇,F1代相互交配,F2代则雌性均为红眼,雄性红眼:白眼=1:1;相反用白眼雌果蝇与红眼雄果蝇交配,F1代雌性均为红眼,,雄性都是白眼,F1相互交配得F2代,雌蝇红眼与白眼比例为1
果蝇的双因子实验
实验方法原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的,而在配子中非等位基因自由组合,产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型,比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状:长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体×残翅黑檀体的双因子杂交实验,旨在验证
表达谱基因芯片实验操作流程
一、试剂1. TRIzol2. 异丙醇3. 氯仿4. 75%乙醇(RNase-free)5. Milli-Q水(RNase-free)6. 无水乙醇7. dNTPs8. Cy5-dCTP和Cy3-dCTP9. 杂交试剂110. 标记试剂I11. 杂交试剂212. 标记试剂II13. 反转录酶14.
plos-biology:我们对基因表达数据存在普遍误解
数据可重复性一直以来都是实验生物学的一个主要问题,随着基因组技术的发展以及相关数据复杂性的不断提高,这一问题的严重性又得到了很大程度地提升。 11月12日,特拉维夫大学的Shir Mandelbaum,Zohar Manber,Orna Elroy-Stein和Ran Elkon在《PLOS
关于基因表达系列分析的实验路线的介绍
(1) 以biotinylated oligo(dT)为引物反转录合成cDNA,以一种限制性内切酶(锚定酶 Anchoring Enzyme, AE)酶切。锚定酶要求至少在每一种转录物上有一个酶切位点,一般4碱基限制性内切酶能达到这种要求,因为大多数mRNA要长于256碱基(44)。通过链霉抗生
基因表达的定义
基因表达(gene expression)是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。基因表达产物通常是蛋白质,所有已知的生命,都利用基因表达来合成生命的大分子。
基因表达的步骤
基因表达可以通过对其中的几个步骤,包括转录,RNA剪接,翻译和翻译后修饰,进行调控来实现对基因表达的调控。基因调控赋予细胞对结构和功能的控制,基因调控是细胞分化、形态发生以及任何生物的多功能性和适应性的基础。基因调控也可以作为进化改变的底物,因为控制基因表达的时间、位置和量可以对基因在细胞或多细胞生
基因表达的机制
转录转录过程由RNA聚合酶(RNAP)进行,以DNA为模板,产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动,留下新合成的RNA链。基因组DNA由两条反向平行和反向互补链组成,每条链具有5'和3'末端。这两条链分别称为“模板链”(产生RNA转录物的模板)和“编码链”(含有转录本序列的DN
基因表达的调控
转录调控可分为三种主要途径:1)遗传调控(转录因子与靶标基因的直接相互作用);2)调控转录因子与转录机制相互作用,3)表观遗传调控(影响转录的DNA结构的非序列变化)。通过转录因子直接调控靶标DNA表达是最简单和最直接的转录调控改变转录水平的方法。基因的编码区周围通常都具有几个蛋白质结合位点,具有调