小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养主要试剂75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、细胞基础培养液 主要设备35 mm培养皿、60 mm培养皿、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、冻存管、眼科剪、眼科弯镊、离心机实验材料怀孕13.5天【将成年雌、雄小鼠放在同笼中饲养,使其自由交配,待成功交配后,以检到阴道栓的时间记为怀孕0.5天(0.5dpc)。用滴管轻触阴道口处,若有乳白色、固态胶状物即阴道栓】的小鼠(CF1品系或ICR等品系【小鼠的品种和品系很多,是实验动物中培育品系最多的动物。目前世界上常用的近交品系小鼠约有250多个,均具有不同特征。在干细胞培养中经常用到的小鼠品系有CD-1、ICR、C57BL/6等。CF1和ICR品系的小鼠产仔率高,性价比较高,并且CF1品系的小鼠来源的饲养层细胞适合培养人的胚胎干细胞。】)。实验步骤(1)实验准备:准备3个100 mm培养皿、2个60 mm......阅读全文
原代胚胎成纤维细胞培养
实验方法原理细胞培养是模拟机体内生理条件,将细胞从机体内取出,在人工条件下培养,使细胞生存、生长、繁殖和传代,从而可以进行细胞生命过程、细胞癌变等问题的研究。由体内直接取出组织或细胞进行细胞培养叫做原代细胞培养,也有的把第1代细胞与传10代以内的细胞培养统称为原代细胞培养。一般来说,用幼嫩状态的组织
原代胚胎成纤维细胞培养
实验器材手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。实验试剂无Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM
原代胚胎成纤维细胞培养
原代胚胎成纤维细胞培养 实验方法原理 细胞培养是模拟机体内生理条件,将细胞从机体内取出,在人工条件下培养,使细胞生存、生长、繁殖和传代,从而可以进行细胞生命过
小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养主要试剂75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、细胞基础培养液 主要设备35 mm培养皿、60 mm培养皿、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、冻存管、眼科剪、眼科弯镊、离心机实验材料怀孕13.5天【将成年雌、雄小鼠放在同笼中饲养
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养
实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 孕鼠试剂、试剂盒 PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材 眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离
细胞技术专题:原代胚胎成纤维细胞培养
实验器材手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。实验试剂无Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
胰酶消化法1 胰酶消化法2 实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗相关研究。实验方法胰酶消化法1胰酶消化法2实验方法原理将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
胰酶消化法1 胰酶消化法2 实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验_胰酶消化法2
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)分子生物学研究;(3)基因治疗相关研究。实验方法原理将小鼠的成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料小鼠试剂、试剂盒PB
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验_胰酶消化法1
实验方法原理将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料孕鼠试剂、试剂盒PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离心管手术
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,
斑马鱼胚胎细胞的培养——原代培养
实验方法原理收集胚胎,除去绒毛膜,用胰蛋白酶分散胚胎细胞,然后在胚胎成纤维细胞饲养层上培养从斑马鱼囊胚和原肠期胚获得的原代细胞。实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA胚胎成纤维细胞饲养层人重组白血病抑制因子试剂、试剂盒LDF基础培养液LDF原代培养液LDF维持培
以胚胎小鼠为例进行原代培养的方法
1.取材:将孕鼠拉颈椎处死,投入75%酒精浸泡数秒消毒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织,打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的消毒器械。最后取出双角子宫置于无菌平皿内。2.用Hanks液洗涤3次,剪开子宫取出胚胎。除去子宫、血液和筋膜等组织。3.用弯头剪
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化
PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。 在体外培养原代细胞时,为了保
大鼠肺成纤维细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、
大鼠肺成纤维细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、
大鼠肺成纤维细胞原代培养实验
实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 Wistar乳鼠试剂、试剂盒 PBS牛血清青霉素链霉素EDTA胰酶碘酒酒精仪器、耗材 绵球科直剪眼科弯剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿塑料
成纤维细胞的原代培养相关介绍
成纤维细胞的原代培养可用酶消化法或组织块法,其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常,以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在接种后5~10min即可见细胞以伪足初期附着,与 底物形成一些接触点;然后细胞逐渐呈放射状伸展,胞体的中心部分亦随之变扁平;最快者大约在接种后30min,细胞
毛冠鹿胚胎有限细胞系的原代培养方法
毛冠鹿细胞原代培养参见施立明等的方法,在无菌条件下取出毛冠鹿胚胎的肺和肾组织,用含双抗(青霉素、链霉素各0.1U/mL)的磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3次,去血污,再用GIBCO199培养液洗1次。在无菌培养皿中剪成1mm×1mm×1mm大小的组织块,置培养瓶中贴壁,翻转180°,CO2培养箱内静置3
小鼠胚胎成纤维细胞传代培养
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞传代培养主要试剂0.05%Trypsin、细胞基础培养液、DPBS主要设备100 mm培养皿、15 mL离心管、倒置显微镜实验步骤(1)预先37℃温热细胞基础培养液及0.05%Trypsin。(2)用枪头吸弃培养皿中的培养液,并用DPBS冲洗一遍,然后加入2 mL 0.05
胚胎小鼠纹状体神经干细胞分离培养鉴定_原代传代培养
实验材料孕13d的昆明种二级小鼠试剂、试剂盒胎牛血清青霉素链霉素胰酶阻断剂葡萄糖台盼蓝蔗糖酚红磷酸氢二钾磷酸氢二钠FITC 偶联荧光抗小鼠二抗氯化钠氯化钾碘酒乙醇仪器、耗材解剖剪虹膜剪眼科剪离心机自动双重纯水蒸馏器微孔滤膜滤器培养箱体视显微镜无菌超净工作台培养瓶96孔细胞培养板24孔细胞培养板6 孔
科学家攻克胚胎改造技术,“设计婴儿”成现实
在英国,如果一项关于胚胎改造技术的新法案明年能获得通过,那么2015年将有可能成为人类历史上另一个具有里程碑意义的年份。 对于胚胎学乃至整个人类历史而言,其意义将不亚于1978年7月25日,人类历史上的第一位试管婴儿在英国曼彻斯特的奥德姆总医院诞生。 这项新法案的内容,是允许医生们将一项名为
小鼠胚胎成纤维细胞MEF培养相关知识总结
小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎
胚胎干细胞中饲养层细胞的原代培养实验材料和步骤
实验材料12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、双抗、解剖器、培养箱、超净台实验步骤1.性成熟小鼠合笼(♀∶♂=2∶1)2.每天观察小鼠,见阴道栓后确定为怀孕0.5d。3.取12.5d孕鼠,断颈处死,在酒精中泡数秒消毒。控干酒精后置于一个无菌的培养皿中。4.无菌条件下暴露子宫。每打开一层要换一
斑马鱼胚胎细胞的培养——成纤维细胞饲养层
实验方法原理通过用链酶蛋白酶除去绒毛膜、用添加成分的 FGF 培养液培养细胞和采用不同的胰蛋白酶消化筛选成纤维细胞,用原肠胚期斑马龟的胚胎成纤维细胞制备饲养层 [ Sun et al., 1995a ]。实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA受精后8h的胚胎FB
小鼠胚胎成纤维细胞MEF培养相关知识总结2
网友观点是:1、关于如何确底胚胎期12.5d~13d的小鼠?希望大家能够介绍一下自己所采用的方法,集思广益。我所采用的方法是选择同一天出生的三对小鼠,到成熟(8~10 w)后,分三周合笼,(每周合笼一对),然后待最早合笼的小鼠产崽后,再取另两个雌鼠的胚胎。不知道这样行不行,也没注意别人是怎样做的。另