小鼠肝组织DNA的提取
实验概要掌握从动物组织中提取DNA的基本原理和方法，了解利用电泳技术分离、鉴定核酸的原理和方法。实验原理真核生物DNA主要以核蛋白形式存在于细胞核中，因此制备DNA必须先粉碎组织，裂解细胞膜和核膜，使核蛋白释放，在除去蛋白质、脂类、糖类和 RNA等物质，得到纯化的DNA。在本实验的提取DNA反应体系中，SDS（十二烷基磺酸钠）破坏细胞膜和核膜，并使蛋白质变性，将核蛋白中的DNA与蛋白质分开，EDTA及SDS抑制细胞中的DNA酶的活性。用酚、氯仿抽提的方法进一步除去蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀除净小分子化合物。提取出的 DNA制品进一步用含溴乙锭的琼脂糖凝胶电泳加以鉴定。主要试剂1. 生理盐水2. 裂解缓冲液3. 苯酚：氯仿混合液（1：1）4. 无水乙醇5. 70％乙醇6. TE缓冲液7. 溴酚蓝载样液8. 溴乙锭溶液9. TBE缓冲液主要设备1. 研钵2. 研钵棒3. 刻度离心管4. 普通离心机5......阅读全文
小鼠肝组织DNA的提取
实验概要掌握从动物组织中提取DNA的基本原理和方法，了解利用电泳技术分离、鉴定核酸的原理和方法。实验原理真核生物DNA主要以核蛋白形式存在于细胞核中，因此制备DNA必须先粉碎组织，裂解细胞膜和核膜，使核蛋白释放，在除去蛋白质、脂类、糖类和 RNA等物质，得到纯化的DNA。在本实验的提取DNA反应
小鼠肝基因组DNA制备
原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中，制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。
小鼠肝基因组DNA制备
原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中，制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。
干货！小鼠肝组织dna的提取详细步骤
实验原理 DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。在匀浆后提取 DNA 的反应体系中， SDS 可破坏细咆膜、核膜，并使组织蛋白与 DNA 分子分离， EDTA 抑制细胞中 DNase 活性，
动物肝DNA提取实验中除去RNA的试剂
对于动物DNA/RNA提取实验有一些经验，希望我的回答可以帮到你。在动物肝DNA提取实验中，通常采用的试剂是三氯醋酸（Trizol）试剂。这个试剂是一种广泛应用于RNA和DNA提取的试剂，可以有效地提取RNA和DNA，且不会相互干扰。在使用Trizol试剂进行DNA提取时，可以通过调整实验步骤和加入
肝肿瘤定义
肝肿瘤（hepatic tumor,tumor of liver）是指发生在肝脏部位的肿瘤病变。肝脏是肿瘤好发部位之一,良性肿瘤较少见,恶性肿瘤中转移性肿瘤较多。原发性肿瘤可发生于肝细胞索、胆管上皮、血管或其他中胚层组织,转移性肿瘤中多数为转移性癌,少数为转移性肉瘤。
经皮肝穿治疗隐源性肝脓肿
由不明原因引起的肝脓肿，称隐源性肝脓肿，可能肝内原有隐匿性病变，当机体抵抗力减弱时，病原菌在肝内繁殖，发生肝脓肿。治疗主要是大量应用抗菌药物，脓肿形成后手术治疗，但是年老体弱、全般情况不佳病人不能耐受手术，大量应用抗菌药物，可能引起严重的肝肾功能损害，治疗比较棘手，经皮肝穿治疗直径小于125px隐源
爱肝日：别拿脂肪肝不当事儿
3月18日是“全国爱肝日”。综合上海、广东等城市调查结果，我国普通人群脂肪肝患病率已超过乙肝，成为我国第一大肝病。近日，在接受《中国科学报》采访时，多位专家指出，别拿脂肪肝不当事儿，若任其发展，可能危及生命。酗酒、肥胖多为病因 专家指出，脂肪肝可分酒精性脂肪肝与非酒精性脂肪肝两大类。
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定1
㈣ DNA聚合酶 如前所述，选用合适的DNA聚合酶进行测序反应也是保证测序质量的重要因素之一。常用于双脱氧末端终止法测序的有几种不同的酶： 1．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段（Klenow片段） 此酶是最早用于建立Sanger测序的酶。但通常会有两个问题：①Klenow片段的持续合成能力较
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定2
目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法（双脱氧链终止法）和Maxam（1977）提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都同样生成相互独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组核苷酸都有共同的起点，却随机终止于一种（或多种）特定的残基，形成一系列以某一特定核苷酸
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定3
2．利用末端转移酶和α-32P-ddNTP标记DNA的3ˊ-末端 在二价阳离子存在下，末端转移酶催化dNTP加入DNA分子的3ˊ-羟基末端，如果作为底物的核苷酸经过修饰（如ddNTP），则可以在DNA的3ˊ-OH上仅加入一个核苷酸。对于双链DNA片段，亦存在DNA的两侧均被标记问题，可通过上述同
DNA重组技术(DNA－Recombination)
一、DNA 的酶切与连接（1）酶切反应：同质粒DNA 的鉴定，只不过是质粒DNA 换为载体DNA 。若大量酶切，则成比例增加。（2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。（3）15000rpm离心15min，弃上清。（4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定2
（1）CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子（如Ca2+、Mg2+等）低渗溶液中时，细菌细胞膨胀成球形，处于感受态；此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面，在丰富培养基中生长数小时后，球状细胞恢复原
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定1
重组DNA是在体外用限制性内切酶，将不同来源的DNA分子进行特异地切割，获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接，从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞，在宿主细胞中进行无性增殖，获得大量的目的基因或DNA片段，此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体1
载体（vector）是携带靶DNA（目的DNA）片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型，亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体2
二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体，大多数具有编码多种蛋白质的基因，能利用宿主细胞的蛋白质合成体系，进行生长和增殖。构建的噬菌体载体，以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA，全部序列已知，共编码50多个基因。其中约一半基因参与
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体3
在作为载体时，这些噬菌体有一个很大的优点，即克隆到M13mp载体的外源DNA片段（双链），在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆，可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板：①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板；②制备仅有一条
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定3
当多克隆位点有外源DNA片段插入时，破坏此酶的N端阅读框架，产生无α互补功能的N端片段，因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色，见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短，不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框，有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4
肝昏迷的介绍
肝昏迷（hepaticcoma）是严重肝病引起的、以代谢紊乱为基础的中枢神经系统的综合病征，以意识障碍和昏迷为主要表现。临床上可分为急性和慢性肝昏迷两大类。急性肝昏迷的病因主要包括急性病毒性肝炎、药物性肝炎、化学药品或毒蕈（xùn）中毒、急性妊娠脂肪肝等。
肝肿瘤的诊断
血清甲胎蛋白(AFP)测定 本法对自然诊断肝细胞癌有相对的专一性放射免疫建立法测定持续血清AFP≥ug/L并能排除妊娠活动性肝病生殖腺胎胚源性肿瘤等即可考虑肝癌的诊断基因但临床硕士上约%的肝癌医疗病人AFP为阴性如此外同时全国应用小扁豆凝集素亲和交叉免疫至今电泳自显影法检测AFP异质体可使肝癌
肝外伤的介绍
肝外伤是腹部外伤中较常见而严重的损伤，其发生率仅次于脾破裂而居第2 位。其中严重肝外伤的伤情复杂，并发症多，病死率高。 病人一般有明确的右侧胸腹部外伤史，清醒的病人诉右上腹疼痛，有时向右肩部放射。觉口渴、恶心、呕吐。肝外伤的体征主要是低血容量性休克和腹膜炎。个别病人发生腹内大出血，还可以出现腹胀
怎样预防肝衰竭？
肝衰竭的预防，首先强调病因的预防： （1）对于存在慢性肝炎病毒感染的患者，应做到每年定期检查肝功能和乙肝病毒复制状态，发现肝功能异常，在专科医生指导下及时采取有效治疗措施。，慢性肝炎患者一旦出现黄疸就要及时住院，警惕肝衰竭； （2）已经口服抗病毒药物治疗的患者，不可擅自停用药物，一旦停药会造
肝肿瘤的诊断
血清甲胎蛋白(AFP)测定 本法对自然诊断肝细胞癌有相对的专一性放射免疫建立法测定持续血清AFP≥ug/L并能排除妊娠活动性肝病生殖腺胎胚源性肿瘤等即可考虑肝癌的诊断基因但临床硕士上约%的肝癌医疗病人AFP为阴性如此外同时全国应用小扁豆凝集素亲和交叉免疫至今电泳自显影法检测AFP异质体可使肝癌
肝穿刺的意义
一般而说，不少肝病患者经过病史询问和体格检查，或者在辅以必要实验室和影像学检查，就可确诊。但是，有些不能明确诊断疾病，只有通过肝穿刺活检，进行病理学检查才能下结论，如淋巴瘤、肝癌、结核等。还有些疾病诊断起来有困难，需要肝活检与临床症状相结合，才能作出诊断，如自身免疫性肝炎、慢性肝炎、原发性胆汁肝
肝穿刺的意义
一般而说，不少肝病患者经过病史询问和体格检查，或者在辅以必要实验室和影像学检查，就可确诊。但是，有些不能明确诊断疾病，只有通过肝穿刺活检，进行病理学检查才能下结论，如淋巴瘤、肝癌、结核等。还有些疾病诊断起来有困难，需要肝活检与临床症状相结合，才能作出诊断，如自身免疫性肝炎、慢性肝炎、原发性胆汁肝
肝昏迷的病因
介绍 (1)肝硬化，以肝炎后肝硬化最多见。(2)重症肝炎，主要是乙型肝炎，其次为甲型肝炎和非甲非乙型肝炎，以及中毒性肝炎、药物性肝炎。 (3)原发性肝癌。 生物化学机制 关于氨中毒的机制，据认为是由于肝功能不全情况下，血氨的来源增多或去路减少，引起血氨升高，脑组织对氨毒性极为敏感，因而出
肝淤血的症状
1．肝脏肿大：因淤血，肝内血液量增加，肝脏的大小和重量增加。正常时在肋弓后缘触不到的肝脏此时可触摸到。 2．腹水增加：因肝脏淤血，门静脉及汇入门静脉的肠道、肠系膜、大网膜等处的静脉发生淤血。另外肝细胞的病变使白蛋白的合成减少，血浆渗透压降低。由于这些原因，使漏出性腹水增加。 3．呕吐：肝肿大
肝大的诊断
1、病毒性肝炎 病毒性肝炎导致肝脏肿大者常有与病毒性肝炎患者密切接触、不洁饮食或输血、药物注射史。临床表现为乏力、食欲减退、恶心、腹胀、肝区疼痛等，体征有肝脏肿大、肝区疼痛、黄疸等，肝功能检查血清酶学活力增高，血清学检查可检测到各型肝炎（甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型）病毒抗原或抗体。 2、中毒
肝穿刺的简介
肝穿刺就是肝脏组织活检。肝穿刺的创伤性很大，导致很多患者不易接受，在临床也不把肝活检作为常规检查。但肝穿刺活检准确率会在80%以上，是目前比较好的检查手段。
肝厥的病因
肝厥多因肝气严重损害，浊毒痰火内盛，不得外泄而熏蒸、蒙闭脑神。在肝病症状基础上，出现以神识昏蒙为主要表现的肝病及脑的厥病类疾病。