做人外周血流式相关问题
在下最近作人外周血流式,作表面及其胞内染色,试剂说明书说要先分离外周血单个核细胞再染色,我有时候分的红细胞比较多,其他的方法试过了,都改进的不好,我担心红细胞会有影响,想在分离出PBMC以后如果红细胞比较多的话,就用红细胞裂解液裂解一下,但是我有如下问题,希望这样做过的同志指点一下,感激不禁。(1)有人这样在分离PBMC以后再裂解的吗(我知道一般是在全血染色后再裂解红细胞)?(2)这样会影响流式检测吗?(3)用的裂解液配方是什么(最好是自己用过的)。(4)用法是什么{我是在如果PBMC分出来以后要是红细胞比较多的时候使用,这样要怎样把分出的PBMC稀释,加多少裂解液 裂解多长时间,裂解后洗涤几次等等}。我曾做骨髓液分离单个核细胞而后做流式,一般来说用Ficoll分过之后即便还有红细胞残留,上流式也可通过“设门”根据细胞形态大小将红细胞剔除。若红细胞残留太多,则可通过红细胞裂解液进一步去除之。我用的裂解液配方是:碳酸氢钾(KHCO......阅读全文
做人外周血流式相关问题
在下最近作人外周血流式,作表面及其胞内染色,试剂说明书说要先分离外周血单个核细胞再染色,我有时候分的红细胞比较多,其他的方法试过了,都改进的不好,我担心红细胞会有影响,想在分离出PBMC以后如果红细胞比较多的话,就用红细胞裂解液裂解一下,但是我有如下问题,希望这样做过的同志指点一下,感激不禁。(1)
流式细胞仪检测外周血树突状细胞
概述树突状细胞(DC)的主要功能是吸收抗原,进行加工,并向T淋巴细胞呈递。其它抗原呈递细胞也有此功能,如B淋巴细胞和单核细胞。但是,与其它细胞不同的是,DC细胞具有诱导初发免疫反应的独特功能,例如,可以活化处女T细胞(Naive T cell)。DC细胞存在于外周淋巴组织中,已在血液和非淋巴器官中发
外周血干细胞移植的移植问题
1、收集的外周血干细胞可能混杂有肿瘤细胞; 2、移植物中存在大量T细胞,可能诱发严重GVHD ; 3、初步的结果表明,PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似,但慢性GVHD为Allo—BMT的2-3倍; 4、重组细胞因子作为动员剂对供者的安全有待于观察。
外周血干细胞移植的临床问题
1)外周血干细胞数量采集困难,不能满足移植所需数量。 2)收集的外周血干细胞会混杂有肿瘤细胞。 3)异基因外周血移植物中存在大量T细胞,可能诱发严重GVHD,初步的结果表明Allo-PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似,但慢性GVHD显著高于Allo-BMT。 4)PBSCT后肿瘤
简述外周血干细胞移植的临床问题
1)外周血干细胞数量采集困难,不能满足移植所需数量。 2)收集的外周血干细胞会混杂有肿瘤细胞。 3)异基因外周血移植物中存在大量T细胞,可能诱发严重GVHD,初步的结果表明Allo-PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似,但慢性GVHD显著高于Allo-BMT。 4)PBSCT后肿瘤
关于外周血干细胞移植的移植问题介绍
1、收集的外周血干细胞可能混杂有肿瘤细胞; 2、移植物中存在大量T细胞,可能诱发严重GVHD ; 3、初步的结果表明,PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似,但慢性GVHD为Allo—BMT的2-3倍; 4、重组细胞因子作为动员剂对供者的安全有待于观察。
外周血干细胞移植的临床问题及应用趋势
临床问题 1)外周血干细胞数量采集困难,不能满足移植所需数量。 2)收集的外周血干细胞会混杂有肿瘤细胞。 3)异基因外周血移植物中存在大量T细胞,可能诱发严重GVHD,初步的结果表明Allo-PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似,但慢性GVHD显著高于Allo-BMT。 4)PB
外周血干细胞移植的移植优点及临床问题
移植优点 费用低,效益好 造血及免疫功能恢复快,移植的费用/效益之比优于BMT。 不管是自体还是异体PBSCT,移植后的植活时间 (白细胞>1.0x109/L,中性粒细胞>0.5x109/L和血小板>20×109/L) 大都在2周左右,比BMT至少提早1周;如果在移植后加用G-CSF或GM
流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床
背景流式细胞术检测T、B、NK淋巴细胞亚群已较为广泛的应用于儿科临床许多疾病涉及儿童相应免疫功能异常临床工作中更有效的理解和应用流式细胞术以评估儿童的免疫状况,指导疾病的诊断、治疗还缺乏系统的学习材料尤其是临床一线的儿科医务工作者对流式细胞术的临床应用更有待进一步加强认识和学习。检测对象原则:免疫功
恶性肿瘤病人外周血免疫指标的流式细胞仪检测
恶性肿瘤病人外周血免疫指标的流式细胞仪检测及免疫治疗前后免疫功能变化的研究恶性肿瘤的发生、发展与机体免疫系统密切相关。运用流式细胞术的方法,检测T淋巴细胞表面抗原(CD3、CD4、CD8),B淋巴细胞表面抗原(CD19、CD20),NK细胞表面抗原(CD16+56)在恶性肿瘤病人外周血中的表达,并检
人外周血流式细胞仪检测指标正常参考值
胞表面抗原 细胞类型 正常值(x±s%) 变化范围% T 细胞抗原CD2总 T 细胞 羊红细胞受体76.28±7.6862.5—89.0CD3总 T 细胞69.98±5.7961.1—77.0CD4Th 细胞35.25±5.1625.8—41.6CD5T 细胞(部分 B 细胞)77.06±7.346
造血干细胞移植的外周血采集的相关介绍
在人体稳态情况下,外周血造血干细胞数量很少,不能采集到满足造血干细胞移植所需的足量的造血干细胞。通常在大剂量化疗后血象恢复期或体内应用细胞因子如G-CSF后外周血中可有高比例的造血干细胞,我们称这一过程为“造血干细胞动员”,动员到外周血的造血干细胞通过血细胞分离机进行采集,可获得足够数量的造血干
eBioscience流式抗体常见问题与解答
1、eBioscience公司提供了哪些抗体? A:物种——人、小鼠、大鼠、非人灵长类、犬类等。检测指标——包括细胞表面标记(CD分子,膜骨架,趋化因子受体)和胞内指标(细胞因子,核内转录因子)。抗体标记——生物素标记抗体,亲和纯化抗体以及直标荧光素抗体。eB抗体的直标荧光素有(括号内是发射光波长
使用eBioscience流式抗体的常见问题
Q. 是否能涡旋震荡抗体或重组蛋白?我们不推荐震荡蛋白或抗体溶液,这会改变产品的特性。通常在运输过程中,液体有可能已经分散在管子中。推荐使用之前,瞬时离心,这样抗体会沉到管底,以达到标示的体积。Q. 我能涡旋震荡已经标记了抗体的细胞样品吗?可以,短时震荡能保持细胞的最佳状态。Q. 标记了tandem
流式细胞术常见问题问答
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择?同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免
流式细胞术常见问题问答
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的? FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。 2、流式同型对照怎样选择? 同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同
施一公:诚实做学问-正直做人
此文呼应最近人民网上的一篇报道,及今年3月《光明日报》的一篇文章。(人民网的报道题为《四位科技界知名人士建言下决心深化科技体制改革》,详见:http://scitech.people.com.cn/GB/12444910.html;《光明日报》的文章详见:http://www.gm
流式实验常见问题及解决方法
1.无染色/弱染色 2.高背景/非特异性染色 3.染色异常情况
流式细胞仪的相关介绍
流式细胞仪(Flowcytometry)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总
做人工智能领域的引领者
近年来,随着互联网、大数据、云计算和物联网等技术不断发展,人工智能正引发链式反应般的科学突破,引领新一轮科技革命和产业变革,也将加速培育经济发展新动能并塑造新型产业体系,对人类生活方式甚至社会结构产生深远影响。 一直以来,大学在原始创新和重要思想产出的过程中,发挥着独特的、不可替代的作用。实
袁渭康院士:认真做事,平实做人
今年的9月10日是我国第40个教师节,主题为“大力弘扬教育家精神,加快建设教育强国”。中国工程院院士袁渭康毕生致力于推动中国化学工业的发展,他以“认真做事,平实做人”为准则,培养了一代又一代的化学反应工程人才。袁渭康院士(左三)与学生交谈。图片由华东理工大学提供“三十年指导学生最重要的体会是,为了对
媒体评论:袁隆平“做事先做人”的镜鉴意义
做事先做人——袁隆平先生说这是他一辈子最深刻的感悟。在众多媒体报道的这位科学大师的故事里,最是这句朴素的话语打动人,震撼人。尤其联想到当今学术界浮躁、作假、追名逐利等不良现象,这句话愈加振聋发聩。 袁隆平先生一生成就卓著,荣誉无数,“杂交水稻之父”的美名几乎家喻户晓;他既是中国的院士,也是美国的院士
慢性HBV患者外周血Th细胞凋亡相关蛋白的检测及临床
作者单位:深圳市横岗人民医院,广东 深圳 518115【摘要】 目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血Th细胞凋亡信号蛋白的表达情况及临床意义。方法:提取35例慢性乙型肝炎患者和35例健康人外周血单核细胞,应用流式细胞术分析慢性乙型肝炎患者外周血Th细胞凋亡信号蛋白Fas、FasL和Bcl2表达情况。结
流式试剂选择及常见问题解答
一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体1) BD流式细胞仪(06版目录第614
流式细胞术介绍及常见问题分析
流式细胞术广泛应用于细胞表面和细胞内分子表达特征的分析,界定不同种类的细胞群,测定分离出的亚类纯度,分析细胞的大小和总量,它可以同时分析单个细胞的多个参数。它主要用于检测标记在抗体上的荧光强度,这些荧光抗体则可以检测与特定细胞分子结合的蛋白或配体,如与 DNA 结合的溴化丙啶 (PI)等。染色步骤包
流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群培养方案的研究
摘 要:目的 改进流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群的刺激培养方案。 方法 外周全血经RPMI1640培养液和终浓度为25μg/L的PMA、1 mg/L的Ionomycin、20μg/的Monensin培养2 h后,用流式细胞仪分别检测CD4、CD69阳性细胞及CD3阳性细胞表达IFN-γ
流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群培养方案的研究
摘 要:目的 改进流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群的刺激培养方案。 方法 外周全血经RPMI1640培养液和终浓度为25μg/L的PMA、1 mg/L的Ionomycin、20μg/的Monensin培养2 h后,用流式细胞仪分别检测CD4、CD69阳性细胞及CD3阳性细胞表达IFN-γ
外周血DNA提取技术
方法一:1. 标本预处理:将1ml EDTA抗凝贮冻血液于室温解冻后移入5ml离心管中,加入1ml磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀,3500g离心15min,倾去含裂解红细胞上清。重复一次。用0.7ml DNA提取液混悬白细胞沉淀,37℃水浴温育1h。2. 消化:上述DNA提取液混悬白细胞,37℃水浴
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐