用Nycodenz○R不连续梯度溶液纯化酵母线粒体
试剂和器材： 1. 酵母原生质体制备于山梨醇缓冲液中；2. NycoprepTM Universal（600g/L Nycodenz）；3. Nycodenz○R工作溶液：500g/L Nycodenz；4. 山梨醇缓冲液：0.6mol/L山梨醇、20mmol/L Mes-KOH，pH6.0；5. 山梨醇缓冲液（2×）：1.2mol/L山梨醇、40mmol/L Mes-KOH，pH6.0；6. 悬浮缓冲液：0.6mol/L山梨醇、20mmol/L Mes-KOH，pH7.4；7. 按要求向溶液加入蛋白酶抑制剂；8. 高速离心机，配有8×50ml规格固定角转子；9. 超速离心机，配有可容纳12—13ml管吊桶式转子；10. Dounce匀浆器（约40ml紧密配制，Wheaton A型）；11. Dounce匀浆器......阅读全文
用Nycodenz○R不连续梯度溶液纯化酵母线粒体
试剂和器材： 1. 酵母原生质体制备于山梨醇缓冲液中；2. NycoprepTM Universal（600g/L Nycodenz）；3. Nycodenz○R工作溶液：500g/L Nycodenz；4. 山梨醇缓冲液：0.6mol/L山梨醇、20mmol/L Mes-KOH，pH6.0；5.
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
土壤微生物总DNA的提取方法比较
实验概要通过对比不同DNA提取及纯化方法，选择和优化适合于土壤样品不同分子量DNA提取及纯化的技术路线。实验原理土壤是微生物最大的栖息地，20世纪80年代，微生物学家采用免培养(culture-in-dependent)方法，即直接从土壤中提取微生物总DNA的技术，使得在基因水平研究这些未培养微生物
亚细胞构造的离心分离典型实验
一）简介：用简易的差分离心结合各种型式的密度梯度离心可以分离和纯化各种亚细胞器。研究者也可以根据自己的设备情况对实验参数做一定的改动，也可以更多地利用速率-区带密度梯度离心或等密度离心来简化实验过程和提高分离纯度。二）实验：ⅰ）匀浆制备： 鼠肝12克加入0.25M蔗糖与5mM Tris-HCL(PH
不连续Nycodenz梯度溶液中原代细胞溶酶体的分离
试剂和器材： 1.匀浆介质：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2.NycoprepTM Universal；3.磷酸缓冲液pH7.4（50mmol/L）4.NycoprepTM Universal稀释剂：6mmol/L乙二胺四
不连续Nycodenz梯度溶液中原代细胞溶酶体的分离
不连续Nycodenz梯度溶液中原代细胞溶酶体的分离试剂和器材：1.匀浆介质：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2.NycoprepTM Universal；3.磷酸缓冲液pH7.4（50mmol/L）4.NycoprepTM
酵母GST蛋白纯化方法
GST Fusion Protein Purification from Yeast5 ml overnight culture of your favorite yeast in your favorite medium.Inoculate 50 ml and grow 30o C shaking
细胞的离心分离基础和分离实例（五）
例4：肝细胞的不连续密度梯度分离这种方法适用于从肝窦状细胞（Sinusoidal）中除去红细胞和主质细胞（parenchymal）,离心结果是让红细胞沉淀，内皮细胞（Sinusoidal）浮上。实验需要的基本设备和溶剂：l 一台带甩平转头的低速、低温离心机；l GBSS；l 在无NaCl的GB
用冻融法制备的Nycodenz予形成梯度分离细胞器
用密度梯度离心分离亚细胞构造往往需要预先制备蔗糖或其他合适梯度材料的密度梯度，操作比较复杂。利用新型的梯度材料Nycodenz (Norway，Nycomed pharma AS公司)用冻融法制备凸指数与凹指数共存的曲线梯度，利用超速离心机的水平转头可以简便地分离出亚细胞构造中线粒体，高尔基
细胞的离心分离基础和分离实例（四）
例2. 从人血中分离红细胞，单核（白）细胞，中性（白）细胞 i. 新鲜人血（3～5）ml 用抗凝剂处理。 ii. 15ml 离心管中先注入5ml 分离液Polymorphprep（Nycomed Pharma A/S 公司产品）， 然后铺上用抗血凝剂处理过的人全血5ml 。 iii. 台式低速离心
细胞的离心分离基础和分离实例（一）
利用细胞的特性[尺寸、密度、电特性、表面(抗原)性质，光散射特性等等]可以用各种方法分离和纯化细胞。离心分离是利用不同尺寸和密度的细胞在离心场中沉降行为的不同，从组织匀浆或血液中分离纯化的技术。用离心技术分离和纯化细胞主要依赖的方法是差分离心、速率－区带密度梯度离心、等密度离心和利用特殊转头的细胞浮
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质受很多条件的制约，理想的梯度介质应满足以下条件：1、对细胞无毒。2、能形成具有足够密度的等渗介质。3、不渗入细胞。4、分级分离后容易从细胞中除去。5、形成梯度的粘度低。目前，用来分离细胞的梯度介质主要有Percoll、Nycodenz、Metrizamide、Fic
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质受很多条件的制约，理想的梯度介质应满足以下条件： 1、对细胞无毒。 2、能形成具有足够密度的等渗介质。 3、不渗入细胞。 4、分级分离后容易从细胞中除去。 5、形成梯度的粘度低。 目前，用来分离细胞的梯度介质主要有Percoll、Nycode
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－三
表（三）metrizamide及其溶液的性质（20℃）浓度密度g/ml折射率粘性渗透率百分比浓度％（W/V）Molar00.0000.99821.33301.00100.1271.05121.34831.3107200.2531.10621.36461.6180300.3801.16121.3809
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－二
四）碘盐自形成梯度：（ Nycodenz或 metrizamide） 这二种梯度材料在固定角式转头或垂直管转头，近垂直转头离心过程中会用较短的时间就可以自形成密度。和重金属盐一样，离心力、转头种类、离心时间对自形成梯度的形状都有很大的影响。由于碘盐的粘性系数对温度很敏感，很小的温升也会因
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－一
用 CsCl，Percoll, Nycodenz, metrizamide作自形成密度梯度离心一）概述：近年来用重金属盐（主要是 CsCl）分离生物大分子的平衡等密度离心；用 Percoll（由瑞典 pharmacia-Biosystems AB开发的胶体硅材料，即在硅颗粒外包覆 PVP塑料
发酵罐用什么酵母
发酵罐用什么酵母 冷却介质在强制循环下传热系数高。保守的发酵和葡萄酒贮存中，冷耗节约型发酵罐发酵冷却直接冷却发酵罐和液体。经计算和测量，较激进发酵可节省40%~55%冷量消耗。清洗和消毒激进和葡萄酒储罐基本上依靠人工清洗和消毒，根本不能自动化和顺序化发酵罐的发酵可以通过CIP自动顺序进行清洗消毒，
原代细胞中期染色体的分离
试剂和器材： 1. 秋水仙胺；2. 2-甲-2，4-戊二醇缓冲液：1mol/L 2-甲-2，4-戊二醇、0.5mmol/L CaCl2、0.1mmol/L Pipes-NaOH，pH6.8； 3. 梯度溶液：用2-甲-2，4-戊二醇缓冲液配制成280g/L、580g/L和600g/L的Nycoden
血细胞的离心分离
在现代临床医学研究中，常常需要将全血中单核白细胞（淋巴细胞、大单核细胞）与红细胞和多形核白细胞分离。在临床治疗应用中常常需要将全血作成分分离（全血分离成血浆，血小板，白细胞，红细胞等等）（一）血细胞的实验室纯化：血液中存在着各种不同类型的血细胞，每种类型细胞有不同的特点和功能。医学研究常常需要较纯的
转化酶的提取方法
酵母提纯酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤，离心，再洗涤，重复数次，直到菌体呈白色，倾出上清液，将不含杂质的干净的酵母保存待用。粗酶液的制备准确称取离心分离后的酵母10 g，加入60 mL 0．5 mmol/L的SDS溶液溶解，在pH值为5．5、50
蔗糖酶的提取方法
酵母提纯酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤，离心，再洗涤，重复数次，直到菌体呈白色，倾出上清液，将不含杂质的干净的酵母保存待用。 [1] 粗酶液的制备准确称取离心分离后的酵母10 g，加入60 mL 0．5 mmol/L的SDS溶液溶解，在pH值为5
关于蔗糖酶的提取方法介绍
1、酵母提纯 酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤，离心，再洗涤，重复数次，直到菌体呈白色，倾出上清液，将不含杂质的干净的酵母保存待用。 2、粗酶液的制备 准确称取离心分离后的酵母10 g，加入60 mL 0．5 mmol/L的SDS溶液溶
的蔗糖酶的提取方法介绍
酵母提纯酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤，离心，再洗涤，重复数次，直到菌体呈白色，倾出上清液，将不含杂质的干净的酵母保存待用。粗酶液的制备准确称取离心分离后的酵母10 g，加入60 mL 0．5 mmol/L的SDS溶液溶解，在pH值为5．5、50
蔗糖酶的提取方法介绍
酵母提纯酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤，离心，再洗涤，重复数次，直到菌体呈白色，倾出上清液，将不含杂质的干净的酵母保存待用。粗酶液的制备准确称取离心分离后的酵母10 g，加入60 mL 0．5 mmol/L的SDS溶液溶解，在pH值为5．5、50
用阳光给线粒体“充电”或有助延寿
在人体中用太阳光给细胞充电的前景似乎更像是科幻小说，而非科学。不过，一项生命科学新研究从可再生能源领域借鉴了一项技术，表明基因工程线粒体可将光能转化为细胞可利用的化学能，最终延长秀丽线虫的寿命，这些发现揭示了衰老过程中的重要机制。相关研究近日发表于《自然—衰老》。 “我们知道线粒体功能障碍是衰
细胞的离心分离基础和分离实例（七）
例7 鼠肝主质细胞的多倍体级浮选分离 l 设备及样品：同例（5） l 转速1350rpm（～210g） l 温度4℃ l 初始充样流速12ml/min，直至细胞充满离心室 l 分别用流速19，32，41（ml/min）收集I,II,III 细胞，收集量分别为100ml，15
用吸量管吸取溶液的方法？
用右手的拇指和中指捏住移液管或吸量管的上端，将管的崐下口插入欲取的溶液中，插入不要太浅或太深，太浅会产生吸空，把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液，太深又会在管外沾附溶液过多。
用吸量管吸取溶液的方法
用右手的拇指和中指捏住移液管或吸量管的上端，将管的下口插入欲取的溶液中，插入不要太浅或太深，太浅会产生吸空，把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液，太深又会在管外沾附溶液过多。
真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒使用说明
主要用途真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂是一种旨在使用生物、化学和物理方法相结合，有效去除真菌/酵母菌细胞壁，进一步快速且充分裂解真菌/酵母菌细胞，从而分离出完整而纯化的线粒体细胞器，然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒体DNA的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各
真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒使用说明
真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 真菌/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂是一种旨在使用生物、化学和物理方法相结合，有效去除真菌/酵母菌细胞壁，进一步快速且充分裂解真菌/酵母菌细胞，从而分离出完整而纯化的线粒体细胞器，然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒