诊断酶学

诊断酶学:本世纪初临床就开始测定体液中的酶来诊断疾病,如Wohlgemuth早在1908年就测定尿液中淀粉酶(AMY)以诊断急性胰腺炎;30年代临床测定碱性磷酸酶(ALP)用于诊断骨骼疾病,随后发现不少肝胆疾病特别在出现梗阻性黄疸时此酶常明显升高。这些酶成为当时临床实验室的常规测定项目,直到60年代ALP仍是世界上测定次数最多的酶。但在50年代以前,酶测定在检验科常规工作中只占很少一部分。诊断酶学的真正发展还是从50年代用分光亮度法建立了连续监测酶活性浓度方法开始,它可以测定不少用旧的“固定时间法”不能测定的酶,并用于诊断疾病。结果发现乳酸脱氢酶(LD)、天冬酸氨基转移酶(AST)和α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)在诊断急性心肌梗死(AMI)上的灵敏度远远超过其他诊断方法。在60年代初又肯定了肌酸激酶(CK)在诊断AMI比上面几个酶更早出现增高,特异性也高,目前此酶已取代ALP成为世界范围内测定次数最多的酶。同时发现丙氨酸氨基转移酶......阅读全文

肠激酶的酶学特点

肠激酶在体内激活胰蛋白酶原转化为胰蛋白酶, 由于肠激酶的轻链结构在人、牛和猪中保守, 其识别序列Asp-Asp-Asp-Asp-Lys在脊椎动物中也有很强的保守性, 且几乎所有被定序的胰蛋白酶原都具有4个天冬酰胺相连的特征, 此序列在其他的天然蛋白质上又非常罕见, 而肠激酶的活性中心有1个特殊的阳离

肠激酶的酶学特点

肠激酶在体内激活胰蛋白酶原转化为胰蛋白酶, 由于肠激酶的轻链结构在人、牛和猪中保守, 其识别序列Asp-Asp-Asp-Asp-Lys在脊椎动物中也有很强的保守性, 且几乎所有被定序的胰蛋白酶原都具有4个天冬酰胺相连的特征, 此序列在其他的天然蛋白质上又非常罕见, 而肠激酶的活性中心有1个特殊的阳离

酶学的基本理论

酶是一种由活细胞产生的生物催化剂,其本质是蛋白质,在生物的新陈代谢中起着非常重要的作用,它参与生物体几乎所有的化学反应,使新陈代谢有序的进行下去,从而使生命得以延续。1、酶的分类:1961年,国际生物化学联合会把酶分为六大类:氧化还原酶类: AH2+B A+BH2(催化底物时进行了电子反应)转移酶类

卡氏肺孢子虫的病原学诊断和免疫学诊断

1.病原学诊断 可收集痰液或支气管分泌物涂片镜检,但阳性率很低,应用支气管冲洗术可提高检出率。也可进行经皮穿刺肺活检、支气管镜肺活检或开胸肺活检,这些方法虽可靠,但损伤大。2.免疫学诊断 常用方法为IFA、ELISA或补体结合试验。但由于大多数正常人都曾有过肺孢子虫隐性感染,血清中都有特异性抗体存在

卡氏肺孢子虫的病原学诊断与免疫学诊断

1.病原学诊断 可收集痰液或支气管分泌物涂片镜检,但阳性率很低,应用支气管冲洗术可提高检出率。也可进行经皮穿刺肺活检、支气管镜肺活检或开胸肺活检,这些方法虽可靠,但损伤大。2.免疫学诊断 常用方法为IFA、ELISA或补体结合试验。但由于大多数正常人都曾有过肺孢子虫隐性感染,血清中都有特异性抗体存在

生物酶学基础-脂肪酶的性质

脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶,可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应,除此之外还表现出其他一些酶的活性,如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等(Hara;Schmid)。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反应体系的特点,如在油水界面促进酯水解,

生物酶学基础--脂肪酶的生产

脂肪酶的制备方法有提取法、化学合成法和微生物发酵法。提取法资源有限、工艺复杂、产量低;化学合成法成本太高;微生物发酵法的应用前景要远远大于提取法和化学合成法,它不受环境影响,资源丰富,产酶周期短,产物较单纯且成本低,生产上易于管理。商品化脂肪酶主要来源于各种细菌、酵母和真菌等微生物的发酵,有些霉菌可

生物酶学基础脂肪酶的来源

脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子,如蓖麻籽、油菜籽,当油料种子发芽时,脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类,提供种子生根发芽所必需的养料和能量;动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织,在肠液中含有少量的脂肪酶,用于补充胰脂肪酶对脂

微生物果胶酶的酶学性质

国内外科学家利用层析、电泳等手段对果胶酶的酶学性质进行了研究,明确了一些果胶酶的分子量、动力学性质及其影响因素。常用果胶酶纯化方法有:硫酸铵沉淀、丙酮沉淀、离子交换层析以及凝胶过滤色谱等。果胶酶分子量一般在20kD~60kD之间,单体存在,个别以多聚体形式存在,如海栖热袍菌果胶酸裂解酶分子量为115

生物酶学基础酶的生产和制备

酶的生产是指经过预先设计,并且通过人工控制而获得所需要的酶的过程。概括地说,酶的生产方法有提取法、发酵法和化学合成法三种。提取法是最早采用并且一直沿用至今的一种方法。提取法采用各种技术,直接从动植物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来。提取法虽简单易行,但必须要有充足的原材料,这就使提取法的广泛应用受

葡萄糖氧化酶的酶学性质

高纯度GOD为淡黄色粉末,易溶于水,完全不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、乙二醇和甲酰胺等有机溶剂,50%丙酮、66%甲醇都能使其沉淀,可以被弱酸性的离子交换树脂及氧化铝等吸附。GOD 最大光吸收波长为377 和455 nm,在pH 为2.2~8.4,温度为20~70 ℃均可起催化作用,其适宜温度为30

生物酶学基础高温α淀粉酶简介

耐高温α—淀粉酶(High thermostableα-amylase)概述:采用地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis),经发酵,提炼而成,本品具有很好的耐热性,广泛应用于淀粉加工,制糖,味精,酒精,啤酒,柠檬酸,纺织印染,造纸以及其它发酵工业等。本品具耐高温的特性,在高温下液化

生物酶学基础酸性蛋白酶简介

概 述:酒用酸性蛋白酶是采用现代生物技术生产的高科技产品。在酒精发酵过程中,添加适量的酒用酸性蛋白酶,能有效水解原料中的蛋白质、破坏原料颗粒间细胞壁的结构,利于糖化酶的作用,使原料中可利用的碳源增加,从而可提高原料出酒率;另一方面,蛋白酶的水解作用增加醪液中投a一氧基态氮的水平,促进酵母的生长与繁殖

生物酶学基础酶固定化技术工艺

关键在于选择适当的固定化方法和必要的载体以及稳定性研究、改进。 1 吸附法吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但

实验诊断学——骨髓细胞学检测

一、骨髓细胞学检查的临床意义1、确定诊断某些造血系统或非造血系统疾病:白血病、再障、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征,骨髓转移癌、疟疾、黑热病等2、辅助诊断某些造血系统疾病:溶贫、缺铁贫、原发性血小板减少性紫癜及脾功能亢进等。3、鉴别诊断:对原因不明的发热、淋巴结、肝脾肿大、骨痛等行骨髓穿刺检查有助

细菌学诊断技术(一)

  随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊断方

细菌学诊断新技术

    随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊

检验医学(实验诊断学)

第一章  检验医学概述第一节    检验医学(实验诊断学)概述  诊断是医师工作的首要任务之一。诊断(diagnosis)一词原来自希腊文,是辨认和判断的意思。医师通过询问病史,了解病情,体格检查发现体征以及实验室检查和各种先进的器械检查收集各种必要的资料和数据在科学、辩证的基础上进行综合分析,以期

细菌学诊断技术(二)

  5.核酸探针杂交技术原理  根据完成杂交反应所处介质的不同,分成固相杂交反应和液相杂交反应。固相杂交反应是在固相支持物上完成的杂交反应,如常见的印迹法和菌落杂交法。事先破碎细胞使之释放DNA/RNA然后把裂解获得的DNA/RNA固定在硝基纤维素薄膜上,再加标记探针杂交,依颜色变化确定结果,该法是

细菌学诊断新技术

随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊断方法,

细菌学诊断新技术

 随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊断方法

生物酶学基础酶的固定化方法介绍

酶的固定化方法不下百种,归纳起来大致可以分为三类,即载体结合法、交联法和包埋。载体结合法是指将酶固定到非水溶性载体上的方法。根据固定方式的不同,这种方法又可以分为物理吸附法、离子结合法和共价结合法。物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂多为活性碳、多孔玻璃等。离子结合法是指通过离子

关于溶葡萄球菌酶的酶学性质介绍

  溶葡萄球菌酶具有多个催化活性中心,其中内切肽酶、糖苷酶和酰胺酶3个活性域与水解细菌胞壁肽聚糖交联结构的催化活性有关以内切肽酶活性最为重要。除作用于细菌胞壁外,溶葡萄球菌酶还具有结合并降解弹性蛋白质(elastin)的作用,弹性蛋白质的氨基酸序列中约1/3为gly,但溶葡萄球菌酶降解弹性蛋白质的特

生物酶学基础酶的提取和分离纯化

许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎开来。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶

生物酶学基础-固定化酶及应用介绍

1.由于酶的分离与提纯有许多技术性难题,造成酶制剂来源有限、成本高、不利于大规模使用。因此,酶在大规模生产中,使酶能反复使用,是很有经济价值的课题。固定化酶的使用,推动了酶在生产上的应用。固定化酶,就是将酶分子结合在特定的支持物上且不影响酶的功能。用于固定酶的底物有琼脂糖、丙烯酰胺、藻酸钠等。固定化

生物酶学基础纤维素酶简介

纤维素酶是一种对纤维素纤维大分子的水解有特殊催化作用的活性蛋白质,纤维素酶的种类很多,由于Lyocell纤维织物的特殊结构和性能,并不是所有的纤维素酶都能去除Lyocell的原纤维,目前国内开发的用于Lyocell纤维酶处理的酶制剂大多为酸性纤维素酶。由于使用的酶不同,加工时需要pH值和温度也不同。

生物酶学基础中温α—淀粉酶简介

概 述:BAA中温液体α—淀粉酶系引进美国九十年代先进技术,系采用属枯草牙孢杆菌(Bacillus Subtilis) 经深层发酵,精炼而成的产品。它在耐热稳定性,对钙离子的依赖性及液化速度等方面性能均比国内同类产品BF7658优越。本产品广泛应用于饴糖,啤酒,黄 酒,葡萄糖,味精,抗生素等行业,也

简述葡糖氧化酶的结构和酶学性质

  1、葡糖氧化酶的结构:  GOD是同型二聚体分子,含有2个黄素腺嘌呤二核苷酸( FAD)结合位点。每个单体含有2个完全不同的区域:一个与部分FAD非共价但紧密结合,主要为β折叠;另一个与底物β-D-葡萄糖结合,由4个α-螺旋支撑1个反平行的β折叠。   2、葡糖氧化酶的酶学性质:  高纯度GOD

生物酶学基础固定化酶载体的性质

载体树脂的性质强烈影响着固定化酶的催化性能,对于一个特定的酶催化反应,以下载体树脂的性质参数需要被严格选择和平衡。 功能基团树脂功能基团的活化类型、表观结构、分散度以及密度决定酶固定化效率、固定化酶活性和机械稳定性。创科生物科技有限公司提供各种不同功能团的树脂载体。 孔径和表面积通常情况下,大的载体

酶学标准曲线的制作实验

实验方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验步骤一、实验试剂仪器:ALT/GPT试剂 待测标准物 半自动生化分析仪 试管 加样器二、实验操作:1. 稀释试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:三. 实验结果:把测得数