动物细胞基因组DNA的制备
实验概要本实验介绍了动物细胞基因组DNA的制备原理及操作流程。本方法一般可从5×107培养的非整倍体细胞（如HeLa细胞）中获得大约200μg DNA。DNA的长度可达到100~150kb。20ml正常血的DNA产量约为250μg。实验原理真核生物的一切有核细胞（包括培养细胞）都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，因此，制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。蛋白酶K的重要特性是能在SDS和EDTA（乙二胺四乙酸二钠）存在下保持很高的活性。在提取DNA的反应体系中，SDS可破坏细胞膜、核膜，并使组织蛋白与DNA分离，EDTA则抑制细胞中DNase的活性......阅读全文
DNA－Electrophoresis
What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. DNA is a negatively
DNA测序
DNA测序（主要内容如下）· Sequencing Gel Preparation· Preparation of Templates · DNA Sequencing by the Dideoxy Method· DNA Sequen
DNA标记
DNA标记（主要内容如下） DNA Labeling by Nick Translation Random Primed Labeling End-Labeling Purification of Labeled DNA Non-isotopic Labeling OthersDNA L
DNA克隆
DNA克隆（主要内容如下）· General Procedure· PCR Cloning· Subcloning· ET Cloning· Vector Preparation· Ligation Re
DNA凝胶电泳（DNA－agarose－gel－electrophoresis）
实验原理琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分
DNA指纹图谱分析[DNA－Fingerprinting－]
一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的
Quick－Yeast－DNA－Prep:－Isolation－of－Total－DNA－(genomic－and－plasmid)
Grow a 5 ml YPD O/N culture inoculated with a single yeast colony at 30 deg.Transfer culture to a small 13 x 100 glass tube. Spin down cells 2 min. in
高变区DNA与DNA指纹的关系
人的卫星DNA 或称随体DNA 是由一些短的DNA 片段（10bp 左右）多次重复所构成的。重复片段的组成和拷贝数在不同的个体及基因组的不同位置上不一样。提取不同个体的基因组DNA 后，用其切点能识别序列为4 个碱基而又不切割该重复片段的限制性内切酶在重复片段的两侧切割基因组DNA ，然后将样品进行
循环肿瘤DNA比循环正常DNA矮半截
如今，人们开始利用液体活检技术来诊断癌症，以及监测治疗效果，不过灵敏度是个问题。美国犹他州大学和华盛顿大学的研究人员近日在《PLOS Genetics》上发表文章，称来源于肿瘤的DNA片段比来源于正常细胞的片段要短，这个特征可用于改善液体活检。 犹他州大学的Hunter Underhill及其
DNA的酶切与连接——DNA片段连接
实验方法原理核酸片段可以通过连接酶的作用连接起来而获得重组分子。实验材料λDNA EcoT14I：由11条DNA片段组成试剂、试剂盒T4 DNA连接酶及其配套的10×连接缓冲液 0.5×TBE电泳缓冲液 6×Loading Buffer Goldview 琼脂糖仪器、耗材电泳仪 水浴锅 移液器 微波
可以DNA结合的酶DNA连接酶
DNA连接酶：是能够使用来自ATP或NAD的化学能将先前切割或断裂的DNA链聚集在一起的酶。连接酶在DNA滞后链复制中特别重要，因为它们将冈崎碎片组合成DNA链。连接酶在DNA修复和基因重组中也发挥重要作用。
A型DNA与B型DNA的结构差异
A型DNA与B型DNA是在两种环境下同种物质不同的形式。B型DNA：92%RH，钠盐，溶液和细胞中天然状态中的DNA多以此状态存在A型DNA：75%RH，钠盐A型DNA也是由反向的两条多核苷酸链组成的双螺旋，为右手螺旋，但螺旋体较宽而短，碱基与中心轴之倾角也不同，呈19度。
DNA作图实验
多种酶消化 限制酶部分消化 实验方法原理 应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。
Lambda－DNA－Preparation
Lambda DNA PreparationThis is a plate method that gives very good yield for cloning. I have combined the Promega and Maniatis protocols.Solutions T-TY
DNA－mobility－in－gels
1. Migration of marker dyes in native polyacrylamide non-denaturing gels Gel % Bromophenol blue (BP) Xylene cyanole (XC) 3.5 100 460 5.0
DNA提取仪
DNA提取仪也叫核酸纯化仪，是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。
DNA－Sequencing－Gels
DNA Sequencing GelsBuffers and gel solutionsLong Ranger: we started using this in early 1995. Great stuff; the best thing is that the gels are not sti
DNA－Cell－Cycle
Solutions70% ethanolribonuclease (100 µg/ml DNase free, Sigma)propidium iodide ( 50 µg/ml in PBS)ProcedureHarvest cells. Spin at 1200 rpm for 5 minute
Fungal－DNA－Isolation
Fungal DNA IsolationSaghai-Maroof MA, Soliman KM, Jorgensen RA, & Allard RW (1984) PNAS 81:8014-8018DNA successfully isolated from fungal species of C
叶绿体DNA分离
设备：Hitachi CS-150GXL或CS-120GXL微量超速离心机，S100AT6 转头，5PA 密封管（如果用4PC管，可接比例减少各层液量）溶液配制：A液：0.35Msorbitol（山梨醇），50mM Tris—Hcl (PH8.0) 25mM EDTA—Na2B液：5％（w/w）So
DNA酶试验
DNA酶试验是检验技师考试的内容，医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。（1）原理：某些细菌产生DNA酶，可使长链DNA水解成寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀，寡核苷酸链则溶于酸，所以当在菌落平板上加入酸后，会在菌落周围出现透明环。（2）培养基：0.2%DNA琼脂平板。（3）方法：将被检菌点种于
DNA酶试验
(1)原理：某些细菌能产生DNA酶，可使长链DNA水解成为寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀，而寡核苷酸则溶于酸。故在DNA琼脂平板上加盐酸后，可在菌落周围形成透明环。 (2)培养基：0.2%DNA琼脂平板。 (3)方法：在DNA琼脂平板上点种待检菌，35℃孵育18~24h，用1mol/L盐
DNA测序技术
目前还有一种基于半导体芯片的新一代革命性测序技术——Ion Torrent。该技术使用了一种布满小孔的高密度半导体芯片， 一个小孔就是一个测序反应池。当DNA聚合酶把核苷酸聚合到延伸中的DNA链上时，会释放出一个氢离子，反应池中的PH发生改变，位于池下的离子感受器感受到H+离子信号，H+离子信号再直
DNA测序仪
DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括sanger双脱氧链终止法和maxam-gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今dna序列分析的主流。美国peabi公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等dna测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型
DNA怎么提取
DNA提取的几种方法(1).浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐
DNA抽提
DNA抽提（主要内容如下）· Working with DNA· DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms· DNA Extraction from Cell and Tissue· Mitochondria DNA Isola
DNA点杂交
DNA点杂交l DNA斑点印迹的制备预备1．冰浴中以70W左右的超声波处理基因组DNA 1min，用琼脂糖凝胶电泳检测片段大小，这些片段大小均应为7～10kb。2．用TE缓冲液将DNA稀释至0.5μg/μl。 斑点印迹的制备1．加热5μg DNA（在10μl TE缓冲液中）至95℃ 1
DNA纯化实验
PCR清洁试剂盒纯化法 实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合DNA，又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油
DNA纯化实验
实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合DNA，又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特性，所以被分离开来。实验材料 PCR产物试剂、试剂盒 PCR清洁试剂盒仪器、耗材 96孔DNA制备板96孔深孔板96孔V型底板实验
Cosmid－DNA－Isolation
实验概要Isolation of high yields of highly pure cosmid DNA using PureLink™ HiPure Plasmid Purification Kits.实验原理The PureLink™ HiPure Plasmid Purification