免疫化学法测定个别蛋白质

散射比浊法和透射比浊法由于测定方法简便、快速而被广泛使用。许多试剂盒供应抗血清及标准蛋白质,即可建立此测定法。此技术可以测定抗原-抗体复合物(沉淀颗粒)形成的量(终点法),亦可采用测定复合物形成的速率(动力学方法,即通过散射浊度计测定抗原-抗体混合反应复合物颗粒形成的时间,即反应速率。一定条件下,反应速率与反应体系中抗原的含量直线相关,医学教|育网搜集整理可以通过制备标准曲线而计算)。现已有设计完善的带微电脑进行数据处理的散射浊度计和透射浊度计,以免疫化学系统(immuno-chemicalsystem,ICs )可供应。免疫扩散法不需昂贵设备,放射免疫法则需要液体闪烁计数器及应用放射性同位素。......阅读全文

强化督查:个别企业临时停产躲避检查

  6月14日,28个督查组共检查491家企业(单位),发现338家企业存在环境问题。存在问题的企业中,属于“散乱污”问题企业的96家,未安装污染治理设施的46个,治污设施不正常运行的29个,存在VOCs治理问题的73个。  近两天督查发现,个别企业采取临时停产、逃离现场等方式,拒绝、躲避现场检查。

斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验

实验材料待测蛋白质样品试剂、试剂盒10%三氯醋酸(TCA)考马斯亮蓝凝胶染色液考马斯亮蓝凝胶脱色液仪器、耗材Whatman 3 MM 滤纸实验步骤1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;3. 将滤纸凉干,大约需要 15 mi

K氏微量定氮仪法测定蛋白质

  2 K氏微量定氮仪法  3 K氏半微量定氮仪法 (2 、 3原理一样)  操作方法大同小异,半微量法消化后,定容100ml,然后吸25ml蒸馏吸收液吸收。  N(V2-V1)0.014  W*10/100  计算总氮%=(N(V2-V1)×0.014)/(W×10/100)×100  对于微量定

folin酚试剂法测定蛋白质含量的原理

  此法的显色原理与双缩脲法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色(

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

280-纳米光吸收法测定蛋白质浓度实验

实验方法原理由于蛋白质分子中常酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外 280 nm 波长处有最大吸收峰,其吸收值与蛋白质浓度成正比,故可用 280 nm 波长吸收值大小来测定蛋白质含量。实验材料待测蛋白质样品试剂、试剂盒实验用缓冲液(空白对照)仪器、耗材分光光度计(配备紫外档)石英比色杯用于溶液

双缩脲法皮尼克法测定蛋白质

  1 原理:  双缩脲在碱性条件中,能与CuSO4结合成红紫色的络合物。pro分子中含有肽链与双缩脲结构相似,也呈此反应。本法直接用于测定像小麦粉等固体试样的pro含量。但作为铜的稳定剂,酒石酸钾钠比甘油好些。小麦粉中的pro能直接地一边抽出一边进行定量。  2 试剂  ⑴甘油作为稳定剂:取10m

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

  一、 实验目的   1、 了解测定蛋白质的常用方法   2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。   二、 实验原理   在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋

燃烧法测定蛋白质含量可以辨别掺杂吗

 在酸性条件下,考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合,导致最大吸收峰由465 nm 变为595 nm,同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合,测量在595 nm处的吸收值,在建立由一系列稀释的BSA建

斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验

斑点滤膜结合法             实验方法原理 实验材料 待测蛋白质样品

280-纳米光吸收法测定蛋白质浓度实验

280纳米(A280)光吸收法             实验方法原理 由于蛋白质分子中常酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外 280 nm 波长处有最大吸收峰,其吸收值与蛋白质

紫外分光光度法测定蛋白质

  1 原理:  pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量。  2 试剂:  (1) 0.1mol/l

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量

实验目的掌握凝胶层析的基本原理。学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶

斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验

实验方法原理 实验材料 待测蛋白质样品试剂、试剂盒 10%三氯醋酸(TCA)考马斯亮蓝凝胶染色液考马斯亮蓝凝胶脱色液仪器、耗材 Whatman 3 MM 滤纸实验步骤 1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;3. 将滤纸凉干

怎样用双缩脲法测定蛋白质

(一)实验原理双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓

考马斯亮蓝法测定蛋白质的公式

公式是根据测量结果自己算出来的:考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立 的1种测定微量蛋白质的方法L5],考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力,通过疏水作用与蛋白质相结合,形成的蓝色蛋白质一染料复合物,在595 nm处有最大吸光度,复合物1 h内保持稳定。在一定的蛋

如何用凯氏定氮法测定蛋白质

  一、原理  凯氏法测定试样含氮量,即在催化剂存在下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵,加入强碱(NAOH)并蒸馏使氨溢出,用硼酸吸收后,用标准盐酸溶液滴定测出含氮量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。  二、试剂  (1)、硫酸铜  (2)、硫酸钾  (3)、硫酸(密度为1.8

280-纳米光吸收法测定蛋白质浓度实验

实验方法原理 由于蛋白质分子中常酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外 280 nm 波长处有最大吸收峰,其吸收值与蛋白质浓度成正比,故可用 280 nm 波长吸收值大小来测定蛋白质含量。实验材料 待测蛋白质样品试剂、试剂盒 实验用缓冲液(空白对照)仪器、耗材 分光光度计(配备紫外档)石英比色杯

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测

胸腔积液免疫化学检查的临床意义

  在病理情况下,如胸膜毛细血管静水压增加或胶体渗透压下降,或者胸腔内负压和胸腔液内胶体渗透压增加,均可导致胸腔液产生过多而吸收明显减少,从而形成病理性胸腔积液(pleural effusion),又称为胸水。常见的原因有胸膜或邻近组织感染,原发性或转移性肿瘤等。胸腔积液检查除传统的细胞学、生物化学

胸腔积液免疫化学检查的注意事项

  不合宜人群: 暂时不明确  检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。  检查时要求:积极配合医生  胸腔积液标本采集是通过胸腔穿刺方法获取。抽取标本后要立即送检,以免细胞变性、破坏或出现凝块而影响结果。

筛查结肠癌粪便免疫化学试验

   澳大利亚Repatriation总医院Smith医师等的研究发现,对于结肠癌的筛查,免疫化学法检测粪便中血红蛋白(FIT)比愈医学教育网创木脂便潜血试验(GFOBT)更为有效。  2351名接受结肠癌筛查的受试者和161例有症状的结肠癌患者,同时应用FIT和GFOBT取样工具在家中连续收集粪便

上海科技大学免疫化学所挂牌

  10月12日,上海科技大学免疫化学研究所挂牌仪式在中国科学院上海浦东科技园举行。中科院上海分院院长江绵恒,上海市委常委、浦东新区区委书记徐麟,上海市副市长沈晓明等相关领导,以及中国科学院院士饶子和、沈文庆、陈晓亚等科研人员参加了仪式。   江绵恒向国际著名生物技术研究机构——美国Scripps

胸腔积液免疫化学检查的检查过程

  1、癌胚抗原(CEA):CEA是一种分子量较大的糖蛋白,当积液中CEA>20μg/L,积液CEA/血清CEA比值>1时,应高度怀疑为癌性积液。  2、补体:系统性红斑狼疮(SLE)和类风湿性关节炎(RA)引起的胸腔积液中,总补体活性(CH50)、C3、C4等补体成分降低,若积液CH50或C4减低

概述免疫化学分析检测黄曲霉

  利用具有高度专一性的单克隆抗体或多克隆抗体设计的黄曲霉毒素的免疫分析方法,也是最常用的黄曲霉毒素检测方法.这类方法通常包括放射免疫分析方法(radioimmunoassay,ria),酶联免疫法(enzyme-linked of immunosorbent assay,elisa)和免疫层析法(

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的原理

实验原理       考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。

影响考马斯亮蓝法测定蛋白质的因素

1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg.这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多.(2)测定快速、简便,只需加一种试剂.完成一个样品的测定,只需要5分钟左右.由于染料与蛋白

微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质

1)原理同常量凯氏定氮法。2)主要仪器①凯氏烧瓶(100mL)。②微量凯氏定氮蒸馏装置3)试剂①0.0100mol/L盐酸标准溶液。②20g/L硼酸吸收液:称取20g硼酸溶解于1000mL热水中,摇匀备用。③其他试剂同常量凯氏定氮法。4)操作方法(1)样品消化    精密称取均匀固体样品0.2~2.

凝胶层析(gel-chromatography)法测定蛋白质分子量

一、实验目的1.了解凝胶层析的基本原理。2.掌握利用凝胶层析法测定蛋白质分子量的实验技能。二、实验原理凝胶层析 (gel chromatography)是20世纪60年代发展起来的一种分离分析方法。其法有许多同义词如凝胶过滤、分子排阻层析、分子筛层析、凝胶渗透层析等。凝胶层析是利用具有一定孔径大小的