饱和氯化钠法提取外周血DNA
实验概要本实验用饱和氯化钠法从外周血中提取了基因组DNA 。实验原理以蛋白酶K 和SDS 裂解细胞释放DNA，而DNA 在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高，Na 与带负电的DNA 结合成DNA 钠盐，这时DNA 在溶液中呈溶解状态。以氯仿抽提DNA，去除溶液中蛋白杂质后以3M NaAc 沉淀DNA。主要试剂1. TE buffer（pH 8.0）2. 蛋白酶K3. SDS4. 饱和氯化钠5. 氯仿6. 3M NaAc（pH 5.2）7. 异丙醇8. 乙醇主要设备1. 电热恒温水槽2. 高速离心机实验材料抗凝外周全血实验步骤1. 取0.5 ml 抗凝外周全血，加入0.8 ml 生理盐水混匀后，室温离心10000rpm 1min。2. 弃上清，留0.1 ml 沉淀，加入0.4 ml TE，悬浮细胞后加入10 mg/ml 蛋白酶K 5 μl (终浓度100 μg/ml)，10% SDS 50 μl (终浓度1%)，并轻轻混匀。3. ......阅读全文
外周血DNA提取技术
方法一：1. 标本预处理：将1ml EDTA抗凝贮冻血液于室温解冻后移入5ml离心管中，加入1ml磷酸缓冲盐溶液（PBS），混匀，3500g离心15min,倾去含裂解红细胞上清。重复一次。用0.7ml DNA提取液混悬白细胞沉淀，37℃水浴温育1h。2. 消化：上述DNA提取液混悬白细胞，37℃水浴
人外周血白细胞DNA制备
实验概要本实验从人外周血中制备了白细胞DNA，介绍了制备基本原理及操作步骤。实验原理从全血制备白细胞DNA，可用非离子去污剂Triton X-100直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜，释出血红蛋白及细胞核，在反应体系中含一定浓度蔗糖，维护核膜内外的渗透压，以防止核膜破裂，通过离心等手段即可获得白
饱和氯化钠法提取外周血DNA
实验概要本实验用饱和氯化钠法从外周血中提取了基因组DNA 。实验原理以蛋白酶K 和SDS 裂解细胞释放DNA，而DNA 在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高，Na 与带负电的DNA 结合成DNA 钠盐，这时DNA 在溶液中呈溶解状态。以氯仿抽提DNA，去除溶液中蛋白杂质后以3M NaAc 沉淀DNA
外周血单个核细胞结核分枝杆菌DNA的检测价值
【摘要】 目的 探讨单个核细胞结核分枝杆菌DNA检测在肺结核诊断中的价值。方法 380例外周血用淋巴细胞分离出单个核细胞，用1%TritonX-100加蛋白酶K提抽模板DNA作PCR扩增，产物227bp。结果 外周血单个核细胞结核分枝杆菌DNA检出率为90.3%（343/380）明显高于
新技术MCTASeq应用于探究外周血游离DNA的组织来源
北京大学生物医学前沿创新中心（BIOPIC）、北京未来基因诊断高精尖创新中心文路副研究员与首都医科大学世纪坛医院肝胆外科彭吉润教授合作，利用团队之前开发的甲基化CpG短串联扩增与测序技术（MCTA-Seq），探究正常人、肝疾患者与急性胰腺炎患者外周血游离DNA的组织来源。研究成果以“Compre
外周血免疫细胞检测
实验材料静脉全血试剂、试剂盒肝素鼠抗人目的单克隆抗体溶红细胞液生理盐水仪器、耗材FCM 测量管实验步骤1. 取 1000 U/ml 肝素 100 ul 抗凝静脉全血，置于 FCM 测量管中。2. 直接标记法：加入带荧光标记的鼠抗人目的单克隆抗体试剂 10 ul，充分混匀，在 4℃ 冰箱中反应 30
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐
外周血T细胞的检测——外周血T细胞亚群的检测分析
实验步骤展开
外周血T细胞的检测
用荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群 外周血T细胞亚群的检测分析
外周血单个核细胞简介
外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是 mononuclear cell 单个核细胞，而不是 Monocyte 单核细胞。外周血单个核细胞主要的分离方法是Ficoll-hypa
外周血培养基配制
一、配制用水培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HC
外周血B细胞的检测
外周血CD19+、CD20+细胞检测 活性B细胞检测 实验步骤
外周血B细胞的检测
外周血CD19+、CD20+细胞检测 活性B细胞检测 实验步骤
怎样预防外周血管疾病？
外周血管疾病经常由于脂肪在腿部血管堆积造成，患病者腿部疼痛并且影响正常行走。经过调查发现血液中维生素D含量较高的人不易得外周血管疾病。调查结果表明在患有外周血管疾病的人群中有64%患者体内维生素D含量过低。 研究者认为体内高水平维生素D与外周血管疾病发病率或许没有直接关系，只是由于饮食均衡使体
外周血T细胞的检测
用荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群 外周血T细胞亚群的检测分析
外周血T细胞的检测—荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群
实验步骤展开
外周血T细胞的检测—荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群
实验步骤展开
外周血T细胞的检测—荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群
实验步骤展开
外周血活性T细胞的检测
实验步骤展开
做人外周血流式相关问题
在下最近作人外周血流式，作表面及其胞内染色，试剂说明书说要先分离外周血单个核细胞再染色，我有时候分的红细胞比较多，其他的方法试过了，都改进的不好，我担心红细胞会有影响，想在分离出PBMC以后如果红细胞比较多的话，就用红细胞裂解液裂解一下，但是我有如下问题，希望这样做过的同志指点一下，感激不禁。（1）
如何分离外周血单个核细胞
外周血单个核细胞即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞，目前主要的分离方法是Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异最多12天，但需要刺激。 PBMC（外周血单个核细胞）是原代细胞，单纯
治疗外周血管疾病的概述
外周血管疾病经常由于脂肪在腿部血管堆积造成，患病者腿部疼痛并且影响正常行走。经过调查发现血液中维生素D含量较高的人不易得外周血管疾病。调查结果表明在患有外周血管疾病的人群中有64%患者体内维生素D含量过低。 研究者认为体内高水平维生素D与外周血管疾病发病率或许没有直接关系，只是由于饮食均衡使体
外周血单个核细胞的简介
周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同，红细胞和多核白细胞的比重在1.092左右，单个核细胞的比重为1.075-1.090，血小板为1.030-1.035。因此利用一种介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定密度的细胞按
外周血活性T细胞的检测
实验步骤 展开
外周血管疾病的基本介绍
外周血管疾病，中医称之为脉管疾病。其发病率近年有明显上升，常见的如动脉硬化性闭塞症、动静脉血栓形成、动脉瘤等。我国治疗周围血管疾病的专业技术正在蓬勃发展之中，传统手术技术在不断的完善，新的治疗方法———介入治疗在临床中的应用也日趋广泛。
外周血单个核细胞的分类
一、基本原理 外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其比重为1.070左右，而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心，就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液，国内常用泛影葡胺代替泛
外周血活性T细胞的检测
外周血活性T细胞的检测 实验步骤
外周血干细胞移植的现状
1979年Goldman等为一组加速期或急变期 慢性粒细胞白血病患者移植初诊时采集冻存的外周血细胞，使患者重新回到慢性期，开始了外周血造血干细胞移植(PBSCT)的临床应用。 80年代中期以后，由于细胞分离机性能提高，1990年以后G—CSF应用于PBSC动员获得成功之后，PBSCT得到迅速发展