连续梯度法纯化闭环DNA
实验概要本实验介绍了氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法(即连续梯度法)纯化闭环DNA的原理及操作步骤等。实验原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。许多年来，纯化大量质粒 DNA 的首选方法是 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法.但由于这种方法耗时费钱，于是发展了许多其他方法，包括差异沉淀法和柱层析法.尽管如此，许多坚持传统的人仍然认为，用 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法纯化的质粒 DNA 是最纯最好的.由于用 CsCl- 溴化乙锭梯度密度离心法纯化的闭环 DNA 有宿主菌的小片段 DNA 和 RNA 的污染，这些小片段比质粒 DNA 需要更长的是 ianzaiCsCl- 溴化乙锭梯度中达到平衡.因此当闭环 DNA 达到平衡时，小片段分子仍在不同梯度均与分布.这一问题可以......阅读全文
连续梯度法纯化闭环DNA
实验概要本实验介绍了氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法(即连续梯度法)纯化闭环DNA的原理及操作步骤等。实验原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。许多年来，纯化大量质粒 DNA 的首选方法是 CsCl
连续梯度的概念
中文名称连续梯度英文名称continuous gradient定 义在层析、电泳或离心中，由于各组分分离的需要，可将介质或凝胶按密度、成分浓度或pH等制备成连续变化的梯度。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
组织脱水为什么要经过连续梯度的乙醇
组织脱水经过连续梯度的乙醇主要原因是使脱水效果更好。一般情况下的梯度酒精脱水是85%酒精-95%酒精-无水酒精的梯度进行脱水。若直接用高浓度酒精脱水，高浓度酒精会使生物材料表面急剧脱水形成一层类似于保护膜的结构，影响到内部材料的脱水。
用Nycodenz○R不连续梯度溶液纯化酵母线粒体
试剂和器材： 1. 酵母原生质体制备于山梨醇缓冲液中；2. NycoprepTM Universal（600g/L Nycodenz）；3. Nycodenz○R工作溶液：500g/L Nycodenz；4. 山梨醇缓冲液：0.6mol/L山梨醇、20mmol/L Mes-KOH，pH6.0；5.
超速离心分离技术密度梯度离心法
密度梯度区带离心法是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡，在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。此方法主要依据颗粒与介质间的密度差（ρ－ρ０）不同进行分离的。适用于那些沉降系数相差不大而密度值却有明显差别的颗粒，也就是那些Ｓ值相近而ρ值相远的颗粒。惰性梯
高速大容量冷冻离心机梯度的制备方法
高速大容量冷冻离心机梯度的制备方法有阶梯梯度法、混合梯度法和离心平衡法等。一、阶梯梯度法： 手工由底部向上分层加入渐浓的介质溶液，由于扩散作用自然形成连续梯度。扩散时间受温度、阶梯厚度和阶梯密度差的影响。二、混合梯度法： 利用自动梯度仪自动调节梯度斜率、形状和浓
高速大容量冷冻离心机梯度的制备方法
高速大容量冷冻离心机梯度的制备方法有阶梯梯度法、混合梯度法和离心平衡法等。一、阶梯梯度法：手工由底部向上分层加入渐浓的介质溶液，由于扩散作用自然形成连续梯度。扩散时间受温度、阶梯厚度和阶梯密度差的影响。二、混合梯度法：利用自动梯度仪自动调节梯度斜率、形状和浓度，可同时制备多个梯度。制成的梯度放置过久
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质受很多条件的制约，理想的梯度介质应满足以下条件：1、对细胞无毒。2、能形成具有足够密度的等渗介质。3、不渗入细胞。4、分级分离后容易从细胞中除去。5、形成梯度的粘度低。目前，用来分离细胞的梯度介质主要有Percoll、Nycodenz、Metrizamide、Fic
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质受很多条件的制约，理想的梯度介质应满足以下条件： 1、对细胞无毒。 2、能形成具有足够密度的等渗介质。 3、不渗入细胞。 4、分级分离后容易从细胞中除去。 5、形成梯度的粘度低。 目前，用来分离细胞的梯度介质主要有Percoll、Nycode
血清脂蛋白的离心分离技术
血清脂蛋白是由血液中脂质与某些特异的蛋白质组成的一类不均一的复合物。因其所含脂与载脂蛋白的比例不同，其密度范围在0.96g/ml(或更低)到1.21g/ml之间。纸电泳中显示四条带，即：乳密微粒，极低密度脂蛋白（VLDL,也称前β脂蛋白），低密度脂蛋（LDL，也称β脂蛋白），高密度脂蛋白（HDL，也
密度梯度的形成和收集
生物医学研究中，要求分离细胞、病毒、核酸和蛋白质等，往往来用速度区带离心或等密度离心方法。离心后，颗粒按不同大小、形状或密度，位于不同的层次。速度区带离心或等密度离心均需通过密度梯度进行。根据离心沉降理论，在离心力场中，各种颗粒的沉降速度。 其中梯度介质的密度。因此，梯度介质在离心时起分
落地式大容量冷冻离心机分离细胞器和细胞膜概述
在细胞生物学研究中，亚细胞的分级分离是zui基础也是zui关键的步骤。研究细胞和细胞结构成分需要分离特定的膜相系统和细胞器，包括细胞膜、高尔基体、内质网、细胞核、线粒体、溶酶体、过氧化物酶体和细胞骨架等，有时还需要分离高尔基体和内质网分泌的囊泡。 为了进一步研究细胞器的
落地式大容量冷冻离心机分离细胞器和细胞膜概述
在细胞生物学研究中，亚细胞的分级分离是最基础也是最关键的步骤。研究细胞和细胞结构成分需要分离特定的膜相系统和细胞器，包括细胞膜、高尔基体、内质网、细胞核、线粒体、溶酶体、过氧化物酶体和细胞骨架等，有时还需要分离高尔基体和内质网分泌的囊泡。为了进一步研究细胞器的核膜，需要将已分离的细胞器进一步破碎和分
离子交换层析的洗脱相关信息介绍
已结合样品的离子交换前，可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱，也可同时改变pH与离子强度。为了使复杂的组份分离完全，往往需要逐步改变pH或离子强度，其中最简单的方法是阶段洗脱法，即分次将不同pH与离子强度的溶液加入，使不同成分逐步洗脱。由于这种洗脱pH与离子强度的变化大，使许多洗
氯化铯溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA实验（二）
实验方法原理通过不连续或预先形成的氯化铯（CsCl）梯度离心，可在离心管中获得含有不同浓度 CsCl 的溶液分层，样品位于中层（三级梯度法）或底层（两级梯度法）。实验材料粗制质粒试剂、试剂盒CsCl溴化乙锭TE仪器、耗材皮下注射针头折光仪一次性注射器实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液CsCl ( 固
离心机在血清脂蛋白分离上的技术应用
血清脂蛋白是由血液中脂质与某些特异的蛋白质组成的一类不均一的复合物。因其所含脂与载脂蛋白的比例不同，其密度范围在0.96g/ml或更低至1.21g/ml之间。纸电泳中显示四条带即：乳密颗粒，极低密度脂蛋白，低密度脂蛋白，高密度脂蛋白。每种脂蛋白还可以分为更多的亚组分。 用电泳法分离含载脂蛋白
高速离心机分离血清脂蛋白
用电泳法分离含载脂蛋白较高的组份(HDL，VHDL)比较成功，而离心分离法则适合用于各种密度的血清脂蛋白分离。血清脂蛋白是由血液中脂质与某些特异的蛋白质组成的一类不均一的复合物。因其所含脂与载脂蛋白的比例不同，其密度范围在0.96g/ml或更低至1.21g/ml之间。纸电泳中显示四条带即：乳密颗粒，
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法，也称考马斯蓝染色法（coomassie blue staining）。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法，也称考马斯蓝染色法（coomassie blue staining）。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在
原代肺泡上皮细胞的体外分离培养
1、完全无血液残留肺脏组织：2、消化肺组织：常用细胞消化酶：胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化，或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞：原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法：（1）密度梯度离心法：密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同
离子交换层析的洗脱操作方法
已结合样品的离子交换前，可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱，也可同时改变pH与离子强度。为了使复杂的组份分离完全，往往需要逐步改变pH或离子强度，其中最简单的方法是阶段洗脱法，即分次将不同pH与离子强度的溶液加入，使不同成分逐步洗脱。由于这种洗脱pH与离子强度的变化大，使许多洗脱体
关于离子交换层析的操作—－洗脱的具体内容介绍
已结合样品的离子交换前，可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱，也可同时改变pH与离子强度。为了使复杂的组份分离完全，往往需要逐步改变pH或离子强度，其中最简单的方法是阶段洗脱法，即分次将不同pH与离子强度的溶液加入，使不同成分逐步洗脱。由于这种洗脱pH与离子强度的变化大，使许多洗
缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶的概念
中文名称缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶英文名称buffer-gradient polyacrylamide gel定 义凝胶缓冲液成分有pH、离子强度或盐种类等连续或不连续梯度变化的聚丙烯酰胺凝胶。旨在提高凝胶电泳分离的范围和分辨力。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶的定义和用途
中文名称缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶英文名称buffer-gradient polyacrylamide gel定 义凝胶缓冲液成分有pH、离子强度或盐种类等连续或不连续梯度变化的聚丙烯酰胺凝胶。旨在提高凝胶电泳分离的范围和分辨力。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
高比能量动力锂离子电池高镍正极材料研发获阶段性进展
国家重点研发计划“新能源汽车”重点专项2016年度立项项目“高比能量动力锂离子电池开发与产业化技术攻关”在高镍正极材料研发方面取得突破性进展。 项目研发团队在第一阶段通过基础配方实验，解决了高镍系材料放电比容量低、首效低的技术难题，结合前驱体控制结晶合成技术、富氧气氛二次固相合成技术和配方调整
沉淀法、过滤法、蒸馏法的区别
一沉淀法：固液分离。有时为了加速沉淀，可以加入一些凝聚剂，如明矾、活性炭等。二过滤法：固液分离。但是固体必须是不溶于水的才行。三蒸馏法：液液分离。利用沸点不同，沸点低的先蒸馏出来，沸点高的后蒸馏出来。
质膜的液态二相离心分离
用葡聚糖（Dextran）和聚乙二醇（Polyethyleneglycol,PEG）二相不连续梯度分离纯化动植物样品的细胞膜片断（特别是质膜）的方法始于1989年（文献1）。这种方法的特点是快速，操作简单，重复性好。只需要低速离心机（4,000rpm），分离成本低。用PEG和Dextran 混合后再
质膜的液态二相离心分离
用葡聚糖（Dextran）和聚乙二醇（Polyethyleneglycol,PEG）二相不连续梯度分离纯化动植物样品的细胞膜片断（特别是质膜）的方法始于1989年（文献1）。这种方法的特点是快速，操作简单，重复性好。只需要低速离心机（4,000rpm），分离成本低。用PEG和Dextran 混合
超速离心法纯化病毒实验——等密度梯度离心
实验方法原理离心过程中 CsCl 随离心力而下沉，形成连续梯度，上部密度小而下部密度大，离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒CsCl仪器、耗材离心机实验步骤在每毫升病毒悬液中，加入 CsCl 约 1 g, 混匀，4℃以 40 0
内标法与外标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被