细菌学诊断技术(二)

5.核酸探针杂交技术原理 根据完成杂交反应所处介质的不同,分成固相杂交反应和液相杂交反应。固相杂交反应是在固相支持物上完成的杂交反应,如常见的印迹法和菌落杂交法。事先破碎细胞使之释放DNA/RNA然后把裂解获得的DNA/RNA固定在硝基纤维素薄膜上,再加标记探针杂交,依颜色变化确定结果,该法是最原始的探针杂交法容易产生非特异性背景干扰。 液相杂交法指杂交反应在液相中完成,不需固相支持,优点是杂交速度比固相杂交反应速度快5�10倍。缺点是为消除背景干扰必需进行分离以除去加入反应体系中的干扰剂。 分离杂交DNA探针的方法有两种,一种用羟磷灰石,它仅能与双股DNA结合,单股DNA在和羟磷灰石结合前必须先同一个探针或互补单链杂交成双股DNA才可。当溶液中DNA通过羟磷灰石柱子时,只有双股DNA能吸附,然后再把吸附在柱上的DNA洗脱下来,最后用激活的标记物检测。另一种分离方法运用磁球技术把探针与小磁球连接,再用多核......阅读全文

细菌学诊断技术(二)

  5.核酸探针杂交技术原理  根据完成杂交反应所处介质的不同,分成固相杂交反应和液相杂交反应。固相杂交反应是在固相支持物上完成的杂交反应,如常见的印迹法和菌落杂交法。事先破碎细胞使之释放DNA/RNA然后把裂解获得的DNA/RNA固定在硝基纤维素薄膜上,再加标记探针杂交,依颜色变化确定结果,该法是

细菌学诊断新技术

 随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊断方法

细菌学诊断新技术

随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊断方法,

细菌学诊断新技术

    随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊

细菌学诊断技术(一)

  随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊断方

细菌学诊断中的新技术

随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的细菌诊断技术和方法已广泛用于食品微生物的鉴别。传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。近年来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的细菌学诊断方法,

生物离心机分离培养技术运用到细菌学诊断

在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。  分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。  将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲

细菌学诊断微生物检验

1.标本的采集原则:严格的无菌操作,适宜时机和适当的部位,在抗生素使用之前采集,采样后尽快送检查及做好标记。2.病原菌的检测程序(1)直接涂片镜检:凡在形态和染色性上具有特征的病原菌,可直接涂片染色后镜检,例如痰中查见抗酸性细长杆菌,多为结核杆菌。(2)分离培养:无菌部位采取的血液、脑脊液等标本,可

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。将被检材料接种于适宜培养基,再于固体

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

   在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。   分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。   将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。1、将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲分离菌的单个菌落,移种于另一适宜培养基中培

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。1、将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲分离菌的单个菌落,移种于另一适宜培养基中培

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲分离菌的

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲分离菌的

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。将被检材料接种于适宜培养基,再于固体

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。  分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。  将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲

离心机在细菌学诊断分离培养技术中的应用

在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单独一种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。分离细菌的方法很多,常用的有以下几种。将被检材料接种于适宜培养基,再于固体培养基表面生长的菌落中,选样欲分离菌的

CRISPR分子诊断技术(二)

6    Sherlock和Mammoth两家公司的技术并非横空出世,而是源于张锋和Doudna两家实验室于2015-2018年期间在知名期刊上发表的一系列科研成果。这场学术上的比拼犹如两个武林高手过招,精彩纷呈,让人目不暇接。两个团队互相竞争,也互相学习,开拓了CRISPR分子诊断这一全新

分子诊断常用技术(二)

( 五) 生物芯片1991 年Affymetrix 公司的Fordor利用其所研发的光蚀刻技术制备了首个以玻片为载体的微阵列,标志着生物芯片正式成为可实际应用的分子生物学技术。时至今日,芯片技术已经得到了长足的发展,如果按结构对其进行分类,基本可分为基于微阵列( microarray) 的杂交芯片与

诊断厌氧菌感染的细菌学检查提示

  (1)渗出物革兰染色或培养所见菌落具有形态学特征。  (2)脓性标本常规培养无细菌生长(在硫乙醇酸钠肉汤培养基中或琼脂深处可有细菌生长),革兰染色则见到细菌。  (3)在含卡那霉素和万古霉素的培养基中有革兰阴性杆菌生长。  (4)在培养过程中有大量气体产生,且有恶臭。  (5)在厌氧琼脂平板上有

盘点:分子诊断常用技术(二)

( 五 ) 生物芯片1991年Affymetrix公司的Fordor利用其所研发的光蚀刻技术制备了首个以玻片为载体的微阵列,标志着生物芯片正式成为可实际应用的分子生物学技术。时至今日,芯片技术已经得到了长足的发展,如果按结构对其进行分类,基本可分为基于微阵列( microarray) 的杂交芯片

PCR技术应用二:-骨肿瘤诊断

  骨肿瘤较罕见,恶性骨肿瘤只占全身恶性肿瘤的1%,男多于女,性别比约为1.6 ∶1,均好发于10-30岁间,良性者以骨软骨瘤最多,依次为骨巨细胞瘤、内生软骨瘤 等,恶性者以骨肉瘤最多,依次为软骨肉瘤、纤维肉瘤等.骨恶性肿瘤的发生机理目 前认为是癌基因显性作用与抗癌基因失活的结果,是多种癌基因多阶段

漫谈分子诊断技术50年(二)

  二、核酸序列测定  测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。  (一)第1代

分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术的区别、原理(二)

  二、核酸序列测定  测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。  (一)第1代

快速培养在结核病细菌学诊断中的应用

  近年来全球结核病疫情的回升已经引起了人们的强烈注意。而人口的增加、AIDS合并结核病、耐药结核病和移民是引起结核病疫情回升的四个重要原因。严重地危害了广大人民的健康水平。结核病当今全球范围最具有临床意义的感染性疾病之一,是单因所致的感染性疾病中死亡率最高的疾病,是一个严重的公共卫生问题。WHO1

一文读懂分子诊断常用技术(二)

二核酸序列测定测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。(一)第1代测序1975年

分子生物学实验诊断技术(二)

(三)Northern blot用于RNA分析,电泳条件与转膜方法与Southern blot不同外,RNA不必变性与中和,电泳时加电醛防止RNA发夹结构形成。其它步骤相同。为了防止RNase水解需分析的mRNA,尽可能将器皿在160-180℃干热灭菌8小时以上,也可加0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC

痰液细菌学检验的标准化操作程序(二)

2.6 细菌鉴定:在痰标本的直接涂片镜检结果的指导下进行分离鉴定:根据痰液涂片直接镜检结果中被炎性包裹及脓细胞吞噬的细菌的革兰染色后的形态特征为指引,阅读平皿中菌落形态并作菌落细菌的革兰染色,选择与镜检结果一致的细菌(该步骤应该在经验丰富的高资历微生物检验老师的带领下进行),必要时进行纯培养,再根据

细菌学检测法

  当水体污染程度增加时,腐生菌总量大大增加,因此可将其用于指示水体受有机污染的程度。但是,直接检验水中各种病源菌,方法复杂,难度较大,且结果也不能保证绝对安全。所以,在实际工作中,经常以检验细菌总数,特别是检验作为粪便污染的指示细菌如大肠菌群来间接判断水的卫生学质量。水体污染的两项常用细菌指标为细

尿液细菌学检查

尿液细菌学检查  1.中性尿收集法,为临床最常用方法。   女性:用肥皂水清洗外阴部后,再用清洁水冲洗,用无菌棉球或纱布擦干,将阴唇分开排尿,将前段弃去10-20ml,留中段尿5-10ml于一灭菌瓶内。   男性:用肥皂水清洗尿道口后再用清水冲洗,留中段尿。包皮过长者应将包皮翻开冲洗。   2.膀胱