用梯度盐析的方法组装高浓度的单核小体实验
实验材料非标记的高浓度DNA片段核心组蛋白试剂、试剂盒Tr1s·ClDTTEDTAKCl苄脒高盐缓冲液低盐缓冲液无盐缓冲液仪器、耗材兔子泵（Rainin）MWCO 透析管电导计实验步骤1. 准备如下的重组混合液（最后加入组蛋白）：0.7 mg／ml DNA 片段20 mmol／L Tr1s·Cl， pH 7.7 （1 mol／L 储液）10 mmol／L DTT （1 mol／L 储液）1 mmol／L EDTA， pH 8.0 （0.5 mol／L 储液）2 mol／L KCl （2.5 mol／L 储液）0.5 mmol／L 苄脒（0.5 mol／L 储液）0.63 mg／ml 组蛋白。混匀后，4℃ 组装 30 min。2. 装好「兔子」泵装置，将流动速度设定为 205～210 ul／min （图 1）。图1 梯度盐透析的组装［改自文献（Lugeretal，1999）］3. 将反应混合液加入 6000～8000 MWCO 透......阅读全文
用梯度盐析的方法组装高浓度的单核小体实验
实验方法原理 实验材料 非标记的高浓度DNA片段核心组蛋白试剂、试剂盒 Tr1s·ClDTTEDTAKCl苄脒高盐缓冲液低盐缓冲液无盐缓冲液仪器、耗材 兔子泵（Rainin）MWCO 透析管电导计实验步骤 1. 准备如下的重组混合液（最后加入组蛋白）：0.7 mg／ml DNA 片段20 mmol／
用梯度盐析的方法组装高浓度的单核小体实验
实验材料非标记的高浓度DNA片段核心组蛋白试剂、试剂盒Tr1s·ClDTTEDTAKCl苄脒高盐缓冲液低盐缓冲液无盐缓冲液仪器、耗材兔子泵（Rainin）MWCO 透析管电导计实验步骤1. 准备如下的重组混合液（最后加入组蛋白）：0.7 mg／ml DNA 片段20 mmol／L Tr1s·Cl，
用梯度盐透析的方法组装核小体串实验
实验材料非标记的 G5E4 DNA末端标记的 G5E4 DNA牛血清白蛋白（BSA）试剂、试剂盒高盐缓冲液低盐缓冲液实验步骤1. 准备如下的重组混合液（最后加入组蛋白）：约 100 ug／ml 9 份未标记和 1 份末端标记（摩尔数比）的 G5E4 DNA 混合物20 mmol／L Tris·Cl，
用梯度盐透析的方法组装核小体串实验
实验方法原理 实验材料 非标记的 G5E4 DNA末端标记的 G5E4 DNA 牛血清白蛋白（BSA）试剂、试剂盒 高盐缓冲液低盐缓冲液实验步骤 1. 准备如下的重组混合液（最后加入组蛋白）：约 100 ug／ml 9 份未标记和 1 份末端标记（摩尔数比）的 G5E4 DNA 混合物20 mmol
用逐步盐透析的方法组装核小体模板实验
实验方法原理 实验材料 牛胸腺 DNA放射性标记的 DNA纯化的天然核心组蛋白试剂、试剂盒 NaClTE 缓冲液仪器、耗材 MWCO 透析管实验步骤 1. 准备如下的重组混合液：约 8 ug 未标记的超声破碎的牛胸腺 DNA （作为载体 DNA； 加自 1～2 mg/ml 储液）200 000～40
用逐步盐透析的方法组装核小体模板实验
实验材料牛胸腺 DNA放射性标记的 DNA纯化的天然核心组蛋白试剂、试剂盒NaClTE 缓冲液仪器、耗材MWCO 透析管实验步骤1. 准备如下的重组混合液：约 8 ug 未标记的超声破碎的牛胸腺 DNA （作为载体 DNA； 加自 1～2 mg/ml 储液）200 000～400 000 cpm 单
用微阵列的方法分型单核苷酸多态实验1
用等位基因特异性的微阵列方法进行 SNP 分型试剂、试剂盒GeneChip HuSNP 试剂盒多重引物池1〜24用生物素-T7 标记的引物用生物素-T3 标记的引物对照寡核苷酸B1HuSNP Reference DNA10 X 缓冲液ⅡdNTP仪器、耗材扩增反应管低速带旋转桶滴定板的离心机热循环仪滴
用微阵列的方法分型单核苷酸多态实验2
用普通的微阵列和单碱基延伸的方法分型 SNP实验材料基因组DNA试剂、试剂盒PCR混合液dNTP外切核酸酶 I虾碱性磷酸酶延伸混合液杂交混合液染色液仪器、耗材S-300 柱子GenFlex Tag 阵列FS400 液体台Agilent 扫描仪GeneChip 软件实验步骤展
盐析实验现象
因为蛋白质是亲水性大分子，所以在水溶液中有双电层结构，来保证分子的溶解度平衡并稳定存在。当加入盐时，盐会电离成离子态，离子的电性破坏了蛋白质的双电层结构，从而使其沉降，析出。加入浓酸和浓碱是不行的，苛性的环境将使蛋白质变性。
Percoll非连续性密度梯度离心法单核细胞的分离实验
基本原理：本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法，主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作，且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材·外周血单个核细胞·PBS 1×和PBS 10×（无Ca2+、Mg2+），含0.5mM EDTA·胎牛血清（56℃，30分钟加热灭
核小体的监测方法
许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预
核小体的监测方法
许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预
核小体的监测方法
许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预
盐析剂的使用方法
在中性配合萃取和离子缔合萃取体系中，使用盐析剂可提高被萃取组分的分配系数。盐析剂是一种不被萃取、不与被萃物结合，但与被萃物有相同的阴离子从而使分配系数显著提高的无机化合物。通常盐析剂的阳离子在盐析过程中，因在水溶液中有强烈的水合作用，能吸引大量自由水分子，降低水溶液中自由水分子浓度，可相对增加被萃物
用于PBMC－单核细胞的密度梯度离心分离
PBMC 单核细胞的密度梯度离心分离血液主要由血清和血细胞组成，主要包括红细胞，白细胞和血小板等。白细胞还可以细分为淋巴细胞和单核细胞等。由于这些细胞具有简单的细胞核，统称为外周血单核细胞 (PBMC)。PBMC 单核细胞可通过 Ficoll 密度梯度离心的方法，从血液中进行分离。在 Ficoll
分离方法之盐析
盐析少量的盐（如硫酸铵、硫酸钠、氯化铵等）能促进蛋白质的溶解。当向蛋白质中加入的盐溶液达到一定浓度时，反而使蛋白质的溶解度降低而从溶液中析出，这种作用称为盐析。蛋白质的盐析是一个可逆过程，盐析出的蛋白质稀释后仍能溶解，并不影响蛋白质的活性。采用多次盐析和溶解，可以分离提纯蛋白质。制肥皂（高级脂肪酸钠
关于核小体的实验研究介绍
早在1956年为双螺旋模型提供X衍射证据的Wilkins和另一位科学家Vittorio Luzzati对染色质进行了X衍射研究，发现染色质中具有间隔为10 nm的重复性结构。蛋白质和DNA本身的结构从来不会表现出这种重复性。推测可能是组蛋白和DNA的结合方式迫使DNA折叠或缠绕成具有10 nm周
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
盐析法提取果胶的方法介绍
多价金属盐沉淀法，目前在生产上广泛采用。具体方法是：在果胶液中加入一定量的MgCl2、CuCl2或AlCl3然后用氨等调节pH，使之形成碱式金属盐，此碱式金属盐与果胶形成络合物沉淀出来，然后再经过脱盐漂洗和干燥得到果胶成品。具体流程是：橘皮残渣-复水-灭酶-漂洗-沥干-加酸萃取-过滤-加盐沉析-抽滤
蛋白质的盐析与透析实验
一、实验目的(1)掌握蛋白质盐析沉淀的基本原理与操作。(2)掌握蛋白质透析分离的基本操作。二、实验原理蛋白质是亲水胶体，借助水化膜和同性电荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白质带负电荷)相互排斥作用维持蛋白质胶体的稳定，向蛋白质溶液中加入中性盐可破坏这些稳定因素，使蛋白质沉淀析出，称为盐析。盐析所得到的
人类细胞中巴氏小体的观察实验
实验方法原理 在性染色体发生畸变时,XXX核型的女性体细胞中可观察到两个巴氏小体(图12-1),即除一条X染色体具有正常活性外,其余的X染色体均失活,而在具47,XXY核型的男性体细胞中,也可观察到巴氏小体。对巴氏小体的研究有助于揭示X连锁基因的调控机理、性染色体的进化过程以及解释性染色体畸变患者的
人类细胞中巴氏小体的观察实验
M.L.Barr等人首先发现雌猫的神经细胞间期核中有一个深染的小体,而雄猫却没有。由于这个小体和性别及X染色体数目有关,所以称为X染色质,也叫做巴氏小体(Barrbody)。之后在其他雌性哺乳动物细胞和人类女性的许多细胞中发现有同样的小体。现在一般认为X染色质是两个X染色体之一在间期时发生异固缩而形
最新研究揭示纤维小体中独特模块结构和组装机制
3月25日，记者从中国科学院青岛生物能源与过程研究所（以下简称青岛能源所）获悉，该所代谢物组学研究组解析了一种独特的纤维小体组装模块——双对接模块的结构和组装方式，揭示了纤维小体组装与调控的复杂性和多样性，为纤维小体复杂组装的研究和应用奠定了基础。该成果近日发表于国际期刊《蛋白质科学》。 作为
长非编码RNA调控炎症小体组装激活研究中取得进展
4月3日，中国科学技术大学教授吴缅研究组在国际学术期刊《自然-通讯》（Nature Communications）上在线发表题为The lncRNA Neat1 promotes activation of inflammasomes in macrophages 的研究论文。 在固有免疫反
最新研究揭示纤维小体中独特模块结构和组装机制
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519753.shtm3月25日，记者从中国科学院青岛生物能源与过程研究所（以下简称青岛能源所）获悉，该所代谢物组学研究组解析了一种独特的纤维小体组装模块——双对接模块的结构和组装方式，揭示了纤维小体组装与
盐析的原理
破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素，从而使蛋白质发生沉淀 。 1、破坏了水化层 在高浓度的中性盐溶液中，由于盐离子亲水性比蛋白质强，与蛋白质胶粒争夺与水结合，破坏了蛋白质的水化层。在高浓度的中性盐溶液中，由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力，产生与水化合现象，但它们之间有竞争作用，当大量中性
盐析的定义
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐，可以使蛋白质性质发生改变而凝聚，进而从溶液中析出，这种作用叫作变性，性质改变，是化学反应，无法复原。把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定
盐析的定义
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐，可以使蛋白质性质发生改变而凝聚，进而从溶液中析出，这种作用叫作变性，性质改变，是化学反应，无法复原。把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定
盐析的原理
破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素，从而使蛋白质发生沉淀 。 1、破坏了水化层 在高浓度的中性盐溶液中，由于盐离子亲水性比蛋白质强，与蛋白质胶粒争夺与水结合，破坏了蛋白质的水化层。 在高浓度的中性盐溶液中，由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力，产生与水化合现象，但它们之间有竞争作用，当大量
盐析的概念
盐析（salting out）是指在蛋白质水溶液中加入中性盐，随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。