小鼠肝组织DNA的提取
实验概要掌握从动物组织中提取DNA的基本原理和方法，了解利用电泳技术分离、鉴定核酸的原理和方法。实验原理真核生物DNA主要以核蛋白形式存在于细胞核中，因此制备DNA必须先粉碎组织，裂解细胞膜和核膜，使核蛋白释放，在除去蛋白质、脂类、糖类和 RNA等物质，得到纯化的DNA。在本实验的提取DNA反应体系中，SDS（十二烷基磺酸钠）破坏细胞膜和核膜，并使蛋白质变性，将核蛋白中的DNA与蛋白质分开，EDTA及SDS抑制细胞中的DNA酶的活性。用酚、氯仿抽提的方法进一步除去蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀除净小分子化合物。提取出的 DNA制品进一步用含溴乙锭的琼脂糖凝胶电泳加以鉴定。主要试剂1. 生理盐水2. 裂解缓冲液3. 苯酚：氯仿混合液（1：1）4. 无水乙醇5. 70％乙醇6. TE缓冲液7. 溴酚蓝载样液8. 溴乙锭溶液9. TBE缓冲液主要设备1. 研钵2. 研钵棒3. 刻度离心管4. 普通离心机5......阅读全文
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定2
目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法（双脱氧链终止法）和Maxam（1977）提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都同样生成相互独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组核苷酸都有共同的起点，却随机终止于一种（或多种）特定的残基，形成一系列以某一特定核苷酸
DNA重组技术(DNA－Recombination)
一、DNA 的酶切与连接（1）酶切反应：同质粒DNA 的鉴定，只不过是质粒DNA 换为载体DNA 。若大量酶切，则成比例增加。（2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。（3）15000rpm离心15min，弃上清。（4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃
关于肝切除术治疗肝包虫病的介绍
本法能完整切除包虫，治疗效果最佳。从现代肝外科学的角度来看，切除寄生虫感染的肝脏（标准切除或广泛切除）是理想的方法，但对因包虫感染而行肝切除要谨慎，一方面是因为肝包虫病非恶性病变，且常为多中心性的生物性疾病，另一方面肝切除涉及的术后处理以及术后肝组织的再生能力等问题，因此对肝包虫病行肝切除术仅适
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体1
载体（vector）是携带靶DNA（目的DNA）片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型，亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体3
在作为载体时，这些噬菌体有一个很大的优点，即克隆到M13mp载体的外源DNA片段（双链），在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆，可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板：①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板；②制备仅有一条
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定2
（1）CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子（如Ca2+、Mg2+等）低渗溶液中时，细菌细胞膨胀成球形，处于感受态；此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面，在丰富培养基中生长数小时后，球状细胞恢复原
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定1
重组DNA是在体外用限制性内切酶，将不同来源的DNA分子进行特异地切割，获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接，从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞，在宿主细胞中进行无性增殖，获得大量的目的基因或DNA片段，此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定3
当多克隆位点有外源DNA片段插入时，破坏此酶的N端阅读框架，产生无α互补功能的N端片段，因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色，见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短，不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框，有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体2
二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体，大多数具有编码多种蛋白质的基因，能利用宿主细胞的蛋白质合成体系，进行生长和增殖。构建的噬菌体载体，以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA，全部序列已知，共编码50多个基因。其中约一半基因参与
肝内血管瘤经皮肝动脉栓塞治疗的介绍
研究发现，肝血管瘤可能具有来源于肝动脉的供血支，因此介入栓塞治疗可能使供血动脉末梢小分支闭塞，血管瘤纤维化，终止肿瘤生长，促使瘤体缩小，临床症状改善，达到治疗目的。比如：在对药物治疗失败，伴严重心功能衰竭的新生儿先天性巨大血管瘤，为减轻心脏负荷，行TAE可降低心脏负荷；或合并K-M综合征的巨大肝
实验室血清学检查丁肝和戊肝（一）
您需要了解的丁肝和戊肝！常见肝炎分为甲型、乙型、丙型、丁型和戊型，今天向大家介绍丁型肝炎和戊型肝炎。丁肝丁肝是由丁型肝炎病毒（HDV）与乙型肝炎病毒等嗜肝DNA病毒共同引起的传染病。本病呈全世界性分布，我国调查报告提示有地方性流行，各地HBsAg阳性者HDV感染率为0%～32%，总的看，北方偏低，南
实验室血清学检查丁肝和戊肝（二）
戊肝本病主要见于亚洲和非洲的一些发展中国家。自1980年后中国新疆地区曾有数次流行，其他各地均有散发性戊型肝炎的报告，约占急性散发性肝炎10%，至少已有6个省市自治区曾报告发生戊型肝炎暴发流行。其流行特点似甲型肝炎，经粪-口途径传播。以水型流行最常见，少数为食物型暴发或日常生活接触传播。具有明显季节
DNA合成（DNA－synthesis－）技术介绍
蛋白质概念提出：DNA多肽合成（DNA synthesis ）：按照预定核苷酸的顺序，将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法，即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸，可自动化操作。)目前，oligo DNA合成一般都采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA片段，此方法具有高效
DNA－指纹的概念高变区DNA与DNA指纹
人的卫星DNA 或称随体DNA 是由一些短的DNA 片段（10bp 左右）多次重复所构成的。重复片段的组成和拷贝数在不同的个体及基因组的不同位置上不一样。提取不同个体的基因组DNA 后，用其切点能识别序列为4 个碱基而又不切割该重复片段的限制性内切酶在重复片段的两侧切割基因组DNA ，然后将样品进行
肝显像正常值
正常值正常肝脏显示图像，仰卧位时肝影近似侧放之锥体形，边缘整齐，左上缘可见心脏压迹，下缘可见肝门切迹，肝区放射性分布均匀，右叶放射性强度高于左叶。
肝显像临床意义
临床意义异常结果： (1) 肝实质显像多数呈现为单发放射性分布稀疏或缺损区，为肝血管瘤。(2) 肝脏显像出现放射性缺损区提示肝脏有占位性病变，如肝癌、肝脓肿等。(3) 肝血流灌注相中灌注正常或略降低，而延迟30-60min后的肝血池显像病灶局部放射性增多，是肝血管瘤的典型表现。需要检查人群：肝血管
肝显像注意事项
不适宜人群：对放射性元素敏感人。检查前禁忌： (1) 准备好显像剂，pH符合5.5-6.8。(2) 检查前患者禁食4-6h。检查时禁忌： (1) 注意注射显像剂的量，要注射完等10到15分钟左右方可进行断层显像。(2) 正确的解剖标记，包括触及的肝脏或肿块下缘标记，对克服肝脏变形或肝硬化造成的假
从肝论治甲亢
赵某，女，34岁，2010年10月9日初诊。3个月来，食欲亢进，消谷善饥，形体明显消瘦，体重减轻5公斤。口苦且干，畏热心悸，自汗，心慌睡眠不安，大便溏薄，日3~4次，精神萎顿。刻诊：消瘦面赤，双侧甲状腺呈弥漫性增大，举手震颤，舌红苔薄，脉细弦。西医诊断为甲状腺机能亢进。证属肝气郁结，郁火生痰
脂肪肝的介绍
脂肪肝（fatty liver）是指由于各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积过多的病变，是一种常见的肝脏病理改变，而非一种独立的疾病。脂肪性肝病正严重威胁国人的健康，成为仅次于病毒性肝炎的第二大肝病，发病率在不断升高，且发病年龄日趋年轻化。正常人肝组织中含有少量的脂肪，如甘油三酯、磷脂、糖脂和胆固醇等
脂肪肝的简介
肝脏是机体脂质代谢的中心器官，肝内脂肪主要来源于食物和外周脂肪组织，导致脂质在肝细胞内沉积的代谢异常机制并没有完全明确，根据现有知识，认为脂肪肝的形成与以下因素有关。 1.肥胖 肝内脂肪堆积的程度与体重成正比。30%～50%的肥胖症合并脂肪肝，重度肥胖者脂肪肝病变率高达61%～94%。肥胖人
肝囊肿症状是什么？
临床上经常依据囊肿的是单发还是多发，而将其分为单发性肝囊肿和多发性肝囊肿，单发和多发性肝囊肿症状有所区别。 单发性肝囊肿通常无任何症状表现，只有在肝囊肿较大、压迫到其他组织的时候才会有腹痛、恶心、腹泻等症状出现。 多发性肝囊肿甚大时，可压迫到肝脏细胞，导致萎缩性改变，引起胆管狭窄、胆囊炎等，
肝阿米巴病的介绍
肝阿米巴病(hepatic amebiasis)是 肠外阿米巴病五中最常见的感染，又称 阿米巴肝脓肿。大多数来源于肠阿米巴病的并发症，部分也可无肠阿米巴病的临床表现而单独发生。
肝阿米巴病的描述
肝阿米巴病是肠外阿米巴病五中最常见的感染，又称阿米巴肝脓肿。大多数来源于肠阿米巴病的并发症，部分也可无肠阿米巴病的临床表现而单独发生。
肝阿米巴病的病因
（一）传染源 主要传染源为粪便中持续排出包囊的人群，包括慢性病人、期宾馆及无症状包囊逮逮者。因为包囊对外环境抵抗力强，在粪便中可存活6周，如污染水和食品，会传播本病。急性期病人常排出大量滋养体，但在外界环境中迅速死亡，故急性期病人不被列入主要传染源。人是溶组织阿米巴的主要宿主和贮存宿主。猿类、猪
肝胶体显像检查作用
以了解肝实质的功能状态。正常影像表现为位置形态大小类似肝解剖，放射性分布均匀，脾脏可显影。异常结果： 肝位置异常：肝下垂、膈疝、内脏转位；大小形态异常：弥漫性肝病、肝硬化、占位；放射性分布异常：单个或多个局限性稀疏缺损区：肝占位(原发或转移性)。弥漫性稀疏：肝炎、脂肪肝、肝硬化等。局限性热区：肝
酒精肝检查病因
酒精性肝病在西方人是较常见的肝病，因喝酒导致肝硬化而死的比率名列欧美国家死亡原因之前五名，中国则因病毒性肝炎造成的慢性肝病肝硬化占多数。特别是近年来经济的发展，生活水准提高，对酒的消耗量也快速的成长。
肝穿刺的活检步骤
肝穿刺活检步骤是，首先要通过乙肝b超检查确认穿刺点的位置，对于肝脏明显肿大的患者可以在肋缘下穿刺。 在肝穿刺活检手术前，一般会对患者进行消毒，麻醉。肝穿刺活检中，患者应该保持呼吸平静，医生通过穿刺针于b超选定的穿刺点穿透皮肤，进入肝实质后迅速拔针，整个过程只需要1-2秒。 肝穿刺检查的详细步
小儿肝肿瘤的病因
肝癌的病因，经过许多研究，虽有一定认识，但其原因迄今尚未明了，目前研究认为致病因素： 1.肝硬化 肝细胞肝癌的患者约80%合并有肝炎肝硬化，而且多数病人是大结节性肝硬化，这可能由于肝细胞变性坏死、间质结缔组织增生、纤维间隔形成、残留肝细胞结节性再生，形成小叶，在反复增生过程中肝细胞可发生变异
小儿肝肿瘤的检查
血清学和影像学的不断发展为亚临床肝癌的早期诊断提供了各种方法，临床上把血清学诊断称为“定性诊断”，影像学诊断称为“定位诊断”，穿刺活检或脱落细胞检查称为“病理诊断”这些方法的综合应用可提高诊断的正确率。 1.甲胎蛋白（AFP）检测 AFP对肝细胞其准确率达90%左右，其临床价值有： （1）
小儿肝肿瘤的治疗
最有效的治疗是手术切除病变，良性或恶性肿瘤均可手术切除，大部分病例的病变可做完整切除。手术后4～6周肝组织可迅速修复，此时应复查CT及AFP和B超以作为日后复查的基础。肿瘤相对的对放疗不敏感，联合应用顺铂与多柔比星（阿霉素）对肝母细胞瘤有效，可使不能切除的肿瘤转变为能手术切除的病变，并可清除肺转